3个山羊群体NPY-Y1R基因的多态性与繁殖性能

以贵州黑山羊、酉州乌羊和努比亚3个品种为试验群体,采用PCR产物直接测序技术检测NPY-Y1R基因的多态性,并探讨其多态性对山羊繁殖性状的影响,为山羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据。利用Excel计算基因频率、基因型频率;利用POPGEN软件计算遗传多态性参数纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量并对Hardy-wein-berg平衡状态进行分析;用SPSS软件对3个山羊群体NPY-Y1R基因多态性与产仔数进行相关性分析。结果表明,NPY-Y1R基因外显子中检测到1个单核苷酸多态性(SNP)位点,NPY-Y1R基因在外显子2处存在突变位点G1141A,3个山羊群体在此突变位点处均存在2种基因型,分别为AG、GG;贵州黑山羊、酉州乌羊和努比亚χ~2均未达到显著水平,处于Hardy-Wein-berg平衡状态,贵州黑山羊和努比亚表现为低度多态,酉州乌羊表现为中度多态。AG基因型个体在贵州黑山羊、酉州乌羊、努比亚群体中产羔数显著高于GG基因型个体(P0.05),呈现出AGGG趋势。AG基因型个体的山羊在后续的试验中待进一步认证,结果可为初步判定山羊NPY-Y1R基因的突变与繁殖性能的研究奠定试验基础。     

HXKs基因在香蕉果实后熟过程中功能初探

香蕉是世界主要水果之一,对乙烯非常敏感,属于呼吸跃变型果实。目前,香蕉果实后熟机理还未完全探明,后熟过程中己糖激酶(HXK)与乙烯的关系还不清楚。通过BLAST比对从香蕉基因组数据库中发现HXK基因家族的11个成员,经克隆获得这些基因的序列,并研究HXKs基因在香蕉果实自然后熟过程中的转录表达谱,重点研究乙烯利、甘露糖、NAG和1-MCP对HXKs基因表达、HXK酶活和内源乙烯生物合成的影响。结果表明:在香蕉果实后熟过程中HXKs基因呈现差异性表达,乙烯利上调大多数HXKs基因的表达和HXK酶活,1-MCP的作用正好相反,这表明外源乙烯正作用于HXK。另一方面,甘露糖加快内源乙烯生物合成,NAG却推迟内源乙烯生物合成,这说明HXK正作用于内源乙烯生物合成。所以,在香蕉果实后熟过程中乙烯和HXK之间存在相互促进的关系。这将为进一步阐明香蕉果实后熟机制提供理论依据,也将为香蕉果实保鲜新技术的挖掘提供新思路。     

解读酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮的影响因素

以酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮为例，通过对标本采集及其处理、测量前的物品准备、操作过程的影响因素、判读结果的分析等环节中注意事项的描述及分析，减少人为因素对实验的影响，提高检测的准确度。该文中部分内容在酶联免疫（ELISA）法测定食品中真菌毒素时是通用的，在食品卫生检测中会经常用到。     

羊传染性脓疱病毒疫苗株和野毒株VIR基因的比较分析

羊传染性脓疱(Orf)是由羊传染性脓疱病毒(orf virus,ORFV)感染引起的一种人兽共患传染病。VIR是ORFV编码的抗干扰素基因。为比较分析ORFV疫苗弱毒株和野毒株编码的VIR基因的特征,本试验扩增并测定了ORFV疫苗株和野毒株的VIR基因序列,比较分析了两者核酸水平和氨基酸水平的变异情况以及二、三级蛋白结构。结果表明:本次测定的ORFV疫苗株与野毒VIR基因核苷酸序列相似性为94.6%,氨基酸序列相似性为91.8%,两者在Z-DNA结合结构域和ds-RNA结合结构域均有突变。     

海洋真菌BH0531代谢产物对感染根结线虫黄瓜保护酶的影响

枝顶孢霉(Acremonium sp.)BH0531已被证实是一株对根结线虫具有较好防治效果的海洋真菌。为探究其对根结线虫和黄瓜的作用机制,以根结线虫侵染后的黄瓜为材料,在土壤中分别加入质量浓度为5、10、20、40 mg·m L~(-1)的BH0531发酵液40 m L,用等量清水作对照,测定了丙二醛、脯氨酸含量以及保护酶SOD、POD、CAT、PAL、PPO的比活力。结果表明,接种根结线虫30 d后,黄瓜叶片丙二醛和脯氨酸含量增加,发酵滤液能够显著降低其含量,能够有效缓解根结线虫对黄瓜植株造成的危害。SOD比活力显著提高,能够抵御活性氧带来的伤害;防御酶活力随时间动态变化,先升高后降低,POD、CAT、PAL和PPO比活力与未受根结线虫感染组对比均降低,但施用发酵液时,酶活力均显著提高,能够有效增强植株的抗性。     

NaCl和Na_2SO_4胁迫对大青山碱蓬幼苗保护酶活性的影响

以大青山碱蓬幼苗为试材,研究了NaCl和Na2SO4盐胁迫对大青山碱蓬幼苗含水量和保护酶活性的影响。结果表明,NaCl胁迫能促进大青山碱蓬幼苗含水量的增加,而Na2SO4胁迫则抑制其增加;NaCl和Na2SO4胁迫对大青山碱蓬幼苗中保护酶影响较大。盐分浓度较低时,为了抵抗盐分对植物造成的伤害,碱蓬体内的保护酶活性增加,但其保护酶系统的调节能力有限,当盐分浓度较高时,保护酶活性升高不足以弥补膜、脂过氧化所引起的伤害,酶活性下降,且在NaCl浓度为或Na2SO4浓度为150mmol·L-1时,保护酶活性达到极限。     

Development of Nucleic Acid Lateral Flow Immunoassay Detection Method for Foot-and-mouth Disease Virus

In this article, through the combination of nucleic acid probes and immune chromatography, a simple, sensitive and specific detection system——nucleic acid lateral flow immunoassay (NALFIA) for amplifing foot-and-mouth disease virus (FMDV) 3D RT-PCR products was established.An ultrasensitive nucleic acid biosensor (NAB) based on streptavidin-labeled gold nanoparticles dual labels and lateral flow strip biosensor (LFSB) were used in this system.The biotinylated goat anti-rabbit IgG was marked to the NC membrane as the alleged strip and the anti-digoxin antibody was labeled to the NC membrane to capture the digoxin probe.After assemblying gold-labeled strip and detecting RT-PCR products, the detection limit of NALFIA was 0.3×10^-3 to 3×10^-3 μg/μL.The NALFIA was compared with agar gel electrophoresis analysis, the results showed that the sensitivity of NALFIA was higher than agar gel electrophoresis.There was an excellent agreement between the two methods.NALFIA was a method with high sensitive, low cost and short time.In conclusion, this method provided a good alternative to detect FMDV.