松茸菌丝超微结构观察

用电镜技术观察了分离自四川省雅江县黄背高山栎林的松茸菌根菌的超微结构。扫描电镜结果表明:松茸菌落自然表面都相似,由大量致密的、直径约为1 2～3 2μm绒毛状菌丝构成。对F11菌株的透射电镜结果表明:1.多数松茸菌丝细胞直径为0 7～1 3μm,中空,仅见细胞壁和一些膜状结构;2.少数菌丝细胞内有单个的细胞核,位于非菌丝顶端区域,有明显的核仁;少数细胞正在进行有丝分裂;3.菌丝具有明显的隔膜;4.有的松茸菌丝细胞有大量线粒体存在。     

植物透射电镜样品制备技术Improvement and comparison with different resins of madding ultrathin section for the transmission electron microscope specimen-making的改进及不同树脂选择比较

针对植物细胞壁组织坚硬,透射电镜样品制备难度大的问题,笔者对样品制备程序化进行了探讨;同时,在样品制备过程中对不同树脂配方进行了选择和比较,结果表明：在经优化的样品处理下,不同树脂均能观察到植物样品的超微结构,结构清晰,且环氧树脂618包埋的样品受环境影响较小。In view of the hard plant cell wall, there is some problem during the transmission electron microscope (TEM) sample preparation. The authors probed into procedural sample preparation, at the same time, different resins were selected and compared. The results showed that ultra-microstructure were observed distinctly using different kinds of resin under the same conditions, the epoxy resin 618 is less affected by the environment in the process of embedding.     

血清4型禽腺病毒的实验室诊断方法研究进展

自2015年来,我国河南、山东、广东等地许多集约化家禽养殖地区均有血清4型禽腺病毒（FAdV-4）感染导致的心包积液综合征暴发,患病鸡死亡率较高,严重制约了我国家禽业的可持续发展。然而,目前对FAdV-4的分子流行病学和致病机制所知甚少,且国内尚无获批的商品化疫苗,给该病的防控造成了困难。本文对近年来FAdV-4的实验室诊断方法的研究进展进行了综述,以期为我国新发FAdV-4的防控提供理论依据和技术支撑。     

日本柑橘黄龙病病原体电镜观察及PCR检测

对日本柑橘黄龙病病原体的形态结构进行了电镜观察,结果发现柑橘黄龙病病菌日本株系绝大多数是球形和短椭圆形,极少观察到棒状形态,直径为100～500nm,外被一层胶状物质包围,厚约10～50nm,这与其他地区发现的柑橘黄龙病病原体形态不同．PCR检测表明,以硅藻土法提取的DNA为模板,利用Ready-To-Go^TM PCR bead法可以得到理想结果。     

巴布亚企鹅(Pygoscelis papua)精子形态及超微结构观察

为探明巴布亚企鹅精子的形态结构及超微结构特征，试验对5只处于繁殖季节的雄性巴布亚企鹅采用无创的背部按摩法获得新鲜精液，经扫描电镜和透射电镜对精子形态与超微结构分别进行分析。结果表明：利用扫描电镜观察到的巴布亚企鹅精子属于典型的鞭毛精子，头部呈椭球形，长11.40～11.60μm;精子中段较短，长1.83～2.69μm;精子尾部细长，长47.50～59.74μm;精子超微结构显示，精子的头部长而窄，呈椭球形，在中段发现了自噬体，长0.61～0.81μm,呈新月形，精子的尾部细长、呈鞭毛状。同时观察到了9+2微管结构0.30～0.42μm与尾部中心轴平行排列。此研究从试验层面阐明了巴布亚企鹅精子的超微结构，对巴布亚企鹅授精机制的研究、繁殖和种质资源库建设提供了基础，为有效遏制巴布亚企鹅遗传多样性的降低、也为珍稀动物巴布亚企鹅异位保存提供技术支持。     

犬细小病毒新乡株的分离鉴定及其VP2 基因的序列分析

【目的】探究河南省新乡地区犬细小病毒（Canine parvovirus，CPV）的流行和遗传变异进化情况，为有效防控区域性 CPV 流行提供参考。【方法】对从新乡地区宠物医院收集的 23 份疑似患犬细小病毒病的病犬粪便样品和眼、鼻、口、肛拭子预处理后进行 PCR 检测。将 PCR 检测结果为阳性的样品采用浸泡、过滤除菌处理后接种于单层猫肾细胞 CRFK 进行病毒增殖培养，将分离的病毒置于透射电子显微镜下观察。参考 GenBank中已收录的国内外 CPV 不同亚型的毒株序列，经 PCR 分段扩增、测序后拼接获得病毒全长基因，利用分子生物学软件对病毒基因进行序列分析和氨基酸序列同源性分析。【结果】从送检的样品中成功分离出 1 株 CPV，命名为 XX-2022 株。该病毒株能使 CRFK 细胞产生明显病变，导致细胞出现变圆、拉网和脱落。通过透射电镜可观察到典型的病毒粒子，呈圆形或六边形，直径约 25 nm，无囊膜。通过 PCR 分段扩增拼接后获得的病毒全基因组序列全为长 4 588 bp，CPV 系统进化分析结果显示，XX-2022 株与 Canine/SH/1/2019（MN840830.1）株的亲缘关系较近。利用 MegAlign 软件对 XX-2022 株 VP2 基因推导的氨基酸序列进行分析，该毒株与 YANJI-5（MW715601）的 VP2 氨基酸序列在同一小分支，氨基酸同源性为 99.7%。根据 CPV 的基因分型原则，最终确定 XX-2022 株 CPV 属于 CPV-2a 型。【结论】从临床病料中成功分离出 1 株 CPV，经分析确定为 CPV-2a 型，研究结果可为新乡地区 CPV 的流行病学、致病性及生物学特性研究提供依据，为 CPV 的区域流行及有效防控提供参考，为新疫苗的研发提供地方种毒。     

虾血细胞虹彩病毒在青虾中的感染情况调查分析

本研究对浙江省湖州市德清县的青虾养殖塘进行虾血细胞虹彩病毒(SHIV)的监测工作。2020年7—10月分别在2个青虾养殖户中检出感染SHIV的青虾,2021年在对德清县6个乡镇共计12个监测点中发现,50%养殖户的青虾有感染SHIV的情况。对SHIV阳性的青虾肝胰腺进行组织病理学染色分析表明,肝胰腺组织中存在核固缩的现象,同时透射电镜可以观察到疑似SHIV病毒粒子的结构。本研究初步探究了SHIV在日本沼虾中的流行情况,为SHIV与青虾病害的相关性提供了研究基础。