景观设计在乡村旅游规划中的运用浅析——以广西巴马县盘阳河长寿养生休闲旅游开发为例

乡村旅游作为乡村特有资源与旅游业有机融合的一种旅游业态,以其休闲、生态的特质,成为当今世界旅游业发展的潮流之一,在中国旅游业发展中起着重要作用。在新农村建设成效初显的环境下,乡村旅游是区域经济社会发展中最具活力的成份。以广西巴马盘阳河长寿养生休闲旅游开发规划为例,探讨景观设计在乡村旅游规划中的地位和作用。     

巴马小型猪骨髓来源内皮祖细胞的培养鉴定及生物学特性分析简

为探索并建立巴马小型猪骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)的体外培养及鉴定方法,本研究在健康猪髂后上棘取骨髓,采用密度梯度分离法分离单个核细胞,按2×10⁷个/孔的密度加入预先包被人纤维连结素（HFN）的6孔细胞培养板中,用含内皮细胞生长因子的选择性培养基诱导培养,逐日在倒置相差显微镜下观察,MTT法检测EPCs增殖情况;流式细胞术（FACs）检测EPCs中AC133和vWF的表达纯度;免疫荧光法双染检测EPCs表面相关抗原ac-LDL和UEA-1。结果发现,从巴马小型猪骨髓分离的EPCs具有增殖能力;MTT结果显示细胞于48 h换液二次贴壁后3～5 d增殖明显,7～10 d增殖加速并出现条索状结构;FACs检测结果显示,二次贴壁细胞vWF阳性细胞百分率74.91%,AC133阳性细胞百分率79.54%,而未经诱导的二次贴壁细胞vWF和AC133阳性率分别是33.65%和39.87%;细胞经免疫荧光双染后Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1表达呈阳性,vWF和AC133免疫荧光染色阳性。由此可见,分离培养的细胞具有自我增殖和分化潜能,是内皮祖细胞。     

广西巴马小型猪BMP2基因克隆、生物信息学及组织表达分析

本研究旨在对广西巴马小型猪骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic proteins 2,BMP2）基因进行克隆及其结构和功能的预测,并检测其在广西巴马小型猪和长白猪中的表达差异。以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,通过测序鉴定BMP2基因外显子区的单核苷酸多态性（SNPs）,利用多种生物信息学软件对广西巴马小型猪BMP2基因启动子区、编码区（CDS）、3'UTR区进行了分析,预测分析广西巴马小型猪BMP2基因编码蛋白的基本理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、跨膜区域、亲疏水性、蛋白质修饰结构、二级结构和三级结构等,并对miRNA结合位点及其相关通路进行分析,绘制了广西巴马小型猪和长白猪的组织表达谱。结果显示,试验成功克隆了广西巴马小型猪BMP2基因CDS区,总共1 188 bp,编码395个氨基酸;与猪参考基因组相比,广西巴马小型猪BMP2基因在G1663A、G1897C发生了同义突变,在C1896T（Pro→Leu）、T1971C（Gly→Ser）、G2000A（Leu→Ser）发生了3处错义突变;在3'UTR区域存在miR-142-5p、miR-129-5p等共13个miRNA结合区域;相似性比对结果显示,广西巴马小型猪与野猪、黄牛、水牛、山羊、绵羊、马、澳洲野犬、家犬、猕猴对应区段的相似性依次为99.92%、91.75%、91.84%、91.92%、91.92%、90.50%、89.43%、90.91%和90.91%;系统进化树结果表明,广西巴马小型猪与野猪的亲缘关系最近,与黄牛的亲缘关系相对较近,与猕猴亲缘关系较远;BMP2蛋白分子质量为44.55 ku,理论等电点为8.37,预测其有12个O-糖基化位点,42个磷酸化位点;预测分析发现该蛋白为亲水性蛋白,且是膜外蛋白。组织表达谱发现,广西巴马小型猪生长板软骨中BMP2基因表达量显著低于长白猪（P<0.05）。该研究为进一步探索广西巴马小型猪中BMP2基因的功能提供了理论基础,也为广西巴马小型猪品种资源的利用提供了重要参考。     

CRISPR/Cas9-mediated MSTN disruption accelerates the growth of Chinese Bama pigs

CRISPR/Cas9-mediated genome editing technology is a simple and highly efficient and specific genome modification approach with wide applications in the animal industry. CRISPR/Cas9-mediated genome editing combined with somatic cell nuclear transfer rapidly constructs gene-edited somatic cell-cloned pigs for the genetic improvement of traits or simulation of human diseases. Chinese Bama pigs are an excellent indigenous minipig breed from Bama County of China. Research on genome editing of Chinese Bama pigs is of great significance in protecting its genetic resource, improving genetic traits and in creating disease models. This study aimed to address the disadvantages of slow growth and low percentage of lean meat in Chinese Bama pigs and to knock out the myostatin gene (MSTN) by genome editing to promote growth and increase lean meat production. We first used CRISPR/Cas9-mediated genome editing to conduct biallelic knockout of the MSTN, followed by somatic cell nuclear transfer to successfully generate MSTN biallelic knockout Chinese Bama pigs, which was confirmed to have significantly faster growth rate and showed myofibre hyperplasia when they reached sexual maturity. This study lays the foundation for the rapid improvement of production traits of Chinese Bama pigs and the generation of gene-edited disease models in this breed.     

饲粮添加甜菜碱对巴马香猪繁殖性能、初乳成分及血浆代谢物和繁殖激素含量的影响

本试验旨在研究饲粮添加甜菜碱对巴马香猪繁殖性能、初乳成分及血浆代谢物和繁殖激素含量的影响。选取3~7胎次巴马香猪40头,随机分为2组,每组20头,单栏饲养。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加3.5 kg/t甜菜碱盐酸盐。试验期为母猪配种后第3天至分娩后第21天。结果表明:与对照组相比,饲粮添加甜菜碱显著降低仔猪死亡率(P<0.05),增加断奶仔猪数(P=0.087);饲粮添加甜菜碱显著增加初乳中乳蛋白和尿素氮含量(P<0.05);饲粮添加甜菜碱显著降低妊娠第75天血浆总蛋白(TP)含量(P<0.05),显著降低妊娠第105天血浆TP含量和谷草转氨酶(AST)活性(P<0.05),显著增加妊娠第75天血浆碱性磷酸酶(ALP)活性以及产后第7天血浆AST和ALP活性(P<0.05),且妊娠第105天血浆ALP活性呈增加趋势(P=0.073);饲粮添加甜菜碱显著降低妊娠第45天血浆催乳素(PRL)、孕酮(PROG)、促卵泡素(FSH)和雌二醇(E2)含量以及妊娠第75天血浆PRL和PROG含量(P<0.05),且妊娠第75天血浆E2含量(P=0.061)和妊娠第105天血浆FSH含量(P=0.062)呈下降趋势。综上所述,饲粮添加甜菜碱可改善初乳成分和血浆代谢物含量,降低血浆繁殖激素含量,进而增加断奶仔猪数。     

饲粮添加甜菜碱对巴马香猪血常规指标和器官生长的影响

本试验旨在研究饲粮添加甜菜碱对巴马香猪血常规指标及器官生长的影响。选用26头体况相近的妊娠巴马香猪,随机分为2组,其中对照组12头,饲喂基础饲粮;试验组14头,在基础饲粮中添加3.5 kg/t甜菜碱。仔猪28日龄断奶并适应7 d后,每窝选取4头接近平均体重的仔猪,随机分为2组,每组2头,对照组或试验组的每2窝中的2头仔猪合并为1栏。对照组12栏,母猪添加组7栏,均饲喂基础饲粮;母-子猪添加组7栏,在基础饲粮中添加2.5 kg/t甜菜碱。分别于仔猪95和125日龄时,每栏选择接近平均体重的巴马香猪1头,前腔静脉采血,检测血常规指标;处死后分离心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胃并称重并计算器官指数。结果表明,与对照组相比,母-子猪添加组95日龄时的嗜酸性粒细胞数(EOS)、体重、脾脏重和脾脏指数显著升高(P<0.05),平均血小板体积(MPV)显著降低(P<0.05);125日龄时的嗜碱性粒细胞百分比(BAS%)、体重、心脏重、肝脏重、脾脏重、肾脏重、胃重和肝脏指数显著升高(P<0.05)。与母猪添加组相比,母-子猪添加组95日龄时的体重、心脏重、肝脏重、脾脏重和肾脏重以及125日龄时的心脏重、肝脏重、肾脏重、胃重和肝脏指数显著增加(P<0.05)。由此可见,妊娠巴马香猪及其子代饲粮添加甜菜碱可影响血液中EOS、BAS%和MPV,增加体重,促进器官生长。     

不同栽培密度和施肥量对巴马火麻生长发育及麻籽产量的影响

【目的】探索出最适宜巴马火麻的栽培密度及施肥量,为其高产栽培提供参考。【方法】采用2因素随机区组设计,分析不同栽培密度（A1：6.0万株/ha、A2：9.0万株/ha、A3：12.0万株/ha）和复合肥施肥量（B1：450 kg/ha、B2：750 kg/ha、B3：1050 kg/ha）处理组合对巴马火麻出苗期、雄株见蕾期、雄株开花期、雌株结果期、株高、茎粗、有效分枝数、千粒重、雌雄株比例、火麻籽产量的影响。【结果】不同处理对巴马火麻生长无明显影响,除雄株茎粗外,其他各农艺性状处理间差异均不显著（P＞0.05）,但对火麻籽产量影响存在较大差异,各处理产量排名依次为：A2B3>A3B1>A2B2>A3B2>A3B3>A1B1>A1B2>A2B1>A1B3,其中A2B3产量为1351.88 kg/ha,显著高于A1B2、A2B1和A1B3（P＜0.05）。【结论】栽培密度与施肥量互作可以影响巴马火麻籽产量,适当加大栽培密度和增施肥料是获得高产的重要措施,以栽培密度9.0万株/ha、复合肥（17-17-17）施肥量1050 kg/ha最佳。     

电融合/激活对于巴马小型猪体细胞克隆胚胎生产的影响

本试验旨在建立适用于猪体细胞克隆的融合/激活体系(试验1),优化融合/激活条件以提高重构卵融合率和激活率,为生产足够数量的克隆胚胎用于胚胎移植最终诞生体细胞克隆猪奠定条件。首先比较脉冲时间确定适合体细胞克隆的最佳融合/激活参数,然后利用此参数验证巴马小型猪耳部成纤维细胞克隆胚胎的发育潜能。结果显示:场强100 V/mm,3次电脉冲,脉冲时间为30μs时适于猪体细胞克隆。在试验2中,利用巴马小型猪耳部成纤维细胞为供体细胞构建体细胞克隆胚胎,得到了较高的卵裂率(83.1%)和囊胚发育率(12.4%)。     

N-氨甲酰谷氨酸对环江香猪生长性能、营养物质消化率及血浆游离氨基酸含量的影响

为了探讨N-氨甲酰谷氨酸(N-carbamylglutamate,NCG)对环江香猪生长性能、营养物质消化率及血浆游离氨基酸含量的影响,试验选用平均体重为(12.6±1.7) kg的环江香猪10头,随机分为2组,每组5个重复,每个重复l头猪,单笼饲养,分别饲喂基础饲粮和添加0.1％ NCG的试验饲粮,试验期为10 d....     

戊酸雌二醇对雌性巴马香猪脂质代谢的影响及其作用机制

本试验旨在研究戊酸雌二醇对雌性巴马香猪脂质代谢的影响及其作用机制。采用单因子试验设计,选取20头健康的35日龄雌性巴马香猪随机分为2组,即对照组与试验组,每组10个重复,每个重复1头猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮中添加0.66 mg/kg戊酸雌二醇(相当于0.5 mg/kg雌二醇)的试验饲粮,试验周期为120 d。结果表明:1)饲粮添加戊酸雌二醇显著降低了雌性巴马香猪末体重、体增重及体脂肪率(P0.05)。2)饲粮添加戊酸雌二醇显著降低了雌性巴马香猪血液葡萄糖、甘油三酯及低密度脂蛋白含量(P0.05)。3)与对照组相比,试验组雌性香猪背部皮下脂肪中脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶-A羧化酶(ACC)及脂蛋白脂肪酶(LPL)的mRNA相对表达水平显著降低(P0.05),激素敏感脂肪酶(HSL)、脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)及雌激素受体-β(ER-β)的mRNA相对表达水平显著升高(P0.05),过氧化物酶体增殖因子受体-γ(PPAR-γ)、过氧化物酶体增殖因子受体-α(PPAR-α)及雌激素受体-α(ER-α)的mRNA相对表达水平无显著差异(P0.05);腹部皮下脂肪中的FAS、ACC及LPL的mRNA相对表达水平显著降低(P0.05),PPA R-α、HSL、A TG L、ER-α及ER-β的mRNA相对表达水平显著升高(P0.05),PPAR-γ的mRNA相对表达水平无显著差异(P0.05);肾周脂肪中的PPAR-γ、FAS、ER-α及ER-β的mRNA相对表达水平显著降低(P0.05),HSL、ATG L及LPL的mRNA相对表达水平显著升高(P0.05),A CC及PPA R-α的mRNA相对表达水平无显著差异(P0.05)。由此可见,戊酸雌二醇可以有效地控制雌性巴马香猪的体增重及脂肪沉积,并且能有效地改善血糖及血脂水平。戊酸雌二醇可能通过2个途径来调节雌性香猪白色脂肪组织中的脂质代谢:其一,通过对脂肪合成及脂肪分解相关基因表达的调节来影响脂质代谢;其二,通过对雌激素受体基因表达的调节来调控LPL的表达,进而影响脂肪的合成代谢。