H5N1亚型禽流感病毒和新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞IFN-β基因的动态表达

根据鸡β-干扰素(ChIFN-β)基因保守序列设计引物建立了检测鸡IFN-βmRNA表达水平的荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并对H5N1亚型禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒强毒株(vNDV)感染后3、6、12、24、30 h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中IFN-βmRNA表达水平进行了检测。结果显示,建立的RRT-PCR特异性好,对鸡IFN-βmRNA的扩增效率为94.18%,线性范围为10-8~10-3,相关系数为0.992,最低能检出48拷贝/反应。AIV在感染CEF后6、12 h显著抑制IFN-βmRNA的表达,24 h开始诱导IFN-βmRNA表达,30 h时IFN-βmRNA水平显著升高;vNDV在感染CEF后的24 h内显著抑制IFN-βmRNA的表达,30 h时则显著诱导IFN-βmRNA表达。本试验结果为进一步研究H5N1和NDV与机体的相互作用提供了有价值的信息。     

李宝聚博士诊病手记（四十六） 抗病诱导剂在蔬菜病害防治中的应用

在蔬菜生产中，通常采用喷施化学农药的方法来防治病害，但是长期大量使用化学农药，将导致病原菌产生抗药性、农产品中药剂残留和环境污染等一系列的问题，严重制约了农业的可持续发展。随着人们对食品安全性认识的提高，寻求无公害、无污染的病害防治新方法势在必行。     

Baicalin Induces IFN-α/β and IFN-γ Expressions in Cultured Mouse Pulmonary Microvascular Endothelial Cells

We studied the effect of baicalin,an extract from Radix Scutellariae (a traditional Chinese medicine) in inducing mouse pulmonary microvascular endothelial cells (MPMVECs) to produce interferons (IFNs)...     

鸭IFN-α成熟蛋白基因的克隆

干扰素（IFN）是一类能诱导产生多种广谱抗病毒蛋白的细胞因子．为了克隆樱桃谷鸭α干扰素成熟蛋白基因，从GenBank搜索出鸭α干扰素基因的序列，参照AY879230设计引物．利用PCR技术从鸭肝脏提取的基因组DNA扩增目的基因。将目的基因与pMD18-T我体进行连接，转化到大肠杆菌DH50α感受态细胞中．涂抹在含Amp＋的LB固体培养基上。应用蓝白斑筛选，挑选白斑接种到LB液体培养基中。提取重组质粒DNA，对质粒DNAPCR扩增和内切酶酶切鉴定为阳性的重组质粒进行测序。测序结果表明．鸭α干扰素成熟蛋白基因长度为486bp，为进一步研究鸭α干扰素基因表达、生物学活性和应用奠定基础。     

疑似猪丹毒和猪链球菌混合感染病例的治疗过程

2010年9月份,老家买来一头24kg的仔猪(小母猪),准备过年吃肉。买来后精神不振,吃的不多,认为是断奶应激,没多注意,之后吃的越来越少。我就进行了诊治。     

猪病毒性疾病该如何选择抗病毒药物？（下）

（二）抗病毒细胞因子制剂 1．干扰素（IFN）。干扰素是机体受病毒或其他干扰素诱生剂刺激巨噬细胞、淋巴细胞以及体细胞产生的具有高活性的多种生物学功能的糖蛋白（多种生物学活性的细胞因子）。在正常机体的脾脏、肝脏、肾脏、外周血淋巴细胞和骨髓中都可以检出。干扰素根据抗原性的不同，     

应用果蝇胚胎细胞表达系统分泌表达猪干扰素α的试验

干扰素作为一类具有多种生物学功能的细胞因子,已经在人类疾病的防治中得到广泛应用.在兽药行业,大量的临床试验证明了干扰素激活免疫系统快速、广谱的有效性,但干扰素蛋白的活性和使用成本一直是制约其在兽药中应用的重要因素.为了探索人工重组的干扰素在兽医临床上应用的可行性,本文应用果蝇胚胎细胞表达系统筛选出了稳定表达猪干扰素α(rPIFNα)的细胞系,利用Western blot分析了细胞筛选前后的分泌蛋白的表达情况.结果显示,稳定表达细胞系的rPIFNα表达量较高,通过细胞试验证实,分泌表达的rPIFNα具有较强的抗病毒作用.本研究首次利用果蝇胚胎表达系统稳定表达猪干扰素,对干扰素在临床上应用是一个有益的尝试.     

肌注PHA对犬免疫球蛋白IgG的影响

植物血凝素（Phytohaemagglutinin，PHA）是一种有丝分裂原，主要用于激活免疫细胞-淋巴细胞，是一种干扰素诱导剂，不仅可以刺激机体产生白介素-2和干扰素，还可以刺激机体产生非特异性抗体。由于其较难提纯，且成本极高，所以一直以来仅在试验室中作为刺激淋巴细胞增殖的试剂。迄今为止、尚未发现PHA能抑制免疫应答。     

猪白细胞干扰素治疗猪蓝耳病的临床报告

2007年11月1日关勇猪场的三名饲养员在荣昌的双河、荣棕等地购进仔猪316头，在永川市关勇猪场饲养，11月3日部分猪出现食欲减少、嗜睡、体温升高、大便干燥等症状，遂请当地兽医进行治疗无效，已死亡9头。     

猪IFN-β的克隆与原核表达

根据已发表的AY687281基因序列,设计1对特异性引物,采用PCR方法从长白猪白细胞基因组中扩增到猪β干扰素基因,将PCR产物克隆到pMD18-T载体,进行序列测定。序列分析表明,获得的猪β干扰素基因全长561bp,编码186个氨基酸,与GenBank中AY687281基因序列同源性达99.2%,在28、34、128位核苷酸发生了点突变,由G变为A,由C变为G,由A变为G,由C变为T,导致10、12、43位氨基酸由A变为T,L变为V,E变为G,而在177位点核苷酸的突变没有改变氨基酸。将该基因克隆到pEGX-4T-1表达载体中,转化宿主菌Rosetta,对猪β干扰素进行原核表达。重组表达菌经IPTG诱导后,得到高效表达,所表达蛋白约为43 000,占总蛋白的39.3%,表达产物主要为包涵体。纯化后的包涵体具有抗病毒的生物学活性,能抑制口蹄疫病毒（FMDV）增殖。