深层发酵产纤维素酶菌株的分离选育

研究在被污染水解的食用菌的棉子壳培养基上分离出一株黑曲霉菌株,此菌适合在液体培养基上生长,在32℃下220r/min,摇瓶培养96h,CMC-Na纤维素酶活力在50℃下高达4874u/(g·min)。     

Host–pathogen interaction of maize (Zea mays L.) and Aspergillus niger as influenced by arbuscular mycorrhizal fungi (Glomus deserticola)

This study was carried out to investigate the interaction of maize and Aspergillus niger as influenced by arbuscular mycorrhizal fungi (AMF). Three quality protein maize (QPM) genotypes (ILE1-OB, ART-98-SW5-OB and ART-98-SW6-OB) and two market accessions (Ilishan and Shagamu) were evaluated in a pot experiment conducted under natural environment conditions at the Research and Teaching Farm of Babcock University, Ogun State, Nigeria. AMF (Glomus deserticola) in mixtures of soil and root fragments was inoculated at the rate of 15 g per plant, while maize was artificially infected with A. niger (15 cfu ml^?1) in each designated pots. The coefficient of emergence (COV), percentage emergence (% E) and disease severity were determined using standard methods. Generally, plants treated with AMF only produced the highest cumulative cob yield (18 g), followed by plants treated with AMF and A. niger (15 g) and then control (12 g), while the least was recorded for only A. niger-treated plants (4 g).     

中草药混菌发酵生产新型生物中药的研究

通过中草药混菌发酵的研究,制备新型生物中药,以替代抗生素在畜禽生产中的应用。采用黑曲霉先有氧发酵产纤维素酶、果胶酶破解植物细胞壁,再用植物乳杆菌厌氧发酵酶解,通过单因素试验和正交试验,以纤维素酶活力、果胶酶活力指标,探索中草药混菌发酵的最佳生产工艺。试验结果表明：最佳培养基条件为中草药浓度为10%,葡萄糖添加量为1%,酵母膏添加量为0.2%, K2HPO4添加量为0.1%,有氧发酵温度为30℃,厌氧发酵温度为37℃,好氧厌氧发酵时间比为2?1,总发酵时间为96 h,接种量比例为2%?2%,pH值为5。在比条件下纤维素酶活达到1412.3 U/ml,果胶酶活达到1287.5 U/ml。中草药经混菌发酵后,粗蛋白提高了31.19%,粗脂肪提高了59.11%,Ca、P含量分别提高了50%、85.71%,中性洗涤纤维,酸性洗涤纤维,木质素分别降解了24.21%、12.58%、17.56%。中草药经混菌发酵后,其营养价值有了明显的提高,为新型生物中药的研制及在畜禽生产中的应用提供参考。     

黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达

根据NCBI上果胶裂解酶(PL)基因在黑曲霉基因组上的分布特点设计特异引物,通过重组PCR扩增出黑曲霉编码PL的结构基因。将PL基因连接到大肠杆菌表达载体pET-28a上,得到重组质粒pET-28a-PL,转化大肠杆菌(E.coli)BL21后,用IPTG进行诱导表达。结果表明,PL基因片段序列全长1 431bp,与已知PL基因(XM_001397206.2)核苷酸和氨基酸序列同源性均为99%。表达产物经12%SDS-PAGE电泳,得到了一条大小约为50kD的条带,与预期分子量相符,证明真菌PL基因在E.coli BL21中可以有效表达。     

A Method for Baiting Corticium rolfsii and of Estimating the Sclerotial Population in Soil

Abstract

The use of tissue blocks of Xanthosoma sagittifolim for baiting Corticium rolfsii from soil is described. The baiting technique has been found efficient for gross estimation of the viable sclerotial content of air-dried soil. The results obtained by this method compare well with those determined by the sieving technique of Rodriguez-Kabana et al.     

白曲霉酸性蛋白酶在黑曲霉中表达

研究分析固态发酵酸性蛋白酶生产菌株及其产品,ITS序列鉴定结果表明,该菌株为曲霉属,质谱分析结果表明其产品为Aspergillus saitoi酸性蛋白酶Aspergillopepsin I(EC.3.4.23.18)。根据Aspergillus saitoi酸性蛋白酶Aspergillopepsin I基因序列pep1(GI:473517)设计引物,以固态发酵酸性蛋白酶生产菌株基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增获得pep1基因。序列分析结果表明,扩增片段与白曲霉Aspergillus kawachii酸性蛋白酶基因组序列相似性为99%,其编码蛋白与白曲霉Aspergillus kawachii酸性蛋白酶(GAA90749.1)相似性为100%,将该基因命名为pep B。构建黑曲霉表达载体p SZHG-pep B,通过农杆菌介导法转化黑曲霉CICC2462,筛选得到在gla A位点发生同源重组纯合转化子。经摇瓶发酵后,对产物进行SDS-PAGE、酶活检测以及酸性蛋白酶酶学性质和酶稳定性研究。结果表明,纯合同源重组菌株经SDS-PAGE检测时在47 ku左右处有明显目的蛋白条带,其发酵产物酸性蛋白酶酶活达5 543 U·m L-1,为出发菌株152倍。对菌株所产酸性蛋白酶酶学性质研究发现,该酶最适反应温度为50℃,最适反应p H 3.0,在4℃和25℃条件下,酶在p H 3.0~4.0时较稳定。     

太空诱变复合菌发酵苹果渣玉米秸秆混合料生产饲料蛋白的研究

利用太空诱变获得的优良菌种黑曲霉ZM-8及啤酒酵母YB-6和白地霉、热带假丝酵母配制成的复合菌,固态发酵苹果渣玉米秸秆混合料.结果表明,苹果渣玉米秸秆混合料各成分最适宜的配比为:苹果渣70％,玉米秸秆10％,麸皮15％,辅料5％.通过正交试验确定的最适辅料配方为:尿素2 g,硫铵2 g,食盐1g.复合菌的最佳配方为:黑...     

航天诱变黑曲霉ZM-8菌株固态发酵产β-葡萄糖苷酶的研究

以小麦秸秆和麸皮为原料,利用固态发酵对航天诱变后筛选的黑曲霉ZM-8菌株生产β-葡萄糖苷酶的条件和酶学特性进行了研究.结果表明,ZM-8菌株最佳培养基配方为:小麦秸秆粉与麸皮质量比为8∶2,氮源为4%的(NH4)2SO4,含水量200%;最佳的培养条件为:接种量为6%;初始pH值为6.5;培养温度为28℃;培养时间为144 h.在以上的培养基和培养条件下ZM-8菌株的β-葡萄糖苷酶酶活达到21.74 U/g,约为出发菌种的2.24倍.酶学实验表明,β-葡萄糖苷酶最适作用温度50℃,最适作用pH 5.0.     

高产纤维素酶黑曲霉菌株的化学诱变选育

以1株黑曲霉(Aspergillus niger F1)为出发菌株,经过亚硝基胍、硫酸二乙酯和氯化锂诱变处理,选育出1株纤维素酶高产菌株L1.在适宜条件下,其产CMCase活力为出发菌株的150.2%.     

肉桂酸降解真菌的筛选及其降解液对黄瓜种子发芽的影响

利用富集驯化培养、稀释涂布的方法,从连作黄瓜根际土壤中分离得到1株能降解肉桂酸的真菌2-4。该菌能够在以肉桂酸为唯一碳源的无机盐培养基上生长;经形态学、生理生化及分子等分类方法鉴定其为黑曲霉（Aspergillus niger）。该菌不同培养时间的肉桂酸降解液对黄瓜种子发芽试验表明,该菌可有效降解肉桂酸,从而缓解对黄瓜发芽的抑制作用,72 h降解液处理的种子发芽率、发芽指数和活力指数可分别达到对照的100%、92.06%和91.49%;胚根长、根表面积和根尖数达到对照的84.19%、87.55%和82.64%,而胚轴长、鲜质量差异不显著。