肠毒素性大肠杆菌菌毛对产蛋鸡免疫性的研究

采用热抽提法提取4种肠毒素性大肠杆菌菌毛蛋白。K88、K99、F41和987p菌毛蛋白分别制成弗氏佐剂苗;K88还制成白油佐剂苗,氢氧化铝胶苗和蜂胶佐剂苗;另将4种菌毛等比例混合制成弗氏佐剂苗。分别对产蛋鸡进行免疫,用微量凝集反应和血凝抑制试验检测卵黄抗体效价。结果表明,K88菌毛较其他3种菌毛免疫性好,诱导抗体效价最高而且能长时间维持;987p菌毛能快速诱导抗体的产生,但整体效价低。K88不同佐剂苗中,铝胶佐剂能较快地诱导抗体的产生,蜂胶佐剂苗抗体持续时间短,弗氏佐剂能诱导高效价的抗体产生而且能长时间持续。     

猪瘟免疫抗体监测的综合分析

随着近年来畜禽养殖量和养殖密度的增加,疫病的发生、发展变得越来越复杂,畜禽疫病的预防与控制将面临更大的挑战。猪瘟(CSF)是严重危害养殖业最古老的疫病之一,其流行形式也出现了新的特点,临床主要表现为非典型性,对养猪业造成了相当大的经济损失。到目前为止,加强免疫接种仍是对猪瘟预防与控制最有效的措施。对本地区当前猪瘟的免疫情况进行全面监测,从而及时掌握免疫抗体水平,了解免疫状况,建立科学合理免疫程序,为更有效指导实际生产、控制疫病起着至关重要的作用。我们就2004~2006年三年内本地区猪CSF免疫抗体监测情况进行综合分析…     

3个黄牛品种的myostatin 5''调控区多态与生长性状的相关分析

用PCR-RFLPs方法对南阳牛、秦川牛、郏县红牛3个品种共411个个体的myostatin 5'调控区的单核苷酸多态性(SNPs)进行分析.结果表明,3个品种在myostatin 5'调控区T→A突变以等位基因T为主,仅在郏县红牛中发现1个AA型纯合体,郏县红牛品种显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(P＜0.05),其它品种处于Hardy-Weinberg平衡状态(P＞0.05).对黄牛myostatin 5'调控区T→A突变与南阳牛、秦川牛和郏县红牛生长性状进行相关分析,结果显示,TT型南阳牛6月龄的胸围和胸围指数显著低于TA型个体,TT型南阳牛18月龄的体高显著高于TA型个体(P＜0.05),但基因型对秦川牛和郏县红牛生长性状的效应不显著(P＞0.05).提示在南阳牛的育种实践中应该综合考虑南阳牛生长阶段和所要选择的性状.     

合肥野生动物园5种雉鸡接种新城疫疫苗后抗体水平测定

选择成年白冠长尾雉5只,白腹锦鸡5只,白鹇3只,红腹锦鸡3只和孔雀11只,同时用L系弱毒冻干苗和新城疫油乳剂灭活疫苗进行免疫接种,通过血凝抑制试验(HI)测定其抗体滴度.结果表明,在免疫接种后26 d,白冠长尾雉抗体效价为9.8log2,白腹锦鸡为8.0log2,白鹇为8.0log2,红腹锦鸡为10.7log2;孔雀在免疫后接种0、8、15、20、25 d,抗体水平分别为3.8log2、5.0log2、6.2log2、7.5log2及8.2log2.     

应用荧光定量RT-PCR检测H5亚型禽流感病毒

为了解青岛市饲养的家禽是否感染H5亚型禽流感病毒,以制定切合实际的防控措施,2005年1月～2006年9月,对139个养禽场和211个养禽户饲养的家禽采集棉拭子和组织样品,共采集活禽样品27 835份,病死禽样品573份,应用荧光定量RT-PCR技术,进行H5亚型禽流感病毒检测,结果全部为阴性,在分子水平上证明了青岛市无禽流感病毒感染.     

H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法的建立与应用

为了建立适用于临床诊断的H1N1亚型猪流感病毒快速检测方法,本研究根据GenBank已登录的H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因序列设计RT-PCR扩增引物,以H1N1亚型猪流感病毒、H3N2亚型猪流感病毒、猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒为试验对照,通过优化RT-PCR反应条件和反应体系,建立了H1N1亚型猪流感病毒HA和NA基因双重RT-PCR定型检测方法。同时,运用H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法和本研究建立的方法对165份猪病料样品进行了对比验证。结果表明,本研究建立的H1N1亚型猪流感病毒双重RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、重复性,所扩增的目的基因片段大小分别为428 bp和678 bp左右,可检出最小基因组RNA浓度为2.9×10-5μg/μL。本研究建立的方法和H1N1亚型猪流感病毒血凝和血凝抑制试验方法均从同一份猪肺脏样品中检测出H1N1亚型猪流感病毒,其余样品中均未检出H1N1亚型猪流感病毒,两种方法符合率为100%。本研究建立的方法适用于H1N1亚型猪流感病毒双基因定型检测,可在H1N1亚型猪流感病毒流行病学调查和临床诊断中应用。     

湖南地区规模猪场猪圆环病毒2型的血清流行病学调查报告

2011年上半年,从湖南的茶陵、郴州、桃源、南县、望城和攸县,在没有进行圆环病毒2型疫苗接种的6个规模猪场共采集血样315份,其中经产母猪血样245份、后备母猪42份、哺乳仔猪17份、保育仔猪11份。用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行圆环病毒2型的抗体检测。结果显示,猪群整体阳性率为95.2%,其中经产母猪群,后备母猪群,哺乳仔猪群和保育仔猪群的抗体阳性率分别为96.3%、97.6%、100%和54.5%。结果表明,PCV-2在湖南省规模猪场的各阶段猪群中感染非常普遍,应引起重视和加强防控,特别是保育仔猪群的抗体阳性率仅为54.5%,很大部分的抗体阴性保育仔猪存在感染发病的风险,这一结果与临床上保育仔猪群肾性皮炎高发情况相一致。     

猪圆环病毒2型感染对猪瘟疫苗免疫的影响

猪瘟(CSF)被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的A类传染病之一,是我国目前强制免疫的主要传染病之一.做好猪瘟免疫是制定猪场免疫程序的基础.近年来,猪瘟疫苗免疫效果不佳甚至免疫失败的现象时有发生,除了猪瘟疫苗质量、免疫程序不当和猪瘟野毒持续感染母猪将其野毒传播给仔猪造成免疫失败等因素外,其他猪病病原感染对猪瘟疫苗的免疫效力也构成影响[1-4].由猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)单独或混合感染对猪瘟弱毒疫苗免疫效力的影响已有报道[5-8],而由猪圆环病毒(PCV)感染是否猪瘟免疫有影响还鲜有报道.     

血清冻融次数对猪瘟抗体效价的影响

为研究反复冻融是否对猪瘟抗体效价产生影响,选取了60份不同抗体水平的猪瘟抗体阳性血清,每份血清分装6管作不同冻融处理。对不同冻融处理的血清进行物理性状观察和ELISA检测,并采用随机化区组设计资料秩和检验方法对检测OD值进行比较分析。结果发现不同次数冻融处理的血清物理性状观察无明显差异,ELISA检测OD值无统计学差异,表明短期内可完成ELISA检测的血清可直接于4℃冷藏保存或-20℃冻存,多次冻融不会造成血清猪瘟抗体效价的显著降低。     

猪流行性腹泻病毒间接ELISA抗体检测方法建立与应用

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是目前引起我国猪急性肠炎并水样腹泻的重要病原之一,但尚无商品化病毒血清抗体检测试剂盒。本研究以纯化的PEDV为包被抗原,通过优化ELISA反应条件,建立了间接ELISA抗体检测方法,其反应条件为:抗原最佳包被浓度为3μg/mL,血清样品最佳稀释度为1∶100,包被时间为37℃作用2 h,1.5%BSA 37℃封闭3 h,二抗1∶10 000稀释,37℃作用30 min,抗体临界值为OD450nm≥0.306判为阳性,OD450nm≤0.268判为阴性,介于二者之间为可疑。该方法检测6份已知PEDV阳性血清效价为1∶3 200,检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、伪狂犬病毒和口蹄疫病毒血清抗体均为阴性,批间和批内重复试验变异系数2.5%～8.3%,对江苏、上海、浙江、安徽地区587份猪血清样品进行检测,抗体阳性率达56.76%,证明该方法具有较好敏感性、特异性和重复性,可用于PEDV抗体检测和流行病学调查。