牛肌肉卫星细胞向胰岛素分泌细胞的诱导转分化研究

肌肉卫星细胞是源自中胚层的肌源干细胞,具有增殖分化融合成肌管并形成肌细胞的能力.在体内条件下,肌肉卫星细胞不可能跨胚层分化为内胚层来源的胰腺细胞.本研究从牛(Bos taurus)胎儿肌肉中分离培养得到肌肉卫星细胞,并在体外条件下将其诱导成胰岛素分泌细胞.在诱导过程中,分析了与胰腺发育相关的胰十二指肠同源基因盒1基因(pancreatic and duodenal homeobox 1,PDX1)、神经原素3基因(neurogenin 3,NGN3)、淀粉酶基因(Amylase)和胰岛素基因(Insulin,INS)的动态表达情况.结果表明,PDX1作为决定胰腺分化发育和胰岛功能的主要调节基因,在诱导分化的第2天能够检测到其mRNA的表达,在第3天表达量达到了最大,第4天以后维持在较低水平.NGN3是内分泌细胞形成非常重要的转录因子,是能够将胰岛素分泌到胞外的关键基因,其mRNA在分化诱导的第3天开始表达,第4天达到最高水平,之后逐渐下降.Amylase是胰腺发育中细胞外分泌相关的基因,Amylase mRNA在第6天才开始表达,8d后达到最高.INS mRNA表达量在11～12 d最高,酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)发现,诱导形成的胰腺细胞能够正常分泌胰岛素,培养液中胰岛素的浓度在诱导的11～12 d达到最高值.向培养液中添加葡萄糖后,可使细胞的胰岛素分泌量显著提高,说明诱导得到的细胞类似于成体胰岛的功能,其胰岛素分泌受外界葡萄糖浓度的调节.上述结果表明,肌肉卫星细胞可以被诱导转分化为胰岛素分泌细胞,并对培养环境中的葡萄糖刺激做出应答反应.本研究结果为进一步的研究和临床应用提供基础资料.     

O型口蹄疫病毒P1-2A3C基因在家蚕杆状病毒表达系统中的表达

口蹄疫是一种严重危害畜牧业生产的烈性传染病。为了促进O型口蹄疫病毒(FMDV)基因工程活载体疫苗的研制,选取O型FMDV编码序列中的衣壳蛋白前体P1-2A基因和蛋白酶3C基因,插入家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中,构建重组载体pVL-P1-2A3C,并与线性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒Bm-P1-2A3C。将重组病毒感染家蚕5龄幼虫,以双抗体夹心ELISA法和间接血凝方法检测血淋巴中的表达产物:目的蛋白在感染病毒后120 h的蚕血淋巴中表达量最高,抗原表达呈阳性的最大稀释倍数为1∶128。结果显示O型FMDV的P1-2A3C基因已在家蚕体内获得表达。     

北京荷斯坦牛体型性状相关性分析

本研究旨在评估北京市荷斯坦牛体型性状之间的相关性,为选种选配提供依据。试验对来自北京地区牛场的1 391头荷斯坦母牛的各部分体型性状进行相关性分析。结果显示乳房、乳用特征、肢蹄分别与体型总分之间的正相关性较强（P<0.01）。同时肢蹄、乳房分别与乳用特征之间呈较强的正相关性（P<0.01）,可重点改良这三个特征性状以提高体型总分。此外,体躯大小、胸宽、体深分别与结构容量之间呈极强正相关（P<0.05）,且体躯大小、胸宽分别与体深之间呈极强正相关（P<0.05）;蹄角度与骨质地之间、蹄踵深度与后肢侧视之间正相关性极强（P<0.01）;前乳房附着与后附着高度之间、前乳头位置与后附着高度之间、前乳头位置与后乳房宽度之间均呈极强负相关（P<0.05）,而乳房深度、悬韧带分别与后乳头位置呈极强正相关（P<0.05）。相关性强的性状中针对性选择误差小、易测量的性状,重视体型性状和生产性状的同步优化,有助于北京地区荷斯坦牛的品种改良。     

德美与中美〖HTSS〗（新疆型）〖HTH〗杂交后代体尺体重变化

德国美利奴是肉毛兼用细毛羊,原产德国,对于干旱地区有较好的适应性。该羊具有生长发育快、适应性强、产肉性能好和繁殖率高的特点。本次试验研究的主要内容是中国美利奴羊（新疆型）在导入德国肉用美利奴羊血液后,其后裔(周岁公羊)在体重体尺方面的变化情况。根据试验测得的数据,经统计分析结果表明：杂交一代与中国美利奴（新疆型）相比,在各阶段平均体重均得到提高,提高范围0.07~2.1 kg。杂交二代各阶段平均体重与中国美利奴（新疆型）相比,其提高幅度大于杂交一代。在体尺上杂交一代在胸深、胸围、胸宽、十字部宽上均表现了较高的杂交优势,在体尺大小上得到了很大提高。为体重增加、产肉性能的提高提供了良好的潜在条件。杂交二代在各体尺指标上没有增加（除前肢高）,同杂交一代相比具有降低趋势。所以杂交一代是我们需要的经济类型。引进德国美利奴有利于提高中国美利奴（新疆型）的产肉性能,它是提高新疆细毛羊毛肉综合性能较为理想的父本品种。     

Effects of endothelial progenitor cell-conditioned medium on proliferation and differentiation of type Ⅱ alveolar epithelial cells exposed to hyperoxia

AIM: To investigate the effect of hyperoxia exposure on the paracrine function of endothelial progenitor cells (EPCs), and to explore the effects of paracrine factors of EPCs on the proliferation and differentiation of type Ⅱ alveolar epithelial cells (AECⅡ) exposed to hyperoxia. METHODS: Bone marrow-derived mononuclear cells were isolated and cultured in EGM-2MV medium for 7~10 d to obtain and identify EPCs. EPCs were cultured in room air (RA) or 60% O₂. The normoxia EPC-conditioned medium (E-CM-RA) and hyperoxia EPC-conditioned medium (E-CM-O₂) were collected. The levels of VEGF, FGF10, PDGF-BB and EGF in E-CM-RA and E-CM-O₂ were detected by ELISA. AECⅡ from adult rats were isolated, purified and cultured for 2 d, then divided into RA group, O₂ group, O₂+E-CM-RA group and O₂+E-CM-O₂ group. The proliferation of AECⅡ was detected by MTT assay and cell counting. The mRNA expression of SP-C and AQP5 was quantified by real-time PCR. RESULTS: The expression of VEGF and FGF10 in E-CM-O₂ group decreased significantly compared with E-CM-RA group (P<0.01). There were significant differences in AECⅡ viability and number among the 4 groups at 12 h, 24 h, 2 d and 3 d (P<0.01). Compared with RA group, AECⅡ viability and number in O₂ group decreased significantly at 12 h, 24 h, 2 d and 3 d (P<0.05). The AECⅡ viability and number in O₂+E-CM-RA group were significantly higher than those in O₂ group at 12 h, 24 h, 2 d and 3 d (P<0.05). However, no significant difference in AECⅡ viability and number between O₂+E-CM-O₂ group and O₂ group at 12 h, 2 d and 3 d was observed. There were significant differences in the mRNA expression of SP-C and AQP5 in the 4 groups at 24 h, 2 d and 3 d (P<0.01). Compared with RA group, the mRNA expression of SP-C in O₂ group was significantly inhibited (P<0.01), but the mRNA expression of AQP5 was promoted (P<0.01) at 24 h, 2 d and 3 d. Compared with O₂ group, the mRNA level of SP-C in O₂+E-CM-RA group and O₂+E-CM-O₂ group (P<0.05) at 24 h, 2 d and 3 d was increased, and the mRNA expression of AQP5 (P<0.01) at 2 d and 3 d was inhibited.CONCLUSION: EPCs secrete VEGF and FGF10, and hyperoxia impairs this paracrine function. Hyperoxia exposure inhibits AECⅡ proliferation and the mRNA expression of SP-C, but promotes the mRNA expression of AQP5. EPC-conditioned medium improves the proliferation of hyperoxia-exposed AECⅡ, and inhibits the transformation of AECⅡ. Hyperoxia exposure impairs the paracrine function of EPCs, and weakened the effects of E-CM-O₂ on AECⅡ.     

脑室注射脑啡肽和纳洛酮对北京鸭胃酸分泌的影响

本实验观察了第三脑室注射甲硫氨酸脑啡肽和阿片受体阻断剂纳洛酮对北京鸭胃酸分泌的影响,结果表明：（１）将５μｌ脑啡肽（０．０７５ｇ／Ｌ）注入脑室后,北京鸭胃酸分泌明显抑制,且注药后２０ｍｉｎ抑制作用最为显著,（２）预先注射阿片受体阻断剂纳洛酮后,再注射同样剂量的脑啡肽,抑制胃酸分泌的现象消失,结果提示,脑室注射脑啡肽对胃酸分泌有抑制作用,此作用是通过作用于阿片受体而实现的。     

《上海农学院学报》15年引文分析

统计《上海农学院学报》1983～1997年论文所附参考文献（以下简称引文）,采用文献计量法就其引文量、自引量、引文语种和文献类型,引文年代分布等统计指标进行分析研究,不仅可看出《上海农学院学报》引文量及其规范化的程度,更重要的以便进一步了解我院图书馆情报资源被利用的概貌,以及教师和科研人员利用和吸收文献信息的能力、特点和规律,初步确认馆藏核心期刊,为建立完善的文献保障体系提供依据,不断改进我院图书情报工作。     

葡萄霜霉菌候选效应子RXLR5信号肽的鉴定

利用Getorf、SignalP 3.0、BLASTP等生物信息学软件和PERL语言从葡萄霜霉菌基因组中预测到一条编码RXLR-EER结构域的效应蛋白候选基因,将该基因编码的蛋白命名为RXLR5。将RXLR5信号肽SP5编码序列连接到pSUC2T7M13ORI载体并转化到酵母蔗糖酶缺陷菌株YTK12后,重组菌株能成功分泌蔗糖酶,促使棉籽糖分解成单糖,因此,能在YPRAA培养基上正常生长;同时生成的单糖能与TTC反应产生红色不溶于水的氯化三苯基四氮唑。由此推测,SP5具有信号肽活性,可能在RXLR5从葡萄霜霉菌细胞内泌到胞外的过程中起重要作用。