云南省灯盏花根际土壤2种滑刃线虫的鉴定

首次报道了灯盏花根际土壤的2种滑刃线虫：内卷滑刃线虫（Aphelenchoides involutus Minegawa,1992）,燕麦真滑刃线虫（Aphelenchus avenae Bastian,1865）。灯盏花是这2种线虫的新记录寄主。     

滑刃线虫属一新种——西洋参叶线虫

 1990~1991年在吉林左家中国农科院特产研究所试验地的西洋参叶片上发现多角形褐色病斑,由一种滑刃线虫为害引起。其种的鉴别特征为:口针较短(7.5~10.0 μm),唇区基部缢缩,排泄孔的位置位于神经环和贲门之间,尾尖突为星状,雄虫的交合刺具较明显的顶尖和喙突,与滑刃线虫属内的其它种不同。经鉴定为滑刃线虫一新种,定名为西洋参叶线虫Aphelenchoides panaxofolia.     

水稻干尖线虫的环介导恒温扩增技术(LAMP)快速检测方法

【目的】本研究旨在为水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi Christie,1942)的快速检测鉴定和早期诊断提供一个新的检测方法。【方法】利用水稻干尖线虫18S核糖体RNA基因,设计了水稻干尖线虫LAMP的特异引物,该引物包括1对外引物、1对内引物和1对环引物,以LAMP特异引物对待测样品DNA进行恒温扩增,扩增产物通过电泳法和荧光染料法进行检测,电泳检测出现阶梯状条带或加入荧光染料显现绿色荧光,则证明待检样品中含有水稻干尖线虫。【结果】本方法可以检测鉴定水稻干尖线虫不同虫态(雌虫、雄虫、幼虫或卵)的个体,可以从多种线虫混合的样品和植物组织样品中直接检测出水稻干尖线虫,检测灵敏度达到1/1000条虫DNA。【结论】本检测方法具有准确、灵敏、稳定和结果直观的优点,且操作简便、实用性强。     

水稻干尖线虫Ab-lea基因在高渗透压下的表达

【目的】水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)在侵染寄主以前,能够以变渗隐生状态在土壤和种子中的高渗透压环境下长期存活,使防治该线虫极为困难。通常,非生物胁迫下,胚胎发育晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundant protein,LEA)的基因表达量会显著上调。作为逆境表达蛋白,LEA能在逆境下保护生物。为探究水稻干尖线虫LEA编码基因(Ab-lea)在高渗透压胁迫下的表达模式及功能,【方法】根据转录组数据克隆到Ab-lea。以无机溶剂饱和Mg SO4·7H2O溶液为高渗透压胁迫剂,对水稻干尖线虫进行高渗透压胁迫,240 min后该线虫进入变渗隐生。通过RT-PCR验证Ab-lea在线虫进入变渗隐生及维持变渗隐生过程中的表达特性。使用RNAi技术,探究该线虫Ab-lea沉默后,高渗透压胁迫下存活率变化。【结果】RT-PCR结果表明,Ab-lea在进入变渗隐生前期及维持变渗隐生过程中表达量上调。Ab-lea沉默后,水稻干尖线虫在进入变渗隐生后存活率显著下降。【结论】表明该基因可能参与调控水稻干尖线虫变渗隐生。本研究为进一步探究该线虫抗高渗透压胁迫的生理机制奠定基础,为防治该线虫提供新思路。     

Effects of Temperature, Humidity and Different Rice Growth Stages on Vertical Migration of Aphelenchoides besseyi

The vertical migration of Aphelenchoides besseyi under different temperatures and humidities and at different rice growth stages was investigated. It was found that the optimum temperature for the development and reproduction of A. besseyi was 25-30°C. At the same temperature, the rate of vertical migration increased with rising relative humidity. Artificial inoculation tests showed that at the elongation stage, nematodes survived mainly on the upper and middle parts of rice culms, and the number of nematodes decreased by 50% at 20 days after inoculation compared with that at 5 days after inoculation. Whereas at the booting stage, nematodes accumulated in young panicles and reproduced quickly, and the average number of nematodes at 20 days after inoculation increased to 164.5, three times of that at 5 days after inoculation.     

Assessment of Rice Cultivars in China for Field Resistance to Aphelenchoides besseyi

The effect ofAphelenchoides besseyi on 27 cultivars of rice （23japonica and 4 indica） was assessed in the field for two seasons during 2010 and 2011. The vigorous pathogenic nematodes culturing on Botrytis cinerea were used for this experiment. Inoculation was carried out at the tilling stage; the growth parameters and nematode population were recorded at the end of growth of rice plants. The results showed that the cultivars differed in their response to infection. Most of cultivars were lack of the characteristic symptom of white tip, which was seen less frequently than the other two symptoms, namely small grains and erect panicles; moreover, the expression of symptoms was probably hereditary. The infection lowered the values of all the measured biological parameters, namely length of the stem and of the panicle, the number of filled grains per panicle, and 100-grain weight, in all the cultivars. The final nematode population indicated that the threshold of economic damage had also been exceeded in 10 cultivars, and none of them was immune. Three japonica cultivars proved most vulnerable whereas Tetep, an indica type, showed a level of resistance potentially useful in controlling A. besseyi.     

水稻干尖线虫Hsp90基因克隆及在不同逆境、侵染早期和取食过程的表达差异

热激蛋白90(heat shock protein 90,Hsp90)调控生物体的细胞代谢、生长发育和逆境适应等一系列生物过程.本研究通过cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)分离获得了一个水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi)Hsp90基因,命名为Ab-hsp90.Ab-hsp90全长cDNA序列含有69bp的5’非翻译区、编码712个氨基酸2 139 bp的开放阅读框以及137 bp的3'非翻译区UTR.Ab-hsp90DNA序列包含9个外显子和8个内含子.Ab-hsp90蛋白序列与其他植物寄生线虫Hsp90s高度相似,最大似然树显示与植物寄生线虫位于同一进化分支;结构上具有5个保守的Hps90蛋白家族序列标签和特异MEEVD基系,表明Ab-hsp90为胞质型Hsp90.qRT-PCR显示,Ab-hsp90在水稻干尖线虫各个龄期均表达,在卵和成虫表达水平最高.当线虫暴露于干燥、低渗透胁迫以及短时间阿维菌素溶液中时Ab-hsp90均上调表达;Ab-hsp90还受到短时低温(4℃)诱导,在高温(40℃)环境持续高水平表达.在侵染抗感不同的水稻(Oryza sativa)植株时,Ab-hsp90的表达水平具有差异性:在线虫接种抗性水稻72 h内,Ab-hsp90一直高度表达,而在接种感病水稻上Ab-hsp90表达水平显著升高随后下降.取食灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的线虫Ab-hsp90在9d内始终高度表达,而胡萝卜(Daucus carota)愈伤组织培养的线虫6d内Ab-hsp90表达上调但此后逐渐下调.这些数据表明,Ab-hsp90可能参与水稻干尖线虫的抗逆适应、早期侵染以及取食行为.本研究有助于拓展植物寄生线虫Hsp90蛋白的功能,为进一步研究线虫与植物互作机制提供了有益借鉴.     

入境姜上两种滑刃线虫的鉴定

广东出入境检验检疫局植检实验室于印度尼西亚和多哥进境的姜上各截获一种伞滑刃属线虫,经形态学观察、测量,为变尾滑刃线虫和古德伊滑刃线虫。在姜上首次发现该两种线虫。     

中国不同地区水稻干尖线虫种群的繁殖特性研究

【目的】明确来自中国不同地区的水稻干尖线虫种群的繁殖特性。【方法】通过室内组织培养的方法,研究来自中国8个省15个种群的水稻干尖线虫,在灰葡萄孢菌上的繁殖力及其繁殖适温。【结果】在灰葡萄孢菌上,供试的15个水稻干尖线虫种群在20℃不能很好繁殖,其中有9个种群的繁殖适温是25℃,6个种群的繁殖适温是30℃;20℃时,繁殖量最大种群的繁殖率是22.2,繁殖量最小种群的繁殖率仅有0.9,有3个种群无雄虫存在;25℃时,繁殖量最大种群的繁殖率是3 523.8,繁殖量最小种群的繁殖率是207.2,只有1个种群无雄虫存在;30℃时,繁殖量最大种群的繁殖率是1 525.0,繁殖量最小种群的繁殖率是6.9,所有种群均有雄虫存在。【结论】来自中国不同地区的水稻干尖线虫种群均能在灰葡萄孢菌上繁殖,种群之间的繁殖力和繁殖适温均存在差异,地理来源较远的种群之间差异较大;在适温条件下,华南地区多数种群的繁殖力大于其他地区,种群繁殖特性与地理来源有一定关系;所有种群均能孤雌生殖,后代均以雌虫为主,但不同种群的雌雄比有较大差异。     

大豆根际促生菌Sneb207对不同种类线虫毒性的研究

从大豆根瘤中分离到1株根际促生菌Sneb207,经鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium).室内测定结果表明:其发酵产物对豆苗生长促生效果显著,发酵液灭菌后仍具有促生活性,具有广泛的应用价值.用该菌发酵液测定了对各种线虫的作用,结果表明毒力作用具有差异,大小顺序分别为大豆胞囊线虫、北方根结线虫、水稻干尖线虫和腐烂茎线虫.不同浓度发酵液对大豆胞囊线虫均有较好的防治作用,与无菌水对照处理有显著差异.说明细菌菌株Sneb207是控制大豆胞囊线虫病且促进大豆生长的有效因子.