泰和鸡黑色素的发生初探

对泰和鸡胚胎及其组织切片,匀浆涂片进行了观察,发现当胚胎发育到５－６ｄ时,黑色素首先在鸡胚荐部皮肤发生,然后以该部位为中心,向前后左右扩展,黑色素首先发生于皮肤组织和骨膜肌膜,然后发生于肌间结缔组织,最后在肌纤维中出现。     

长牡蛎MITF基因表达及与壳色的关联

为了解长牡蛎MITF基因的表达及其与壳色的关联,验证了长牡蛎中的4个MITF基因,对长牡蛎MITF氨基酸序列进行了序列分析和多序列比对,分析了长牡蛎幼体发育各时期的转录组,采用荧光定量PCR的方法研究长牡蛎各组织及黑壳、白壳牡蛎特定部位mRNA表达情况。4个MITF基因中有3个基因可能为假基因,有表达的长牡蛎MITF基因共编码448个氨基酸,为亲水性不稳定蛋白,含有N端结构域(MITFTFEBC3N superfamily)和高度保守的功能性结构域HLH结构域。转录组分析发现MITF在长牡蛎个体发育的各个时期均有表达,在稚贝期达到最高。组织表达结果显示MITF在外套膜中的表达水平显著高于其他组织。MITF在黑壳牡蛎闭壳肌中的表达量显著低于白壳牡蛎,而在黑壳牡蛎外套膜中的表达量高于白壳牡蛎,但不显著。在黑壳、白壳牡蛎外套膜边缘的表达量都显著高于内侧。研究表明,长牡蛎MITF基因可能在牡蛎壳形成早期就参与了黑色素的生成调控和个体的生长发育,可调控牡蛎酪氨酸酶Tyr2基因,参与外套膜和贝壳中黑色素的形成。本研究为进一步研究牡蛎壳色形成机制奠定了基础。     

金鱼温室早繁技术(下)

5、人工孵化 受精卵遇到水后,卵膜很快吸水膨胀,若是健康的卵,则稍微透明,淡黄色。2-3日内经过多次细胞分裂,透明度逐渐减小,当出现黑色眼点时（眼球的黑色素）,表明这样的卵可以孵化出鱼苗。如果卵变成不透明的乳白色,外部长满白毛,这说明卵已腐败,感染了水霉菌,要及时清除,以免扩大感染,影响孵化率。     

半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)黑色素富集激素基因的克隆和表达

为研究黑色素富集激素基因(MCH)表达调控与半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)无眼侧黑化性状的关系,通过分子克隆获得了半滑舌鳎pMCH2,通过NCBI获得了pMCH1 cDNA序列,分析了pMCH mRNA的组织表达特性,探索了脑垂体和皮肤中的pMCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系.结果显示,pMCHl cDNA序列长476 bp,编码134个氨基酸,与鲽形目、鲤形目和鲈形目鱼类的pMCH1氨基酸聚为1个进化分支.pMCH2 cDNA序列全长为626 bp,编码147个氨基酸,与鲽形目和鲍形目鱼类的pMCH2氨基酸聚为1个进化分支.2种MCH mRNA在垂体中表达量最高,同时,MCH1 mRNA在除肌肉外的其他组织中均可检测到表达;MCH2 mRNA在脑、有眼侧皮肤、无眼侧正常皮肤、性腺和鳃组织中也可检测到较高表达.MCH mRNA表达与无眼侧黑化程度的关系分析显示,脑垂体和皮肤中MCH1 mRNA表现出相似的表达变化趋势,都是10％黑化组的表达量最高,而后随黑化程度加大显著降低.对于MCH2而言,无眼侧正常鱼和无眼侧50％黑化鱼的脑垂体中都具有较高的MCH2 mRNA表达水平,但在无眼侧10％黑化组和无眼侧80％黑化组,其表达水平显著降低.皮肤中MCH2表现出随黑化程度加大而显著升高的趋势.本研究结果可为认识MCH基因与半滑舌鳎无眼侧黑化性状的表达调控关系提供基础资料.     

日粮酪氨酸水平对固原乌鸡黑色素生成的影响

研究旨在利用组织学与分子生物学方法观察不同日粮酪氨酸水平对固原乌鸡组织中黑色素与相关酶的影响。选用体况良好、体重相近的4周龄固原乌鸡150只（公、母各半）,随机分成5组,每组3个重复,每个重复10只鸡。对照组试验鸡饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加0.2%、0.4%、0.6%、0.8%的L-酪氨酸。试验期8周。结果显示：5组乌鸡组织的黑色素分布情况一致。与对照组相比,0.8%酪氨酸组固原乌鸡的肺脏、气管、腹部皮肤与回肠组织中黑色素颗粒含量均有不同程度的增加。各组乌鸡肝脏中均未观察到黑色素颗粒。与对照组相比,0.4%酪氨酸组乌鸡皮肤、胸肌、小肠中酪氨酸酶的活性显著提高（P<0.05）,0.6%酪氨酸组、0.8%酪氨酸组乌鸡皮肤、胸肌、小肠、肝脏与血清中酪氨酸酶的活性均显著提高（P<0.05）。与对照组相比,0.2%酪氨酸组固原乌鸡胸肌中黑色素的含量显著提高（P<0.05）,0.4%～0.8%酪氨酸组乌鸡皮肤、肝脏、胸肌、小肠中黑色素的含量显著提高（P<0.05）。与对照组相比,0.4%～0.8%酪氨酸组固原乌鸡血清中促黑素细胞激素活性显著提高（P<0....     

无患子总皂苷提取工艺优化及其对酪氨酸酶的抑制活性

为了探究无患子总皂苷提取、富集工艺及其对酪氨酸酶的活性抑制,通过正交试验法优化无患子总皂苷提取工艺,将提取液浓度、提取时间和料液比作为考察因素,以无患子总皂苷含量作为评价指标,筛选无患子总皂苷最佳提取工艺。无患子提取物纯化后,对各组分体外酪氨酸酶活性抑制作用进行考察,评价其美白效果。研究结果表明,无患子总皂苷优化后的提取工艺为:以60%乙醇为提取溶剂,料液比1 g∶30 mL,提取时间1.5 h。经D101大孔树脂70%乙醇富集后的无患子提取物Y-3(70%乙醇)体外酪氨酸酶抑制活性较强,纯化效率较高,与同浓度阳性对照熊果苷抑制活性相接近。综上,经试验优化所得提取、纯化工艺稳定可靠,按此方法提取的无患子总皂苷提取物再经进一步纯化富集后有更好的酪氨酸酶抑制作用和更好的美白效果。     

基因编辑酪氨酸酶(TYR)基因不同功能区对鱼类体色的影响

酪氨酸酶(Tyr)基因在动体的黑色素合成过程中起关键作用，其突变会导致人类和其他物种出现白化现象。本研究以AB系斑马鱼(Danio rerio)为研究对象，应用CRISPR/Cas9基因编辑技术，对纯合亲鱼受精卵进行显微注射，通过编辑损坏Tyr基因的CDS区第二外显子和3′-UTR非poly-A加尾信号区，使基因发生突变，检测基因不同功能区经编辑后对鱼类体色的影响。结果显示：Tyr基因在野生型斑马鱼的胚胎各个发育时期均能正常表达，眼睛出现黑色素时的表达量最高；编辑损坏Tyr基因的CDS区后，突变型斑马鱼的胚胎和仔鱼均未出现黑色素细胞，表现为体表白化，而成鱼会再度出现黑色素细胞，表现为体表黑色条纹断裂。编辑损坏Tyr基因的3′-UTR非poly-A加尾信号区后，突变型胚胎、仔鱼和成鱼均未出现黑色素减褪，黑色素合成未受影响。本研究表明，编辑损坏基因的CDS区会对生物表型产生显著影响，而编辑损坏3′-UTR非poly-A加尾信号区对生物表型的影响有限。     

基于转录组和蛋白组筛选乌骨鸡肤色性状候选基因

旨在基于转录组和蛋白组的联合分析，筛选影响乌骨鸡肤色性状的候选基因。本研究在HW1系黑羽乌骨鸡群体中选取150日龄的6只白肤个体和6只乌肤个体分为两组(white skin, WS和black skin, BS)作为试验样本，采集胸部皮肤组织，提取RNA和蛋白，进行高通量转录组测序(RNA-Seq)和蛋白组定量分析，筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)和差异表达蛋白(differentially expressed proteins, DEPs),并对其进行实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证、功能富集分析和蛋白互作网络的构建与分析，进一步筛选与乌骨鸡肤色性状相关的候选基因。结果显示，转录组共鉴定到293个DEGs,蛋白组共鉴定到4个DEPs,其中重叠的基因有CRP、DCT、GPNMB。随机选择5个DEGs进行RT-qPCR验证，表达趋势与测序结果一致。富集分析表明，DEGs和DEPs显著富集在71个GO条目和4个KEGG通路中，包括黑素细胞分化、黑素体、黑素体膜和黑素原生成通路。接下来，通过Cytoscape软件的cytoH...     

余干乌骨鸡胃和小肠肥大细胞的分布特点

通过石蜡切片、改良甲苯胺蓝染色的方法对余干乌骨鸡主要胃肠道内的肥大细胞进行鉴定和分布特点分析。结果显示,在余干乌骨鸡的腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和回肠管壁内皆有肥大细胞的分布,尤其是腺胃和肌胃内肥大细胞尤为丰富。肥大细胞主要位于胃肠道管壁内的黏膜固有层和肌层中,有些围绕着血管周围分布。黏膜下层极少有肥大细胞分布。外膜内无肥大细胞,但空肠外膜外附有的结缔组织中,脂肪细胞周围有肥大细胞分布。肥大细胞体积较大,多数呈卵圆形,有的细胞形态不规则,甚至有突起。胞质中含有紫红色颗粒。结果表明,余干乌骨鸡胃肠道管壁内具有丰富的肥大细胞,余干乌骨鸡胃肠道具有较强的抗病原微生物和抗寄生虫功能,肠道免疫屏障较为完善。同时,大量的肥大细胞在胃肠道内的分布可能与黑色素的生成具有相关性。