杜仲梦尼夜蛾CD36家族同源基因克隆与组织分布研究

目的 揭示杜仲梦尼夜蛾CD36家族同源基因神经元膜蛋白(SNMPs)和b族清道夫受体(SRb)的序列特征和组织分布情况。 方法 设计特异性引物克隆杜仲梦尼夜蛾SNMPs和SRb基因,对这些基因编码的蛋白进行同源建模;通过荧光定量PCR分析这些基因在不同组织的表达情况。 结果 在杜仲梦尼夜蛾中鉴定得到3个CD36家族同源基因（OsonSNMP1、OsonSNMP2和OsonSRb1）;这些基因编码的蛋白具有2个跨膜区域和1个细胞外结构域。空间结构预测发现,这些蛋白的胞外结构域包含1个主要由反向平行β-折叠构成的桶状核心和1个富含疏水性氨基酸残基的α-螺旋;荧光定量PCR结果表明,OsonSNMP1、OsonSNMP2和OsonSRb1均在触角中大量表达;OsonSNMP1在雄虫触角中的表达水平显著高于雌虫触角,OsonSNMP2在雌虫触角的表达水平显著高于其他组织,OsonSRb1在雄虫触角中大量表达外,还在雌雄虫的口器中大量表达。 结论 本研究发现OsonSNMP1、OsonSNMP2和OsonSRb1编码的蛋白具有与脊椎动物CD36家族受体类似的空间结构,与嗅觉器官高度关联的表达模式表明这些基因可能在杜仲梦尼夜蛾嗅觉系统中发挥了功能,以上结果为探究杜仲梦尼夜蛾CD36家族同源基因的嗅觉功能提供了数据。     

杭嘉湖面源污染林业工程生态治理原理与技术研究

梳理了国内外面源污染治理研究进展,并在此基础上,论述了面源污染生态治理的原理。针对杭嘉湖面源污染,提出了4种生态治理技术措施：水源涵养林林结构优化技术,水系岸带生物防护技术,集水区人工塘渠－湿地复合系统建设技术,污染水体的植物修复技术。     

Ameliorative Effects of Oyster Protein Hydrolysates on Cadmium-Induced Hepatic Injury in Mice

Cadmium (Cd) is a widespread environmental toxicant that can cause severe hepatic injury. Oyster protein hydrolysates (OPs) have potential effects on preventing liver disease. In this study, thirty mice were randomly divided into five groups: the control, Cd, Cd + ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, 100 mg/kg), and low/high dose of OPs-treatment groups (100 mg/kg or 300 mg/kg). After continuous administration for 7 days, the ameliorative effect of OPs on Cd-induced acute hepatic injury in Cd-exposed mice was assessed. The results showed that OPs significantly improved the liver function profiles (serum ALT, AST, LDH, and ALP) in Cd-exposed mice. Histopathological analysis showed that OPs decreased apoptotic bodies, hemorrhage, lymphocyte accumulation, and inflammatory cell infiltration around central veins. OPs significantly retained the activities of SOD, CAT, and GSH-Px, and decreased the elevated hepatic MDA content in Cd-exposed mice. In addition, OPs exhibited a reductive effect on the inflammatory responses (IL-1β, IL-6, and TNF-α) and inhibitory effects on the expression of inflammation-related proteins (MIP-2 and COX-2) and the ERK/NF-κB signaling pathway. OPs suppressed the development of hepatocyte apoptosis (Bax, caspase-3, and Blc-2) and the activation of the PI3K/AKT signaling pathway in Cd-exposed mice. In conclusion, OPs ameliorated the Cd-induced hepatic injury by inhibiting oxidative damage and inflammatory responses, as well as the development of hepatocyte apoptosis via regulating the ERK/NF-κB and PI3K/AKT-related signaling pathways.     

不同空化射流条件下大豆蛋白-白藜芦醇互作结合机制与抗氧化活性研究

为探究空化射流预处理对大豆分离蛋白-白藜芦醇（SPI-RES）复合物的影响,对SPI进行空化射流预处理（0、2、4、6、8、10min）后,与RES非共价结合形成复合物。通过荷载量和包埋率研究了SPI对RES的结合情况,采用内源荧光光谱、傅里叶红外光谱及分子对接技术研究了SPI和RES之间的相互作用机制,通过粒径、ζ-电位、表面疏水性、抗氧化活性等考察了复合物的物理化学性质和功能特性。结果表明：经过一定时间的空化射流处理后,SPI对RES包埋率和荷载量显著增加,复合物粒径和ζ-电位分别减小和增大。内源荧光光谱表明RES对SPI的淬灭为静态淬灭,反应是自发进行的。傅里叶红外光谱表明适当的空化射流预处理促进了SPI从有序结构转变为无序结构,从而结合更多的RES。热力学参数和分子对接结果表明疏水相互作用是主要作用力,还涉及氢键。此外,适当的空化射流预处理后,SPI-RES复合物表面疏水性及抗氧化活性均有所增加。本研究为空化射流预处理大豆分离蛋白应用领域的开拓和脂溶性活性物质保健食品的开发提供了前期理论基础。     

蛋白酶K水解蜂王浆蛋白的研究

为评价不同蛋白酶水解蜂王浆蛋白的效果,本研究以蛋白酶K为试验用酶,对蜂王浆蛋白的最佳水解条件及水解产物稳定性进行了研究.结果显示,蛋白酶K水解蜂王浆的最佳条件为温度55℃,pH 7.5,酶添加量60 g/mL,氯化钙添加量0.01 mol/L,反应时间4 h,水溶性蛋白质提取率为31.03%;蛋白酶K水解蜂王浆蛋白的产物在酸、碱、热条件下能够保持较高的稳定性.蛋白酶K水解蜂王浆的效果介于植物性蛋白酶及动物性蛋白酶之间,可用于生产富钙型的水溶性蜂王浆.     

3种处理方式对小桐子蛋白基胶黏剂的影响

在前期豆粉改性小桐子蛋白基胶黏剂的基础上,研究NaOH-尿素、Ca（OH）2/NaOH和NaHSO3处理对小桐子蛋白基胶黏剂性能的影响。结果表明：采用复合碱Ca（OH）2/NaOH处理小桐子蛋白制备的蛋白基胶黏剂性能未达预期效果;采用NaOH-尿素处理小桐子蛋白制备的蛋白基胶黏剂,仅加入交联剂CRO和pMDI制备的蛋白基胶黏剂胶合板干、湿强度满足GB/T 98463—2004《胶合板》中Ｉ类胶合板的性能要求;采用NaHSO3对小桐子蛋白进行处理,加入的交联剂（KF、CRO和pMDI）制备的蛋白基胶黏剂胶合板干、湿强度均能满足GB/T 98463—2004《胶合板》中Ｉ类胶合板的性能要求,尤其以加入交联剂CRO和pMDI制备的胶合板性能远超这一标准。3种方式处理小桐子蛋白均能与加入交联剂（KF、CRO和pMDI）的发生一定的交联反应,使小桐子蛋白基胶黏剂的干、湿强度有所提高,其中湿强度提高明显。NaHSO3对小桐子蛋白进行处理,尽可能地保留蛋白大分子结构,使得以其制备的小桐子蛋白基胶黏剂干、湿强度较另2种处理有所提高。     

全基因组预测枯草芽孢杆菌BEST195的分泌蛋白

枯草芽孢杆菌BEST195作为纳豆菌的一种,是纳豆生产的重要菌株之一。利用SignalP、ProtComp、TMHMM、Phobius、LipoP、TatP等预测程序对该菌中4456条蛋白质序列进行分泌蛋白找寻,同时,对上述分泌蛋白的氨基酸分布、信号肽长度大小、信号肽切割位点等性质进行分析。结果表明：枯草芽孢杆菌含有分泌蛋白102个,其氨基酸长度、信号肽长度与植物病原菌不同;信号肽切割位点属于A X A类型,与其他已经报道的植物病原真菌、细菌以及卵菌中分泌蛋白信号肽切割位点一致。通过上述生物信息学分析方法有效地实现了枯草芽孢杆菌BEST195分泌蛋白的预测,分泌蛋白的信号肽切割位点具有物种保守型特点。     

小桐子蛋白基胶黏剂的改性研究

在纯碱NaOH和混合碱（Ca(OH)2/NaOH）降解改性小桐子蛋白的基础上,选取交联剂甲醛对小桐子胶黏剂进行改性。结果表明：单纯碱NaOH处理小桐子制备的胶黏剂不具有耐水性,混合碱（Ca(OH)2/NaOH）处理小桐子蛋白胶黏剂具有一定的耐水性。胶黏剂的性能测试和DSC测试结果表明,无论是单纯碱NaOH,还是混合碱（Ca(OH)2/NaOH）处理小桐子,其蛋白的降解程度有限,导致与后续的甲醛交联反应不理想。     

鲁氏耶尔森氏菌外膜蛋白ompF基因的分子克隆、生物信息学与免疫原性分析

为筛选潜在的保护性抗原基因研制鲁氏耶尔森氏菌（Yersinia ruckeri）基因工程疫苗,实验利用特异性引物扩增分离自斑点叉尾（Ictalurus punctatus）的Y.ruckeri外膜蛋白omp F基因并对其进行分子克隆,应用相关软件和程序对其核苷酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,并进行了omp F蛋白的表达和免疫原性检测。结果显示,omp F基因全长1 095 bp（Gen Bank登录号KP159420）,包含一个编码364个氨基酸的完整开放阅读框,其氨基酸序列具有极高保守性,与Y.ruckeri外膜穿孔蛋白omp F（Gen Bank登录号ADK27779.1）亲缘关系最近,序列一致性为99.2%,进化树聚为一支;具有1个革兰氏阴性菌穿孔蛋白保守结构域,存在1个信号肽和1个跨膜区,是一种跨膜蛋白;具有12个与免疫相关的抗原决定簇区域。SDS-PAGE分析发现该蛋白主要以包涵体形式表达在沉淀,经Western-bolt显示omp F蛋白具有较好的免疫原性。以上结果表明omp F基因可作为Y.ruckeri基因工程疫苗的候选抗原基因。 

     

不同的水煮条件对花刺参体壁形态结构和蛋白溶失的影响

研究了花刺参( Stichopus monotuberculatus) 体壁在不同水煮温度( 50 ℃、60 ℃、70 ℃、80 ℃和90 ℃) 和时间( 10 min、20 min 和30 min) 条件下的失重率、蛋白溶失率、横截面形态结构、新鲜体壁含水量和最大转变温度的变化。结果显示, 新鲜花刺参体壁含水量约为93. 67% ; 随着温度和时间的递增, 体壁水煮于50 ～60 ℃开始收缩失重, 失重率逐渐升高; 从70 ～80 ℃开始蛋白溶失率逐渐升高; 新鲜体壁最大转变温度为73. 5 ℃, 与海参体壁收缩和蛋白溶失发生温度相一致。采用扫描电子显微镜观察体壁横截面形态结构发现, 体壁胶原纤维网络密度从70 ℃开始显著升高, 并出现空洞。因此, 花刺参的水煮条件应为70 ℃加热20 ～30 min, 或80 ℃加热不超过10 min。