梅花鹿微卫星DNA富集文库的构建与鉴定

梅花鹿基因组DNA经限制性内切酶MboI酶切,用1.5%的琼脂糖凝胶电泳回收400～1000 bp的DNA片段,与MboI连接接头相连接,连接产物与生物素标记的(AC)15微卫星探针变性及退火,再通过链亲和素偶联磁珠亲和捕捉,经吸附,洗涤及洗脱,然后以洗脱产物为模版,以其中一个接头为引物进行PCR扩增,将扩增产物回收纯化并与pMD18-T载体相连接,转化大肠杆菌DH5a,构建梅花鹿(AC)n微卫星DNA富集文库,经测序分析表明该文库含重组克隆约为1 380个,其中计算得到阳性克隆率为82.9%。梅花鹿微卫星文库的建立将为一步进行梅花鹿基因组结构的分析、梅花鹿遗传连锁图谱的构建、分子进化和系统发育研究、标记辅助选择以及经济性状的QTL定位提供大量的微卫星标记。     

四种植物生长调节剂浸种对玉米调控效应

为明确天达-2116、好鲜收、复硝酚钠、芸苔素内酯4种植物生长调节剂对玉米生长发育、产量及品质调控作用,为四种植物生长调节剂在玉米上的应用提供依据。以兴单131为试验材料,采用浸种法在田间进行随机区组试验,结果表明,4种植物生长调节剂浸种能增强玉米植株长势,提高玉米产量及品质,其中天达2116效果较为明显,出苗率比对照提高11.1%,产量每公顷比对照增产850.4 kg,增产率达9.6%,增产效益显著,好鲜收、芸苔素内酯分别比对照增产7.9%和7.4%,复硝酚钠对玉米千粒重影响较大,比对照增加17.3 g,差异达极显著水平。天达-2116、好鲜收、复硝酚钠、芸苔素内酯4种植物生长调节剂可作为玉米浸种剂使用。     

中蜂与意蜂营养杂交对意蜂微卫星遗传多态性的影响

通过人工添加中华蜜蜂王浆技术来培育江山2号与法国意蜂的杂交蜂王,并测定江山2号、法国意蜂、中华蜜蜂、营养杂交子1代和子4代工蜂的微卫星遗传多态性。结果表明,经过营养杂交,亲本蜜蜂与营养杂交子代的遗传距离发生明显的变化,中华蜜蜂和意大利蜜蜂的特有DNA条带发生了转移。说明通过蜂种之间的营养杂交可以改变其微卫星多态性。     

中粳水稻品种资源遗传多样性Ⅲ. 不同时期育成品种SSR多样性的比较分析

利用 42个SSR标记对我国中粳水稻稻区不同时期育成的137份品种进行遗传多样性分析,33个标记具有多态性,在多态性位点共检测到107个等位基因,每个引物上的等位基因数为 2～7个,平均3.2个。供试品种Nei多样性指数平均值为0.290,变异范围为0.162～0.419。供试品种在籼粳分化程度上差异明显,TDj值平均为0.7787,变幅为0.3620～0.9445,多数品种的籼粳分化较为彻底,地方品种和早期育成品种存在粳型倾籼类型。利用SSR分子标记进行UPGMA聚类分析,可将130个典型粳型品种、3个籼稻对照品种和7个粳型倾籼型品种明显分开,与形态分类的结果相一致,130个粳稻品种可分为多个类群。Nei基因多样性指数He,TDj值、SSR多样性变化趋势表明,我国中粳水稻稻区不同时期育成的品种遗传多样性呈下降趋势,因此,水稻育种中应发掘新的种质资源,拓宽品种的遗传多样性。     

利用SSR标记鉴定家蚕不同系统的品种初探

选择能够区分中国系统和日本系统的分子标记对品种鉴定和杂交率检测具有重要意义。采用了17对微卫星标记(SSR)引物,对7个中系品种、7个日系品种和3个欧系品种及1个中系×日系杂交种进行了多态性分析。筛选出15对具有多态性的SSR引物,其中11对SSR引物在中系品种和日系品种间具有多态性,同时获得2个理想的SSR位点,其组合完全可以对供试的中系品种和日系品种进行鉴定。引物FL1148在中系的7个品种间的条带基本一致,在日系的7个品种间,除保存品种6048外,均具有一致的带型,保存品种6048具有和7个中系品种一致的带型,引物FL1113在6048和7个中系品种间的带型均不相同。引物FL1148和FL1125的PIC值分别为0.654、0.785,说明SSR标记引物FL1125能对家蚕品种进行有效鉴定。     

分子标记辅助渗入佳辐占基因组约800kb区间定向改良珍汕97B外观品质

稻米的外观品质性状主要包括粒长、粒宽、长宽比、垩白和透明度。外观性状是稻米商品品质的第一要素,直接影响稻米的商品价值。中国杂交稻以产量高著名,但常因品质欠佳,尤其是外观品质差而影响杂交稻的推广应用。杂交稻汕优63是中国最著名的杂交稻组合,也因品质欠佳而不能持续应用。本研究构建了三个遗传群体,对稻米外观性状进行了经典和分子遗传学研究,并试图利用分子标记辅助手段改良我国三系杂交稻著名保持系“珍汕97B”,以期提高杂交稻汕优63的品质并使之持续应用。主要的研究结果如下:通过整合已发表的分子遗传图谱和基因组数据库,选用45个与外观性状相关的分子标记,在珍佳群体和广佳群体中进行稻米外观性状分子连锁群重建,并用区间作图法对稻米外观性状进行OTL分析。研究表明:在珍佳群体中,检测到9个与稻米外观性状相关的OTL,其中5号染色体的RM169-RM516是粒宽、长宽比、垩白和腹白的共同座位,贡献率分别为10.9％、14.9％、12.0％和14.2％;7号染色体RM214、8号染色体RM339都是垩白和腹白的共同座位,贡献率分别为9.4％和10.0％、11.0％和12.1％;3号染色体上检测到1个长宽比基因座位RM347,贡献率为10.3％。在广佳群体中,检测到5个与稻米外观性状的OTL,其中5号染色体RM169-RM516是粒宽、垩白和腹白性     

微卫星标记技术及其在蚕学研究中的应用前景

微卫星标记 ,又称SSR(simplesequencerepeat)标记 ,是目前运用最广的遗传标记之一。介绍了SSR标记的特征 ,产生多态性的基本原理 ,获得SSR标记的途径以及多态性数据的统计分析方法。解释了SSR标记使用过程中遇到的所谓“影子带”现象。展望了SSR标记技术在家蚕基因组研究中的应用前景。     

三种罗非鱼的微卫星分子鉴定和遗传结构分析

采用77对微卫星引物对奥利亚、尼罗和橙色莫桑比克三种罗非鱼基因组DNA进行PCR扩增,筛选出17个微卫星鉴定位点,其中奥利亚罗非鱼的特异位点UNH636、UNH117、UNH172、UNH738、UNH878、UNH896;尼罗罗非鱼的特异位点UNH913、UNH907、UNH222、UNH980 、UNH880和橙色莫桑比克罗非鱼的特异位点UNH876、UNH899、UNH853、UNH932、UNH933、UNH773,任意一个位点可在其中一种罗非鱼中扩增出其它两种罗非鱼不具有的条带,从而将这种罗非鱼与其它两种区分开来。利用这17个位点检测三种罗非鱼的遗传结构,共检测到142个等位基因,平均等位基因8.35个,数据经Popgen32计算和MEGA4软件作图,进行了聚类分析,确立了三种罗非鱼的亲缘关系。结果表明,奥利亚、尼罗、橙色莫桑比克三种罗非鱼的平均观测杂合度分别为0.0941、0.5490、0.2588,平均期望杂合度分别为0.1089、0.7230、0.2608,平均多态信息含量分别为0.0869、0.7149 、0.1643,由此可见,尼罗罗非鱼群体的遗传多样性水平最高,奥利亚罗非鱼群体遗传多样性最低;聚类分析显示奥利亚群体和橙色莫桑比克群体间的亲缘关系较近,与前人研究结果一致。     

三种分子生物技术在传粉生物学中的应用

在传粉生物学研究中,为了揭示传粉事件（繁育系统、花粉流、基因流、花粉竞争等）的真实本质,必须从分子水平进行研究。近年来,分子技术在传粉生物学中的应用主要有两大方面：一是繁育系统;二是花粉流、基因流。文章就目前运用较多的三种主要的分子技术——同功酶、RAPD（随机扩增多态性DNA）、SSRs（微卫星）作一综述,旨在为传粉生物学的深入研究提供参考。     

苹果EST中微卫星分析

利用MISA（microsatellite）软件分析了简单重复序列（simple sequence repeats,SSRs）在苹果EST中的分布频率与密度。结果表明,在263820条EST序列中,共获得160686条SSR序列,SSRs之间的距离约为0．79kb。其中,六碱基重复丰度最大,占57．2％,而单碱基、三碱基、二碱基、四碱基和五碱基重复丰度分别为14．5％,13．1％,10．1％,4．1％和1．0％。在单碱基、二碱基、三碱基和四碱基重复模体中,丰度最大的分别是A／T,AG,AAG和AAAG,而CG在编码区内丰度很低。用CAP3软件进行冗余分析表明,在这六种类型的重复模体中,冗余与非冗余的苹果EST之间没有显著差异,表明可从现有的ESTs数据中方便地获取有效的苹果微卫星标记。