鸡肝脏和肌肉组织中常山酮残留的ELISA检测

将常山酮进行人工改造,制备了半抗原常山酮琥珀酸衍生物（Hal-suc）.采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法将半抗原与牛血清白蛋白（BSA）、卵清白蛋白（OVA）偶联,制备免疫原和包被原.动物免疫6次后采血制备抗血清,以间接ELISA法测定血清效价,测得抗血清的最佳工作浓度为1∶102 400.建立了常山酮在鸡肝脏和肌肉组织中检测的ELISA法,该方法在50、100、500 ng/g 的添加浓度水平下,在鸡肝脏和肌肉组织中测得的平均回收率范围分别为74.2%～96.8%和74.3%～90.0%,检测限分别为28和19 ng/g.     

羊痘病毒实时荧光定量TaqManPCR检测方法的建立

参照羊痘病毒（CaPV）P32的基因序列，设计合成了2套引物和1条探针，建立了实时荧光定量PCR技术，对细胞培养物、皮肤丘疹、痂皮等组织病料中的GPV进行了特异性检测和敏感性试验。结果显示，用300nmol／L引物浓度和200nmol／L探针浓度，获得的CT值较小，而△Rn最大；可检测到相当于0．1TCID50的病毒DNA；制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽，相关系数为0．9995以上；组内和组间试验重复性的变异系数分别为2．3％和3．4％；与常规的PCR相比较，该方法具有快速、特异、敏感、可定量，可同时检测大量样品等优点。表明，荧光TaqMan PCR是一种检测CaPV的良好方法，可对组织病料中低含量的CaPV或持续带毒宿主进行准确检测。     

Application of time-resolved fluorometry to immunoassays for bovine reproductive hormones

The principle of time‐resolved fluorometry with lanthanide chelates was established in the 1980s, but in the field of animal sciences it has not been widely applied to immunoassays. However, immunoassays that utilize time‐resolved fluorometry are possible alternatives to radioimmunoassays, since they can attain high sensitivity without safety risks. In this short review, we introduce the development of time‐resolved immunoassays for inhibin A, inhibin B and follicle‐stimulating hormone (FSH), and describe their application to the investigation of FSH regulation in male and female cattle. The results obtained using these newly developed immunoassays indicate that inhibin A acts as a feedback regulator for FSH secretion in female cattle, whereas inhibin A, and probably inhibin B, do so in male cattle.     

旋光法测定硫酸新霉素(饲料级)含量

本文采用旋光法测定硫酸新霉素(饲料级)含量,结果表明,硫酸新霉素浓度为1500～15000U/mL时,浓度与旋光度呈良好线性关系,相关系数r=0.9996(n=6)。与微生物法相比,旋光法具有简便、快速、易操作等优点。     

恒河猴血液细胞、生化和凝血功能正常参考指标的测定

测定分析人工饲养及在非麻醉(清醒)状态下108只健康成年恒河猴的血常规、血液生化及血小板和凝血功能正常值,并分析各项检测数据的性别差异。血常规测定值17项,其中,雌猴较雄猴极显著高(P<0·01)的项目为红细胞分布宽度(RDW)。血液生化测定值17项,其中,雌猴比雄猴显著低(P<0·05)的项目有丙氨酸转氨酶(ALT),显著高(P<0·05)的项目有碱性磷酸酶(ALP)。血小板和凝血功能测定值9项,其中,雌猴比雄猴明显高(P<0·05)的项目为活化部分凝血活酶时间(APTT),极显著高(P<0.01)的项目为凝血酶时间(TT)。建立了人工饲养条件下健康成年恒河猴的血常规、血液生化、血小板和凝血功能正常参考值指标,丰富和完善了恒河猴动物实验和疾病诊断中血液分析的基础知识。     

细胞因子的检测及其在鸡免疫抑制病中的应用

细胞因子的检测方法分免疫学检测法、分子生物学检测法和生物学活性检测法。感染鸡的多种病毒引起的免疫抑制与细胞因子的分泌水平和表达异常有关。因此,对细胞因子的检测为鸡病毒性免疫抑制病的发病机理和防制方法的研究提供了重要依据。     

旋光法测定硫酸新霉素含量

采用旋光法测定了硫酸新霉素含量.结果表明,在1 500～15 000 单位/mL的浓度范围内,旋光度与硫酸新霉素浓度呈良好线性关系,相关系数r＝0.999 8（n=6）.与微生物法相比,该方法具有简便、快速、易操作等优点.     

重庆柑橘主产区衰退病毒组群分析

柑橘衰退病毒(CTV)存在严重的株系混合侵染现象,因此需要用一定的方法对混合株系进行识别。本文应用CPGs/HinfⅠ对采自重庆市6个主要柑橘产区的92个CTV阳性样品进行限制性片段长度多态性(RFLP)分析,结果发现在甜橙上既有单一株系侵染(CPGs/HinfⅠRFLP组群以3为主),也有混合株系侵染(CPGs/HinfⅠRFLP组群以1、3或1、3、6组群为主),而在柚类上只带单一的CPGs/HinfⅠRFLP6组群。     

ELISE测定猪尿、猪肝中克伦特罗残留的研究

ELISA(酶联免疫吸附法)测定猪尿、猪肝中违禁药物克伦特罗残留量影响实验结果表明,德国拜发与北京望尔生产的两种ELISA试剂盒具有操作简单、时间短、成本低、敏感度高等特点。在室温20-22℃条件下,试验制备过程中必须做到控温度、控转速、控流速及洗板过程中应注意事项,这样可大大提高在实际操作过程中检测的准确性。     

二重PCR检测鸭瘟病毒和鹅细小病毒的初步研究

根据鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)DNA聚合酶基因和鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)NS基因序列分别设计2对引物,应用这2对引物对混合样品中鸭瘟病毒和鹅细小病毒进行了二重PCR扩增。PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明2条特异性带为563bp(DPV)和1146bp(GPV),与实验设计相符,且与常规单一PCR结果一致。二重PCR反应检测出的DPV含量相当于20个PFU;检测出的GPV含量相当于0.1个ELD50,对禽痘病毒和减蛋综合征病毒的核酸未能扩增出任何条带,特异性良好。该二重PCR能够在一次扩增反应中检测两种病毒,为两种鹅病的病原检测和诊断提供了一种简便、经济、快速的手段。