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991.
《中国兽医学报》2019,(8):1428-1434
为了建立高效灵敏的伪狂犬病病毒(PRV) gE蛋白的间接免疫荧光抗体诊断方法,本研究将PRV/HN/SMX/2012毒株gE蛋白的自身信号肽及胞外域片段克隆到pFastBacHT B载体上,构建重组质粒pFastBacHTB-gE,并转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,经过3次蓝白斑筛选获得含有gE基因的重组杆粒rBacmid-gE。随后,将该杆粒转染至sf9昆虫细胞中,获得重组杆状病毒rAcMNPV-gE。经Western blot和间接免疫荧光实验(IFA)进行鉴定分析,发现重组gE蛋白在sf9细胞中表达。利用该sf9细胞建立检测血清中gE抗体的间接免疫荧光抗体(IDF)方法,通过反应条件的优化发现,将血清和羊抗猪FITC-IgG分别进行1∶40和1∶2 000稀释时所建立的方法能针对血清中gE抗体产生较强的特异性荧光;通过与商业化的ELISA检测gI/gE试剂盒(IDEXX)比较,所建立的检测方法与商业化试剂盒的总符合率为93.18%(164/176),阳性结果符合率93.75%(120/128),阴性结果符合率91.67%(44/48),2种方法存在很强的一致性(Kappa=0.832,CI=95%);-20℃条件下保存2个月的稳定性和重复性良好。 相似文献
992.
993.
新疆兵团主要植棉区机采棉田杂草调查 总被引:1,自引:1,他引:0
采用倒置“W”九点取样法对新疆兵团北疆、东疆主要植棉师蕾期、铃期棉田杂草进行调查。结果表明:北疆第六师、东疆第十三师机采棉田杂草主要有16科31种,其中禾本科杂草占16.1%,阔叶杂草占80.7%,莎草科杂草占3.2%;1年生杂草占64.5%,多年生杂草占35.5%。北疆第六师蕾期棉田优势杂草为龙葵、野西瓜苗、田旋花、灰藜,铃期优势杂草为龙葵、田旋花、灰藜。东疆第十三师蕾期棉田优势杂草为灰藜、反枝苋、狗尾草,铃期优势杂草为龙葵、灰藜、反枝苋、田旋花。不同地区、不同生育时期棉田优势杂草有所差异。研究结果将为新疆兵团机采棉田杂草的科学可持续防控提供重要依据。 相似文献
994.
995.
不同的样本特性和提取方法对获得微生物总DNA的质量有重要影响。文章基于高含固率木质纤维素厌氧发酵物腐殖酸、酚类物质含量高、质地均一性差、微生物浓度低的特点,研究了4种方法提取不同高含固率粪秸厌氧发酵物中微生物总DNA的效果。结果表明,常规的十二烷基磺酸钠法(sodium dodecyl sulfate,SDS)、十二烷基磺酸钠和溴化十六烷基三甲铵结合法(sodium dodecyl sulfate and cetyltrimethyl ammonium bromide,SDS-CTAB)和商业的粪便试剂盒法提取的DNA质量均较差,SDS法和试剂盒法未能获得聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增目的条带,SDS-CTAB法得到的条带较模糊;改进SDS-CTAB法获得的DNA杂质少、纯度高,具有较好的稳定性,A260/A280和A260/A230值分别为1.74~1.86和1.65~1.86,每克样品的DNA浓度在50 ng·μL^-1以上,电泳条带单一齐整、清晰明亮,PCR扩增的目的条带清晰度高,适宜后续分子生物学技术的分析。林格氏液洗脱、聚乙烯吡咯烷酮-40(Polyvinyl Pyrrolidone-40,PVP-40)洗涤液除杂以及裂解液和多种酶联合破壁是改进SDS-CTAB法获得该类专一性样本高质量微生物总DNA的关键步骤。 相似文献
997.
《信阳农业高等专科学校学报》2020,(1):92-96
为筛选出防治暴食性害虫灰茶尺蠖的有效应急药剂,采用浸叶法,测定了7种杀虫剂对灰茶尺蠖2龄幼虫的毒力。结果表明:杀虫剂较低浓度处理48 h比24 h的校正死亡率高,毒杀效果明显。虫螨腈处理24 h对灰茶尺蠖毒力最高,拟除虫菊酯类杀虫剂次之,茚虫威和唑虫酰胺毒力较低。本研究可为茶园夏秋季应急防治灰茶尺蠖的合理用药提供参考。 相似文献
998.
999.
拉脱法是一种后张法预应力桥梁锚下预应力的有效检测方法,但是夹片脱开时的受力机理尚不明确。采用该方法检测有效预应力时,如何准确确定夹片咬合力从而获得锚下有效预应力的理论模型还需深入研究。为获得更加准确的咬合力,笔者首先分析了拉脱法检测时锚固体系的受力特点,分析了锚外拉脱曲线的突变原因;其次建立了一种获得夹片与锚板之间咬合力的理论计算方法,分析了咬合力受摩擦系数和张拉力的影响情况;再次,设计了夹片咬合力室内模型试验,进行了足尺预应力梁的室外试验,并将理论计算值和实验值进行了对比分析,结果与理论模型吻合良好。在仿真计算和室内外试验的基础上,提出了拉脱法咬合力与张拉力的理论关系模型,并根据实测结果给出了拉脱法咬合力的计算公式。利用提出的咬合力理论模型和计算公式,能够比较准确地预测拉脱法检测时的咬合力,反映拉脱法检测有效预应力时的实际受力状态,减少了拉脱法预应力检测的系统误差。研究结果可为提高预应力施工质量,增强预应力混凝土桥梁的耐久性,提供实际的工程价值和理论指导。 相似文献
1000.
《当代畜牧》2014,(29):84
国内豆粕市场在我国国庆长假前呈现下滑走势,国庆后出现反弹但受丰产压力影响遇挫。新收割的美国大豆产量较好以及美国农业部10月月度供需报告继续上调美国大豆单产量,或将致使CBOT大豆继续弱势调整。在过去2周里,美国大豆落叶率为83%,收割率为20%,生长优良率为73%。国内豆粕价格跟随CBOT大豆价格下滑后出现小幅反弹阶段,后市偏空氛围较浓。由于本周为国庆假期,饲料企业节后出现备货需求,油厂豆粕成交量较上周有所上涨。据统计,某些大型饲料企业豆粕库存约2~3周,小型企业约1~2周不等。期货行情:由于CBOT大豆持续下跌后国庆期间有所反弹,国内连盘豆粕合约跟随美豆下跌后有所 相似文献