猪流行性腹泻病毒在微载体培养Vero细胞上的增殖试验

为了探索猪流行性腹泻病毒(PEDV)在微载体培养Vero细胞上的增殖效果,采用2 L生物反应器进行微载体培养Vero细胞和PEDV繁殖,并摸索细胞生长和病毒繁殖的最佳条件,检测病毒滴度,与方瓶培养的病毒滴度进行比较。结果显示:当微载体为5 g,种子细胞数约3.05×107个,采用灌注式培养,Vero细胞经72 h长满单层,细胞数约为3.02×109个,此时用滴度为104.45TCID50/m L的PEDV 1 m L感染Vero细胞,培养96 h,微载体上80%细胞脱落时收毒,培养的PEDV具有较高的病毒滴度。相同病毒在微载体系统与方瓶上进行同步传代,经检测病毒滴度均有提高,但在微载体系统上培养的PEDV最高滴度可达到106.05TCID50/m L,明显高于方瓶培养。本试验为研究PEDV能更好适应Vero细胞,提高PEDV产量提供技术支持。     

一起雏鸭黄曲霉毒素中毒的诊治

<正>雏鸭黄曲霉毒素中毒是一种严重的中毒性疾病,是由于雏鸭误食了被黄曲霉毒素或寄生曲霉污染了的饲料而引起。黄曲霉毒素主要对肝脏造成损害,可引起肝细胞变性、坏死。临床上以肝功能障碍、全身出血、消化机能紊乱、腹水、神经症状为特征。各种畜禽均可发生本病,尤其以雏鸭最为敏感,表现为与雏鸭病毒性肝炎相类似的神经症状,并出现大量死亡,容易被误诊为雏鸭病毒性肝炎。1发病情况广西桂平市某养殖场2014年4月初购进近     

猪传染性胃肠炎的防制

猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性传染病。主要临床症状为呕吐、严重腹泻和脱水。该病分布范围很广，不同年龄、品种的猪对本病毒均易感染，其中两周龄以下的哺乳仔猪致死率可达95%以上，因此，做好猪传染性胃肠炎的防制是当前急需探讨的主题。     

1例貉犬瘟热的诊治及体会

犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬类急性、热性、高度接触性传染病，病兽以呈双相型发热、鼻炎、严重的消化道障碍、呼吸道炎症等为主要特征。主要通过接触传染，也可通过污染的空气或食物而经呼吸道或消化道感染。幼兽尤其易感，具有较高的发病率和死亡率。我县为貉、狐、貂养殖大县，年存栏近500万只，犬瘟热病时有发生，现将1例貉犬瘟热的诊疗及体会介绍如下。     

畜牧养殖业中传染性疾病的防治对策

畜牧养殖在我国广大农村牧区是创造经济收益的主要来源,养殖户在养殖工作中面临较大的风险隐患,特别是畜禽疾病带来的经济损失。为此,文章将畜牧养殖行业作为重点研究对象,阐述了传染性疾病的具体防治对策,供广大养殖者参考。     

猪传染性胸膜肺炎的诊断与治疗探究

猪传染性胸膜肺炎是由放杆菌引起的一种猪类细菌性呼吸道传染病,该病可引起猪的高度呼吸困难及急性败血症,从而引发死亡,是威胁养猪业产量的重要原因之一。随着养殖规模的不断扩大,现代养猪业出现猪传染性胸膜肺炎的几率越来越高,因此,需要采取更加有效地治疗措施,减少发病率,保证养殖收益。本文从以上情况出发,对猪传染性胸膜肺炎的诊断与治疗进行了深入分析,希望能够为养猪业的稳定发展提供一些参考。     

猪流行性腹泻病毒分离鉴定和灭活疫苗免疫保护效果探讨

猪流行性腹泻病毒是诱发猪流行性腹泻的关键因素,而猪流行性腹泻容易造成养殖猪,尤其是猪仔的死亡,进而给养猪业带来严重的经济损失.基于此,本文首先阐述了猪流行性腹泻的流行病学,紧接着分析了猪流行性腹泻的临床症状与病理变化,然后分析了猪流行性腹泻病毒的分离鉴定,并进行灭活免疫实验探究,希望能够为今后相关问题的研究提供一定的参考依据.     

小型鹅场鹅大肠杆菌病的诊治

2011年3月16日,我区一朗德鹅业养殖公司,全场共有鹅5800余只,其中种鹅4000余只,网上平养育雏鹅(23日龄)1800只中约有20%出现腹泻等症状,死亡34只,经临床症状、病理解剖和实验室检测,诊断为大肠杆菌感染,通过治疗,取得显著效果。(一)发病情况据调查,3月10日,育雏鹅群注射了重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-5株),3月11日,育雏鹅开始发病,到15日死亡34     

第2.3.4.4分支H5亚型高致病性禽流感病毒主要抗原位点分析

为了解第2.3.4.4分支H5亚型高致病性禽流感病毒主要抗原位点,本试验对A/chicken/Yunnan/1/2014与Re-5的HA1蛋白进行比较,对Re-5母本病毒的差异氨基酸位点进行突变,利用反向遗传技术构建重组病毒。用Re-5阳性标准血清进行HI试验,比较重组病毒与Re-5母本病毒的HI滴度,发现D61N、R69K、S145L、S149A、N171D、R178M、Q185R、K234Q、N256H、A279T、V281M、N289H等12个位点改变后导致HI滴度发生改变,是第2.3.4.4分支病毒的主要抗原位点。对2010-2012年第2.3.4.4分支的H5亚型高致病性禽流感病毒的HA序列进行分析,与Re5疫苗株HA1序列进行比对,进行点突变构建重组病毒,HI试验表明,Re5-2010、Re5-2011、Re5-2012、yn2014-Re5与Re5HI滴度分别相差了2,3,4,5个滴度,说明随着时间的推移,病毒变异越来越大。互相替换Re-5和yn2014的HA1或HA2,发现Re5-yn2014与Re5、yn2014-Re5与yn2014的HI滴度一致,说明其抗原位点主要在HA1蛋白区域。这些数据为深入了解该分支病毒的变异和对该病毒的防控提供了技术支持。     

酿酒葡萄4种病毒多重RT-PCR检测体系的建立

【目的】建立快速、灵敏的葡萄病毒多重RT-PCR检测体系。【方法】通过设计6对不同引物,在退火温度分别为48.0、49.0、50.0、51.0、52.0、53.0、54.0、55.0、56.0、57.0、58.0、59.0和60.0℃,采用单一RT-PCR技术检测酿酒葡萄6种常见的葡萄病毒,即葡萄病毒A(Grapevine virus A,GVA)、葡萄斑点病毒(Grapevine fleck virus,GFKV)、葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus,GFLV)、葡萄卷叶病毒1(Grapevine leafroll associated virus-1,GLRa V-1)、葡萄卷叶病毒2(Grapevine leafroll associated virus-1,GLRa V-2)和葡萄卷叶病毒4(Grapevine leafroll associated virus-4,GLRa V-4)。在此基础上,对退火温度相似、扩增片段长度不同的引物进行组合,建立能同时检测2种或2种以上病毒的多重RT-PCR检测体系。【结果】单一RT-PCR结果显示,退火温度为49℃、55℃和60℃时,可分别检测GVA和GLRa V、GLRa V和GFKV以及GFLV和GLRa V。多重RT-PCR结果显示,退火温度分别为49℃和55℃时,引物GVA和GLRa V-2以及引物GLRa V-1和GFKV组合所建立的2个多重RT-PCR检测体系可同时检测葡萄叶片中GVA和GLRa V以及GLRa V和GFKV。所检测的河西地区16份样品普遍携带葡萄病毒,部分葡萄样品同时携带两种病毒。其中,5份样品为GVA阳性,8份为GLRa V-1阳性,3份为GLRa V-2阳性,5份为GFKV阳性,所有样品均未检测到GFLV和GLRa V-4。退火温度分别为49℃和55℃时所建立的GVA和GLRa V以及GLRa V和GFKV两个多重PCR扩增体系检测结果与各样品单一PCR检测结果均一致。【结论】建立2套多重PCR检测体系,可同时有效地检测GVA和GLRa V-2或GLRa V-1和GFKV,可用于田间葡萄样品的快速检测。