水牛同期发情技术的研究

采用不同药物处理和给药方式,对不同品种水牛在不同季节自然发情和同期发情配种后的受胎效果进行系统研究,以期建立一套稳定的适合水牛同期发情的处理方法。试验选取本地水牛(102头)、摩拉水牛(129头)、尼里/拉菲水牛(98头)和杂交水牛(326头)共655头,分为5个组进行比较试验。结果表明:河流型摩拉水牛和尼里/拉菲水牛的同期发情率和配种受胎率均高于杂交水牛和本地水牛(P<0.05),但同为河流型的摩拉和尼里/拉菲水牛之间没有差异(P>0.05),以本地水牛效果最差,其同期发情率和配种受胎率分别为74.51%和30.39%;应用不同的药物处理时,以GnRH+PGF2α+GnRH效果最好,同期发情率和受胎率分别为88.46%和46.38%,其同期发情率显著高于其他各药物组(P<0.05),而用PGc的效果最差(分别为79.10%和33.21%);用PMSG肌注+PGc灌注法,其同期发情率和受胎率效果最好,显著高于其他各组(P<0.05),其次是PMSG肌注+PGc肌注法,PGc肌注法效果最差;在冬季进行同期发情处理时,同期发情率和受胎率最高(分别为83.75%和43.28%),明显高于其他各季节(P<0.05);水牛自然发情的人工授精受胎率和胚胎移植的受胎率均比同期发情的高,差异显著(P<0.05)。     

分子修饰前后人参皂苷体外抗马立克氏病毒鸡胚成纤维细胞模型的建立

用雏鸡将马立克氏病毒(MDV)血毒复壮,分离发病鸡淋巴细胞并接种于鸡胚成纤维细胞,观察其病变。获得适应鸡胚成纤维细胞(CEF)的MD强毒,通过电镜观察、琼脂扩散实验进一步鉴定病毒,并建立了MDV感染CEF细胞模型,为研究人参皂苷及其衍生物的体外抗病毒作用及其机制奠定基础。     

动物性别决定的分子机理及性别鉴定与控制新技术

哺乳动物中位于Ｙ染色体短臂临界区域的ＳＲＹ基因启动雄性性状的发育。该基因在生殖腺脊中的表达可激发下游基因ＭＬＳ的转录,引起缪氏体抑制物和睾酮分泌,促使睾丸组织器官的发育。针对该基因制备特异探针或产该区域片段得到引物对就可用ＦＩＳＨ或ＰＣＲ准确,快速鉴定出植入母体前的胚胎性别,以及对精子筛选分离的结果作出准确评价。与ＰＣＲ相比,ＦＩＳＨ技术更具检测优势。     

卵黄中脂肪酸含量的变化对鸡胚组成的影响

对孵化过程中,卵黄囊中各种脂肪酸的含量变化和鸡胚或出壳雏鸡机体的水分、脂肪和蛋白质的含量变化关系进行了两次试验。试验1于入孵的第6,9,12,15,18和21 d测定胚胎或出壳雏的湿重和干重、水分、粗蛋白质和粗脂肪的含量。试验2于入孵的第6,9,1 2,15和18 d测定胚胎的干重、湿重、卵黄脂类和脂肪酸的含量。结果表明试验1:胚体水分含量和胚体蛋白含量呈正相关,但和干胚重、体脂肪含量呈负相关。试验2卵黄中脂类含量和湿胚重、胚胎水分含量、卵黄中亚油酸含量呈正相关。而卵黄中脂类含量和干胚重、相对卵黄重呈负相关。相对干胚重(以入孵蛋重为基础)表现出和硬脂酸呈负相关,孵化过程中胚胎的水分、粗脂肪、粗蛋白含量受来自卵黄脂肪的影响是不同的。胚胎摄取的硬脂酸和亚油酸对胚胎的干物质组成和卵黄的花生四烯酸浓度的影响是不同的。     

生产条件下安哥拉山羊胚胎徒手分割研究

生产条件下,徒手二分割安哥拉山羊桑椹胚和囊胚,并将裸半胚手术移植于受体羊子宫角。１９９３年用０．５％链霉蛋白酶处理胚胎１～６ｍｉｎ软化透明带后,在玻璃培养皿中的含１２．５％蔗糖和５％新生犊牛血清（ＮＣＳ）的ＰＢＳ液内分割,将３３枚半胚移植到２１只受体,有２只受体妊娠。１９９４年用０．２５％链霉蛋白酶处理胚胎０．５～１ｍｉｎ软化透明带后或不经处理而直接在磨砂玻璃皿中的含２０％血清的ＰＢＳ液内分割,移植受体３４只,有１０只受体产羔（２９．４％）,共产羔１１只,其中１对为同卵双生,半胚成羔率为２０．０％（１１／５５）。１９９５年,囊胚不经处理直接在磨砂玻璃皿中的含２０％ＮＣＳ的ＰＢＳ液内分割,半胚成对移植于受体羊黄体侧子宫角,产羔受体率为５０．０％（１３／２６）,共产羔１６只,其中３对为同卵双生,半胚成羔率为３０．８％（１６／５２）,胚胎成羔率为６１．５％（１６／２６）。     

小麦成熟胚的组织培养

【研究目的】为了筛选出小麦(TriticumaestivumL.)成熟胚(MEs)培养和遗传转化受体材料的优良基因型,【方法】以27份优良普通小麦冬性主栽品种或高代育种品系为试材,采用整粒切胚诱愈方法(endosperm-supportedmethod),对小麦成熟胚进行组织培养研究。【结果】结果表明,在成熟胚培养过程中光照、温度、培养基2,4-D浓度、基因型等因素对小麦成熟胚组织培养影响较大;同时小麦成熟胚组织培养存在着较强的基因型依赖性,不同基因型愈伤组织诱导率、分化率、成苗率的差异具有统计学意义(P<0.01)。通过研究从27个小麦基因型中筛选出了3个适合于成熟胚整粒切胚诱愈的基因型,即山农2618、泰山021、河北341,他们的成苗率分别达到了15.38%、25.27%、21.33%。【结论】小麦成熟胚组织培养优良基因型的筛选,为以后小麦的遗传转化和应用基因工程技术进行遗传改良奠定了基础。     

兔胚胎的一些与分离胚胎干细胞有关的生物学特征

为获得具有发育全能性的胚胎干细胞（ＥＳ细胞），对３日龄、３．５日龄和４日龄家兔胚胎的形态结构和免疫组化特征进行了观察。家兔胚胎的外围，不仅有透明带，还包有一层很厚的胶膜。３日龄兔胚为桑椹胚；３．５日龄胚胎已出现囊胚腔，囊胚腔较小，扩增内细胞团（ＩＣＭ）占据囊腔的１／２～２／３；４日龄为囊胚，囊腔扩大，ＩＣＭ与囊胚腔的体积比值缩小。桑椹胚的卵裂球和３．５日龄、４日龄胚胎的ＩＣＭ，以碱性磷酸酶染色和胚胎阶段特异性细胞表面抗原－１（ＳＳＥＡ－１）免疫荧光标记均呈强阳性，说明它们是由未分化的细胞构成。因此，从保证全能性的角度考虑，３日龄、３．５日龄和４日龄的家兔胚胎，均可用于ＥＳ细胞的分离。     

空气负氧离子对鸡胚和雏鸡生长发育的影响

将星杂288鸡种蛋960枚随机分为4组,进行3周孵化试验,各组空气负氧离子浓度分别为200000、100000、50000和40个/cm3。再取孵出的雏鸡120只随机分为4组,进行6周饲养试验,所设负氧离子浓度分别为100000、50000、25000和30个/cm3。结果表明:(1)200000和100000个/cm3负氧离子有助于胚胎的生长发育,能提高种蛋的孵化率;(2)50000个/cm3负氧离子可降低雏鸡料肉比和死亡率,并能促进雏鸡的生长发育,改善雏鸡的某些血液生理生化指标;(3)25000个/cm3以上的负氧离子对孵化和育雏的空气环境有一定净化作用。     

杂种落叶松未成熟胚的体细胞胚发生和植株再生

以未成熟合子胚为外植体,建立杂种落叶松胚性愈伤组织诱导和植株再生体系.从日本落叶松5×长白落叶松77.3和日本落叶松5×兴安落叶松9两个家系诱导出胚性愈伤组织,授粉后65天左右采集的合子胚在添加0.5 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 KT的S培养基上胚性愈伤组织诱导率最高,为10%.从胚性愈伤组织中筛选出3个具有稳定分化能力的胚性细胞系,其中授粉后65天采集的日本落叶松5×长白落叶松77-3合子胚诱导的胚性细胞系的每克胚性愈伤组织形成的体胚数、体胚萌发率、植株再生率最高,分别为18.1个,77.O%,28.1%.再生植株的移栽成活率为41.8%.     

布尔山羊和布奶杂一代山羊超数排卵试验

７号布奶杂一代山羊和１号布尔山羊，阴道放置海绵栓同时注射雌二醇２ｍｇ预处理７ｄ，随机分为２组，开始超排处理。第１组每日上午肌注用生理盐水溶解的ＦＳＨ，连续４ｄ，剂量分别为１５０，１００，５０，５０ＩＵ。第２组一次肌注用３００ｇ／ＬＰＶＰ溶解的ＦＳＨ２５０￣３００ＩＵ。两组均于处理后的第３天下午撤除阴道海绵栓，同时皮下注射１５－甲基ＰＧＦ２α０．６ｍｇ，第１组于第４天上午再次注射１５－甲基ＰＧＦ２α