一种克隆载体重组质粒pMD18-T Simple-PCV2的构建

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)的全基因组变异特性,试验设计了1对特异性引物,并从疑似断乳仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的病料中经PCR直接扩增出PCV2全基因组,再与载体pMD18-T Simple连接后形成重组质粒pMD18-T Simple-PCV2(命名为P-S-PCV2),经酶切鉴定、PCR鉴定和序列测定分析的阳性重组质粒被证明含有长为1 767 bp的PCV2片段,同时通过Blast与GenBank中国内外的部分PCV2毒株进行同源性比较分析。结果表明:与国内外12个毒株间的同源性介于95.0%～100%之间,与国内的河北株(HB株)亲缘关系最近,同源性高达100%;与澳大利亚株(AUT2株)亲缘关系最远,同源性为95.0%。说明来源不同国家和地区的猪圆环病毒2型毒株存在地域性差异。     

禽肺病毒研究进展

禽肺病毒(Avian pneumovirus,APV)在上世纪70年代于南非首先分离到,随后研究证实APV存在A、B、C、D 4个亚型。APV可以感染多种禽类,可导致感染动物鼻气管炎、肿头征、产蛋下降等疾病,给禽类养殖造成严重的危害。目前已经建立了一套成熟的APV检测系统,但由于APV在感染的宿主体内存活的时间很短,而且主要出现在疾病的早期,这给病毒的分离了很大的困     

鹧鸪源性粪肠球菌的分离与鉴定

肠球菌属在1984年从链球菌属中分离出来成为独立的新菌属,现根据DNA同源性,将其列为肠球菌属,仍属链球菌科[1].肠球菌是人的肠道正常菌群, 粪肠球菌属于肠球菌一种,其异位寄生则可引起人体多个系统的感染性疾病, 肠球菌广泛分布于自然界中,是人及动物粪便以及健康上呼吸道的常在菌,其致病机理并不完全清楚,在动物医学领域,对该病原的研究很少.     

小鼠睾丸Hsc70t基因的克隆与序列分析

为了获得小鼠睾hsc70t基因的开放阅读框,根据GenBank中已发表的hsc70t的基因序列设计了特异性引物(GenBank accessionNo:NM_013558),提取睾丸中的总DNA,利用PCR方法扩增hsc70t基因序列,连接到pMD18-T载体上,然后进行序列测定与序列分析.测序结果表明PCR扩增得到一条1926 bp左右的基因片段.所测序列被GenBank收录,收录号为EU549780,与GenBank上公布的小鼠hsc70t基因序列同源性达99.9%,与大鼠(Rattus norvegicus)、猕猴(Macaca mulatta)、黑猩猩(Pantroglodytes)、蟾蜍(Xenopus)、人类(Homo)和青鲻(Oryzias latipes)的相似性分别为94.4%、85.4%、84.9%、72.7%、71.9%、67.1%;进化树构建结果表明小鼠与大鼠距离最近.证实了hsp70基因的高度保守性,并为hsc70t的进一步研究和应用奠定了基础.     

鸡传染性支气管炎病毒BD01株S1基因的特性分析

用RT-PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒(IBV)DB01株S1基因,获得了约1.7 kb的基因序列,利用DNAMan软件对DB01株S1基因的核苷酸和氨基酸序列与标准疫苗株H120、H52和M41进行比较.结果表明,其同源性均低于80%,亲缘关系比较远.在DB01的S1蛋白氨基酸序列上出现了5个新的糖基化位点,1个糖基化位点丢失,其中有3个变异位点在抗原表位上.亲水性也发生了较大变化.     

鹅源腺病毒Y81G4株基因组末端倒置重复序列（ITR）的核酸鉴定 …

对鹅源腺病毒株Ｙ８１Ｇ４基因组两则末端序列测定和比较，鉴定其其ＩＴＲ区。Ｙ８１Ｇ４株ＩＴＲ全长为１２５ｂｐ，远长于其它禽１、２、３群腺病毒ＩＴＲ长度。在Ｙ１８Ｇ４株ＩＴＲ中有一些腺病毒ＩＴＲ序列特征：（１）Ｓ’－Ｃ（Ａ／Ｔ）（Ａ／Ｔ）ＮＴＣＡＴ－现毒典型起始序列；（２）９～１３ｂｐ存在腺病毒科共的（Ａ／Ｔ）Ｔ（Ａ／Ｔ）ＡＴＡ保守序列；（３）在ＩＴＲ区３７～４２ｂｐ出现的ＧＮＧＧＣＧ保守序列；（４）     

合格的动物源性饲料，来源于严格的监督管理

动物源性饲料原料的混杂性，不仅是增加了反刍动物饲用同源性饲料感染疯牛病和痒病的风险，劣质的动物源性饲料对猪禽等动物的健康饲养也存在着很大的潜在危险。要想管理好动物源性饲料的生产，必须了解和掌握动物源性饲料生产的全过程及其使用的原料，知己知彼才能管理到位。     

超强马立克氏病病毒的鉴定及病毒Meq基因序列的比较

对1例感染超强马立克氏病病毒的病例进行确诊,对感染病毒的Meq基因进行比较分析。采用病理解剖、PCR检测、病毒分离、动物试验和Meq基因序列分析,对感染病毒进行研究。病理解剖结果为病死鸡的肝脏、脾脏、腺胃、肌胃、十二指肠表现为肿瘤病变。PCR检测结果为病死鸡的组织病料感染马立克氏病病毒。病毒分离和动物试验结果证明该感染病毒是1株马立克氏病超强毒株,该病毒可以引起免疫过CVI988疫苗的鸡发病。Meq基因序列分析表明该病毒与7株马立克氏病病毒参考毒株的同源性为98.8%~99.6%,该病毒在Meq的第115、119和176位氨基酸突变同国内流行株,该检测病毒在Meq的第217位氨基酸突变同超超强马立克氏病毒株。结果表明,通过病理解剖、PCR检测、基因序列分析、病毒分离和动物试验,确诊病鸡感染超强马立克氏病病毒。     

提莫菲维小麦染色体的C-带分析

对提莫菲维小麦的根尖细胞染色体进行C-带分析,以明确提莫菲维小麦的染色体C-带带型特点。结果表明:提莫菲维小麦具有14对染色体,其染色体带型公式为:2 n=28=4 IT++4 IT++6 CIT++6 I+2 IT+2 CI+2 CIT+S+2 CIS,共包括98条带,其中长臂具有57条带纹,包括50条中间带(I),7条端带(T);短臂具有35条带纹,包括30条中间带(I),3条端带(T),2条随体带(S);另外还有着丝点带(C)6条。提莫菲维小麦G组染色体的异质化程度明显高于A组染色体,G组染色体的C-带带型与普通小麦B组染色体非常相似,因此G组染色体可能与B组染色体存在部分同源性。     

四个新城疫病毒强毒株HN基因的同源性分析

新城疫病毒（ＮＤＶ）四平株、昌黎株、青岛株、Ｆ４８Ｅ８株分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚增殖，蚀斑纯化（３代），生物学特性鉴定及结合基因序列分析，表明ＮＤＶ四平株、昌黎株、青岛株均为强毒株。经差数、蔗糖密度梯度离心提纯病毒，分别提取ＲＮＡ，利用一对特异性引物及ＲＴ－ＰＣＲ方法，一次性扩增出 ＮＤＶ四平株、昌黎株、青岛株和 Ｆ４８Ｅ８株的全长 ＨＮ基因，分别将该ＨＮ基因克隆入载体ｐＫＳ（－）并进行测序。序列分析表明，这４个毒株ＨＮ基因核苷酸长度均为１７１３ｂｐ，编码５７１个氨基酸，其中四平株和 Ｆ４８Ｅ８株含有５个糖基化位点，青岛株和昌黎株含有 ６个糖基化位点，四平株含有 １２个半胱氨酸残基，而昌黎株、青岛株和Ｆ４８Ｅ８株含有１３个半胱氨酸残基。３个野生毒株与Ｆ４８Ｅ８相比较，核苷酸序列同源性为８５．７％－９９．３％，推导的氨基酸序列同源性为 ８９．５％－９８．８％，其中 ＮＤＶ四平株与标准强毒 Ｆ４８Ｅ８同源关系最近，核苷酸同源性为 ９９．３％，推导的氨基酸同源性为 ９８． ８％。