小麦＋多花黑麦草不对称体细胞杂交获得杂种再生植株

为转移野生种的有利性状，进行了小麦体细胞不对称杂交研究，由小麦品种“京花１号”和多花黑麦草的悬浮系分离原生质体通过电融合得到了大量的再生愈伤组织，并分化出了９９株绿苗和大量白化苗。同工酶检测表明，所得到的植株带有多花黑麦草的部分遗传性状，是真杂种，为抑制亲本原生质体的分裂，分离原生质体前，多花黑麦草的悬浮细胞用软Ｘ－射线照射，以杀死部分细胞核，小麦的原生质体用２￣４ｍｍｏｌ／Ｌ的ＩＯＡ室温暗处理１     

金针菇杂交菌株的同工酶标记与菌株特性

采用垂直平板板聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）法，利用酯酶同工酶谱和可溶性蛋白ＰＡＧＥ表型的差异，对金针菇的杂交后代作了遗传分析和鉴定。结果表明，金针菇杂交亲本及其后代抽工酶箐型表现明显的多型性。４个杂交菌株的同工酶亲本有较明显的差异。２处生化（ＥＳＴ，ＰＲＯ）标记在杂交菌株中均表现有不同程度的遗传互补性，并有新的酶带产生。结合同工酶酶谱和标记杂合位点数目对杂种优势可进行早期预测和栽培验证。     

玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定的流程方法及注意事项

玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定较传统的生态方法具有速度快、准确可靠、成本低廉、技术比较容易掌握等优点,在检验工作中应用广泛。但它涉及到化学、生化、遗传学和植物学等多方面的知识,测定操作步骤较为繁琐,在实际操作中往往会出现一些问题,影响鉴定的正常进行。     

菜粉蝶颗粒体病毒DNA限制性内切酶图谱分析

采用“酶-SDS-酚”法提取的菜粉蝶(Pieris rapae)颗粒体病毒京农801株(PrGV-JN801)DNA,A260/A280=1.85,经琼脂糖凝胶电泳呈现一条带。三种限制性内切酶消化PrGV-JN 801 DNA,其结果分别为:Hind Ⅱ,12个片段;EcoR Ⅰ,15个片段;Bam HI,12个片段。三种酶切所得限制性片段累加分子量的平均值75.04×10~6道尔顿为PrGV-JN 801DNA的分子量。     

马铃薯纺锤块茎类病毒的检测和防治

马铃薯纺锤块茎类病毒病(potato spindle tuber viroid,PSTVd)是一种严重为害马铃薯生产的病害,降低产量20%—30%。防治的主要措施是应用无类病毒的种薯。由于目前还没有脱掉类病毒的有效措施,只能从未被饱和侵染的群体中鉴定筛选出未被侵染的个体,再脱掉其它病毒,作为核心繁殖材料。1987年以来,利用自制的电泳设备,以往复聚丙烯酰胺凝胶电泳法(return-polyacrylamide gel electrophoresis,R-PAGE)检测类病毒,筛选出未感病的个体,再用茎尖组织培养法脱掉其它病毒。经用马铃薯卷叶病毒等8种病毒酶标抗体鉴定筛选,获得既无类病毒也无主要马铃薯病毒的克新1、2、3和4号等主栽马铃薯品种的核心种。并已提供给省内外的良种场繁殖推广。1989和1990年抽样检测克山良种场繁殖的原种、一级和二级良种,未检测到类病毒。     

稻瘟病菌生理小种酯酶同工酶特性的研究

 运用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法对来自江、浙两省经全国统一鉴别寄主鉴定的稻瘟病菌7群12个生理小种的16个菌株菌体酯酶同工酶进行了分析比较,结果表明:稻瘟菌菌体酯酶同工酶带有13-18条,等电点分布范围为3.00-7.20。在等电点4.15附近有各生理小种共同的酶带。同一生理小种群内不同生理小种间酯酶同工酶的相似系数一般大于0.50,不同生理小种群的生理小种间酶谱的相似系数一般为0.30-0.40,也存在少数不是同一生理小种群的小种间酶谱相似系数大于0.50的情况。供试各生理小种间酶谱均存在不同程度的差异,表现为酶带数目的多少和等电点分布的不同。来自不同省份经鉴别寄主鉴定为同一生理小种的菌株间酶谱的相似系数亦仅0.05-0.60。研究结果初步反映出供试大多数稻瘟菌菌株间菌体酯酶同工酶的相似性与致病性有关,但也受菌株来源地生态环境影响。本文还讨论了稻瘟病菌致病性容易变异但在许多情况下又具有相对稳定性的可能机制,探讨在一定范围内聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术用于稻瘟菌生理分化和致病性变异监测的可能性及尚待进一步研究解决的穗题等。     

甘蓝夜蛾血球细胞离体培养的初步研究

本文对甘蓝夜蛾血球细胞的离体培养,以及细胞系的形态特征和生长特性进行了初步研究。利用M—M培养液,辅之以0.02％TC-199、0.06％胰蛋白(月示)和20％胎牛血清,采用单层培养法培养甘蓝夜蛾老熟幼虫的血细胞。结果原代培养仅历时35天就开始了第一次传代,共继代培养8次。细胞形态以圆形和梭形为主,圆形细胞直径为20～31μm,梭形细胞大小为18～20μm×35～50μm。利用第三代培养的细胞悬液,以3.5×10~5cells/ml浓度培养,其群体倍增时间约60小时。核型分析表明,细胞的染色体约呈圆球形,数目变化较大。经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,细胞的酯酶同功酶带为12条,其中有6条主带。培养的细胞于4℃直接冷冻保存可长达70天。