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[目的]采用不同方法对大豆基因组DNA进行提取,为大豆基因组DNA的提取提供参考。[方法]采用CTAB法、SDS法和高盐低pH值法对大豆基因组DNA进行提取,对提取的DNA进行光密度、紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳和DNA限制性内切酶图谱等的检测。[结果]光密度和光谱检测结果表明,SDS法的提取量和纯度均优于CTAB法和高盐低pH值法;琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,SDS法提取的基因组DNA谱带较CTAB法和高盐低pH值法提取的基因DNA谱带粗、亮、重复性好;限制性内切酶检测结果表明,3种方法所得基因组DNA均能被胁谢Ⅲ和EcoRI酶切,但SDS法所得基因组DNA的酶切效果最好。l结论ISDS法的提取效果明显优于CTAB法和高盐低pH值法。 相似文献
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大豆种子DNA快速提取方法的改良及应用 总被引:2,自引:0,他引:2
高质量的DNA是进行基因克隆等分子生物学试验的前提条件。因大豆种子中蛋白质和油脂含量丰富,利用传统方法提取DNA质量很难达到试验要求。研究在SDS提取液的基础上,通过添加表面活性剂NP-40和Tween-20,优化出一种适合于大豆种子DNA快速提取的方法。优化后的SDS方法提取的DNA质量较高,OD260/OD280在1.809~1.916之间,无蛋白质和RNA污染。对该方法提取的DNA进行了基因克隆和分子标记的试验验证,结果表明,它们能够用于大豆基因克隆、分子标记。 相似文献
95.
在用Trizol一步法提取RNA基础上,通过SDS碱裂解法同Trizol法相结合,得到一种简单、快速从富含多糖及多种次生代谢物的胚乳细胞中提取总RNA的方法.所得RNA样品经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳分析证明具有较高的纯度、产率和良好的完整性,并可进一步满足RT-PCR和Northern杂交的试验需要. 相似文献
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以野生刺山柑叶片为材料,采用70%丙酮抽提研磨材料,结合TRIZOL,CTAB,SDS 3种常见的RNA提取方法提取总RNA,通过RNA获得率、纯度、电泳图谱以及RT-PCR反应等分析,初步确立了一种有效的提取刺山柑叶片总RNA的改良SDS法.该方法提取的RNA A<,260>/A<,280>值在1.88~1.94之间,电泳图谱完整,具有产量高、时间短、成本低等特点,所得的RNA可以用于RT-PCR和cDNA文库构建以及Northern杂交等后续实验. 相似文献
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Partial characterization of digestive proteases of the three‐spot cichlid Cichlasoma trimaculatum (Günter 1867) 下载免费PDF全文
F.J. Toledo‐Solís G. Márquez‐Couturier A. Uscanga‐Martínez R. Guerrero‐Zárate N. Perales‐García R. Martínez‐García W.M. Contreras‐Sánchez S. Camarillo‐Coop C.A. Álvarez‐González 《Aquaculture Nutrition》2016,22(6):1230-1238
Partial characterization of digestive proteases in the three‐spot cichlid Cichlasoma trimaculatum juveniles was conducted. It was determined that there is higher alkaline proteases activity (3.95 ± 0.32 IU mg?1 protein) compared to acidic proteases (2.01 ± 0.57 IU mg?1 protein). Optimal temperature for alkaline proteases is 60 °C which resulted in more thermostability to temperature changes. On the other hand, optimal temperature for acidic proteases is 50 °C. Optimal pH for acidic proteases was pH 2, while for alkaline proteases, it was pH 10, which resulted in more stability in relation to pH changes than acidic protease. The use of specific inhibitors and the SDS‐PAGE electrophoresis analysis revealed seven types of bands for alkaline proteases, which make evident the main presence of serine proteases. In acidic proteases, more than 98 g kg?1 of the activity was inhibited with pepstatin A inhibitor. Therefore, it is evident that C. trimaculatum digestion is composed by acidic and alkaline proteases; thus, it should be considered an omnivorous fish. 相似文献
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小麦一些高分子量麦谷蛋白亚基对SDS沉降值的效应分析 总被引:1,自引:0,他引:1
分析了两个单交组合(烟农19×皖麦48和烟农19×安农0016)的F2单株、F3株系SDS沉降值和高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)组成.结果表明,高分子量麦谷蛋白亚基对SDS沉降值的影响显著.Glu-A1和Glu-B1位点内的差异对沉降值的作用达显著或极显著水平,但Glu-A1与Glu-B1的互作效应不显著.两个杂交组合亚基的等位变异对SDS沉降值的影响大小顺序为:Glu-A11>Null,Glu-B17 9= Glu-B117 18> Glu-B114 15,F2代单株和F3代株系分析结果相似. 相似文献
99.
太行花DNA提取的优化和适用分子标记检测 总被引:1,自引:1,他引:0
比较了常规CTAB法、改良CTAB法和SDS法对太行花叶片总DNA的提取效果,并对改良CTAB法提取的DNA在多种分子标记中的适用性进行了测试。结果表明:常规CTAB法提取的DNA难以完全溶解,且有褐化现象;SDS法提取的DNA产率及纯度都很低;改良CTAB法提取的DNA产率高且稳定,无明显降解,杂质少,OD260/OD280比值在1.8左右。以改良CTAB法提取的DNA为模板,应用叶绿体和线粒体通用引物扩增出了特异性的高效产物,ISSR和RAPD引物对总DNA的扩增也获得理想结果。因此,改良CTAB法适用于太行花总DNA提取,其产物能满足核、叶绿体和线粒体基因组分子实验的要求。 相似文献
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