嗜水气单胞菌J-1株OmpA融合蛋白的高效表达及免疫原性分析

以嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）J-1株基因组为模板，根据GenBank已发表的嗜水气单胞菌外膜蛋白的基因序列设计1对引物，扩增去除信号肽序列的成熟外膜蛋白OmpA的基因片段，定向克隆至表达质粒pET32a（＋）中，重组质粒经限制性酶切鉴定后测序。结果表明，插入片段长度为948bp，与NCBI上登录的几个相关序列相比，同源性在93．1％-95％之间，缺失4个氨基酸。将重组原核表达质粒pET32a-OmpA转化至大肠杆菌BL21（DE3），经诱导可表达分子量约57．4kD的蛋白，凝胶薄层扫描显示OmpA在转化菌中表达量占全菌蛋白的50％以上。用兔抗J-1株总外膜蛋白血清进行Western blot，在57．4kD处有明显反应条带。融合蛋白经Ni-NTA树脂柱亲和层析纯化后免疫新西兰兔制备抗血清，ELISA效价达1：12800以上。Western blot检测结果显示，该血清与9株具有代表性的气单胞菌的分子量约35kD的外膜蛋白均有较强反应，说明所表达的融合蛋白不仅保持原有外膜蛋白的免疫原性，而且提示OmpA可能是嗜水气单胞菌的共同保护性抗原。[中国水产科学，2008，15（2）：301—306]     

钙制剂在兽医临床上的应用

目前,我国兽医临床上常用的钙制剂有氯化钙、葡萄糖氯化钙、酒精葡萄糖氧化钙、溴化钙、碘化钙以及一些口服钙粉、骨粉、贝壳粉等含钙性添加剂.笔者在多年临床工作及科研活动中,应用本类药剂治疗和预防十种畜禽疾病获得了较好的疗效,积累了一定的经验,现总结如下,以供同仁参考.     

牙鲆肌肉生长抑制素(MSTN)基因克隆

采用同源克隆及基因组步移的方法,分离克隆了牙鲆肌肉生长抑制素(MSTN)基因.经过序列分析及cDNA验证,牙鲆MSTN基因具有3个外显子和2个内含子,编码377个氨基酸.5'侧翼区含有8个TATA框,一个CAAT框,6个E框;3'侧翼区含有加尾信号.通过同源分析,牙鲆MSTN C末端含有9个保守半胱氨酸残基和一个RVRR蛋白酶酶切位点;通过进化树分析,牙鲆MSTN与鱼类MSTN基因聚为一支.RT-PCR分析表明,牙鲆MSTN在胚胎发育中不表达或表达量较低,说明MSTN在牙鲆胚胎发育中并不起重要作用;其在各组织中的表达,随个体和环境的不同而有差异,暗示MSTN的表达受外界因素调控.     

酸度计连续滴定法测定果汁中总酸及氨基态氮

以浓缩果汁为样品,用酸度计法先进行总酸的测定后,再向混合液中加入甲醛继续进行氨基态氮的连续滴定。测定结果表明,对果汁中总酸和氨基态氮的分别滴定所得结果和对二者的连续滴定所得结果完全一致。这样由原来需做4个平行样节省到只需做2个平行样就可同时测定2个项目,可以省一半时间和试剂。     

巧施硫酸铵效果好

新宾县位于辽宁东部山区,水旱田不施用硫酸铵已有20多年了.近几年调查发现土壤中硫元素缺乏,个别地块严重缺乏.主要缺硫症状是玉米、高粱苗期植株矮小瘦弱,上部叶片先黄化,甚至茎和叶缘变红;大豆叶片卷曲,叶背红色;水稻植株淡绿茎细,僵直,分蘖少.我们在生产中施用硫酸铵,既补充了氮元素,又补充了硫元素.     

酵母表达典型猪瘟E2亚单位疫苗对致死量攻毒提供保护

典型猪瘟（CSF）由典型猪瘟病毒（CSFV）引起，是一个高度传染的猪病，给猪业生产造成巨大的经济损失。病毒衣壳糖蛋白E（ms）和E2是感染该病毒后诱导产生CSFV抗体的主要靶向目标。毕赤酵母表达E2蛋白（yE2）可产生免疫保护．对抗CSFV攻毒。     

白花泡桐尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶mRNA全序列克隆及序列分析

尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-Glucose Pyrophosphorylase UGPase)是白花泡桐(Paulownia fortunei (Seem.)Hemsl.)纤维素特异途径的关键酶.在经过对其他物种UGP mRNA序列的对比分析后,设计保守区简并引物,首先用RT-PCR方法得到413 bp UGP mRNA部分序列,之后通过RACE方法,成功克隆得到包括5'UTR和3'UTR在内的UGP全部mRNA序列,并进行了分析,所得UGP mRNA全序列共1 694个碱基,CDS共1 428个碱基(112-1539),编码氨基酸475,和其他多个物种的UGP序列比对结果显示相似度均在80％以上.     

柴油机冬季使用技术保养

黑龙江省是我国的粮食主产区,大型国有农场遍布各地,各类农业机械普及面广,数量庞大.而黑龙江省地处我国北方,无霜期较短,冬季气候寒冷,温度的巨大变化对于农业机械装备的维护和保养都有了新的要求.特别是柴油机冬季使用的正确保养.在冬季由于柴油机机体温度低、机油黏度大、运动阻力大,柴油机的起动会变得困难,配套拖拉机、汽车、工程机械的传动系和行走系的润滑油也会因低温而使黏度增加,阻力增加.     

论中国传统和谐观对当代文化发展的启示

文化的发展不能滞后于经济的发展,在我们不断推行新型文化建设的时期,需要注重中国传统和谐观对我国文化发展所具有的良好导向作用。中国传统和谐观主要体现在个人和谐、社会和谐及自然和谐三个层面。