水产动物免疫增强剂的研究现状及应用前景

水产养殖业在世界范围内蓬勃发展的同时，由于高密度集约化养殖、过量投饵等原因，而造成环境恶化，导致各类细菌病、病毒病的频繁发生，严重阻碍了水产养殖业的持续健康发展。鱼类、贝类、虾类、蟹类均发生过大面积死亡，尤其某些病毒性疾病的死亡率可达60％-100％，对水产养殖业的打击是毁灭性的。目前已从生理、病理、种质、营养、生态、流行特点等方面进行了大量研究，以使用抗生素为代表的传统治疗方法，因其易导致养殖动物产生抗药性、易有残留等原因，在各国逐渐被禁用和取代。免疫机制的研究是合理有效防治各类病害的根本和依据，近来免疫学研究已成为水产动物病害研究的热点之一。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒检测技术的研究进展

正猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)被认为是世界范围内养猪业最为重要的传染病之一。2006年我国多个省份的养猪场出现了高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS变异而来)疫情,使养猪业蒙受了重大的经济损失。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为单股正链核糖核酸病毒,属于动脉炎病毒科、动脉炎病毒属。该病毒可危害各种日龄的猪,并且临床表现多     

红三叶新品种DUS测试指南的研制

以UPOV文件为依据,参照TGP/7/1、TG/1/3、GB/T19557.1等相关原则,根据植物新品种特异性、一致性和稳定性测试的原理和技术规则,结合我国红三叶育种实际,阐述了红三叶新品种DUS测试指南的研制原则、性状选择与确定、性状分级标准、判定标准及标准品种的选择等内容;筛选出30个测试性状和16个标准品种,其中,质量性状4个、数量性状18个、假质量性状8个,为我国红三叶新品种保护提供了DUS测试的依据。     

蓝色鳞鲤(Cyprinus carpio blue var)同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法对蓝色鳞鲤(Cyprinus carpio blue var)进行同工酶分析。结果表明:在蓝色鳞鲤的眼睛、肌肉、肝脏、心脏、肾脏5种组织中,14种酶(LDH、ADH、GDH、MDH、G-6-PDH、EST、POD、SDH、FDH、SOD、α-AMY、CAT、COX、ME)的同工酶谱均存在明显的组织特异性。14种酶共记录出33个基因位点,其中α-Amy-2、Cox-2、Est-1、Ldh-1、Mdh-1、Mdh-2和Sod-1为多态位点。蓝色鳞鲤群体的多态位点百分数为21.21%(P0.99),平均预期杂合度和平均实际杂合度分别为0.1079和0.2121,遗传偏离指数(d)值为正。平均有效等位基因数(Ne)为1.24。实验表明,目前蓝色鳞鲤群体的种质资源状况尚好,表现出明显的杂交优势。     

红鳍东方鲀6种同工酶的组织特异性及基因位点分析

采用水平淀粉凝胶和聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳法,对2龄野生红鳍东方鲀的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、眼、鳃6种组织中的苹果酸酶(ME),乳酸脱氢酶(LDH),异柠檬酸脱氢酶(IDH),葡萄糖脱氢酶(GLCDH),磷酸葡萄糖变位酶(PGM)和酯酶(EST)共6种同工酶进行了研究。结果表明,以上6种同工酶存在明显的组织特异性。LDH在除肝脏外的5种组织中活性很强,GLCDH只在肝脏中表达,鳃组织中的GLCDH和肌肉组织中的EST表达活性都很弱。6种同工酶共检测到12个基因位点,其中ME和PGM有两个基因位点编码,EST有5个基因位点编码。本试验还检测到Ldh-1、Est-1、Est-2、Est-3和Est-4共5个基因位点具有多态现象(P0·99),多态位点比例为41·67%,在12个基因位点共观察到17个等位基因表达,平均每个位点表达的等位基因数为1·417个。同时在红鳍东方鲀眼组织中发现,AB3型和B4型LDH间有一条酶带弱表达。     

木聚糖酶对尼罗罗非鱼部分非特异性免疫指标及生长的影响

尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)初始体质量为(106.16±16.77)g,以小麦基础饲料为对照,基础饲料中分别添加不同水平的木聚糖酶(0.05%、0.10%、0.15%)作为实验饲料.每个处理设5个重复,每个重复放养40尾雄性罗非鱼.采用饱食方式饲喂75 d后测定罗非鱼白细胞吞噬率(PP)、吞噬指数(PI),血清、肝胰脏和鳃的溶菌酶(LSZ)活力超氧化物歧化酶(SOD)活力和尼罗罗非鱼体质量.结果表明,木聚糖酶0.05%组、0.10%组、0.15%组的PP值极显著高于对照组(P＜0.01),PI值与对照组无显著差异(P＞0.05);0.05%组、0.10%组、0.15%组的血清LSZ活力较对照组分别提高13.85%、23.62%和17.23%(P＜0.01).0.10%组肝胰脏的LSZ活力为0.379 U/mL,极显著高于对照组(P＜0.01),0.15%组肝胰脏LSZ活力显著高于对照组(P＜0.05).0.05%组、0.10%组、0.15%组鳃LSZ活力均极显著高于对照组(P＜0.01);添加木聚糖酶对血清和肝胰脏的SOD活力无显著影响(P＞0.05),但0.10%组鳃SOD活力显著高于对照组(P＜0.05);0.05%组和0.10%组的增重率较对照组分别提高8.29%和17.45%(P＜0.01),0.15%组的增重率与对照组相比无统计学差异(P＞0.05).结论认为,在尼罗罗非鱼小麦基础饲料中适量添加木聚糖酶可以提高其非特异性免疫功能,促进其生长.     

鱼类特异性代谢物对草鱼、鳙和尼罗非鲫耗氧率的影响

以草鱼、鳙和尼罗非鲫互为供体和受体,研究其特异性代谢物对耗氧率的影响。结果表明：①在草鱼“代谢水”中,草鱼耗氧率显著下降（P＜0．001）,鳙和尼罗非鲫耗氧率均显著上升（P＜0．001）;②鳙“代谢水”中,鳙耗氧率显著下降（P＜0．001）,草鱼耗氧率无显著变动（P＞0．05）;③在尼罗非鲫“代谢水”中,3种鱼的耗氧率均无显著变动（P＞0.05）。实验揭示了鱼类特异性代谢物对代谢影响的存在,且这种影响因种而异。     

玉米醇溶蛋白ze19基因启动子克隆与功能分析

从玉米自交系9801基因组DNA中克隆玉米醇溶蛋白基因ze19启动子,将其克隆到pMD18-T载体上.该序列与发表序列同源性为94％,包括TATA box、CAAT box启动子基本元件以及多种参与调节醇溶蛋白表达的顺式元件.将ze19启动子取代质粒PBI 121-gus中的CaMV35S启动子,构建由ze19启动子驱动GUS的植物表达载体pBIze19-gus,利用土壤杆菌介导法将重组载体pBIze19-gus转入烟草中.对转基因烟草植株GUS活性的定性与定量分析结果表明,ze19启动子驱动GUS基因在转基因烟草种子中表达活性最高,在叶片中活性很弱,在茎中没有活性.所克隆的ze19启动子具有种子特异表达特性,为玉米种子生物反应器的研究提供借鉴.     

PCR技术用于紫河车鉴别研究

本实验根据Genebank中人胎盘中的受孕相关血浆蛋白基因序列,设计了用于紫河车真伪鉴定的特异性引物;同时根据猪、牛、羊的细胞色素b(Cyt-b)基因序列,设计猪、牛、羊的通用引物,以鉴定紫河车样品是否含有猪、牛、羊源的胎盘基因,从而确定所检测样品的真伪及掺假鉴定。研究结果显示,该PCR技术能够准确鉴定样品真伪及是否掺假,该方法简便易行,专属性强,灵敏度高,可纳入紫河车鉴别标准。     

F11R基因多态性及其与家兔非特异性消化道紊乱易感性的关联分析

采用PCR产物直接测序法寻找家兔F11R基因变异位点,利用PCR-SSCP分型技术对新西兰兔共257个(患病组:n=129,健康对照组:n=128)个体进行基因分型及case-control关联分析。结果发现家兔F11R基因内含子2上存在一个SNP位点(c.178+177 C>T),c.178+177 C和c.178+177 T在case组和control组中平均基因频率为分别为0.5175和0.4825,三种基因型CC、CT和TT的频率分别为0.2724、0.4903和0.2373。该位点在case和control的整个群体中表现出中度多态(0.25T位点与家兔非特异性消化道紊乱不相关(P>0.05)。