Effect of protein kinase C signal pathway on resistin expression in 3T3-L1 adipocytes

AIM：To investigate the effect of protein kinase C on resistin expression in 3T3-L1 adipocytes.METHODS：The differentiated 3T3-L1 adipocytes were incubated with 50 nmol/L phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) or 5 μmol/L Ro-31-8220 for 24 h.Expression of resistin mRNA was detected by RT-PCR and expression of resistin protein was detected by Western blotting.RESULTS：Compared with control,PMA increased the expression of resistin mRNA and protein in 3T3-L1 adipocytes significantly (P<0.01),while Ro-31-8220 decreased the expression of resistin mRNA and protein in 3T3-L1 adipocytes obviously (P<0.01).CONCLUSION：Protein kinase C signal pathway may regulate resistin expression in 3T3-L1 adipocytes.     

苇状羊茅与多年生黑麦草内生真菌菌丝基因组DNA提取的优化及PCR初步检测

感染内生真菌的禾草在牧草和草坪业上具有重要的生态和经济意义，家畜采食感染Neotyphodium coenophialum和N.lolii的苇状羊茅和多年生黑麦草会发生中毒。本研究收集天津口岸1998年以来进境的部分苇状羊茅和多年生黑麦草种子，对经镜检确认带有内生真菌的种子进行分离培养，对疑似菌株的菌丝用改进的Moiler等方法进行基因组DNA抽提，测定浓度及纯度，对照原方法，DNA的纯度有较大提高，浓度略有上升。Tubulin2基因的引物IS1-IS3扩增结果显示为单一的条带，结合形态学和序列比对，分离培养得到的菌株可以基本确定为N．coenophialum和N。lolii。根据Genbank中N.coenophialum和N.lolii的NC25基因序列设计出引物F1-R1，扩增得到能区分开N.coenophialum和N．lolii的单一条带（相差160bp），建立了N．coenophialum和N．lolii的PCR检测方法，结果准确可靠。     

3株木霉(Trichoderma spp.)对华山松疱锈病菌锈孢子的破坏作用

从不同来源的茶藨生柱锈锈孢子堆和疱锈病枝干上分离获得3株木霉,室内生测结果表明,3株木霉的菌丝和培养滤液对锈孢子壁有较强的破坏作用;菌株TR2和TR3在锈孢子堆上生长速度快,锈孢子死亡率随孢子壁破坏率的增加而升高,锈孢子壁对孢壁降解酶有强烈诱导作用;TR1对锈孢子壁的破坏作用弱于TR2和TR3,但在PD培养液中有较强的产毒能力,锈孢子壁能抑制TR1菌株产毒。     

转rolA、B、C基因枳橙快繁技术

通过对转rol基因枳橙B、D、E系及对照的高接植株春梢茎段进行萌芽诱导、增殖及试管苗生根成苗的试验,摸索出适宜枳橙快繁各种培养基配方及培养条件。结果表明,以MS+6-BA1mg/L的培养基适合于芽萌发,以MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L的培养基适合于芽增殖,生根则以1/2MS+NAA0.5mg/L+0.2%活性炭的组合最佳,转基因各系生根率均在93.3%以上,显著高于对照生根率(66.7%)。快繁苗移栽成活率可达90%,目前生长良好。     

维生素C的生物合成及其基因调控研究进展

维生素C是维持生物正常生长发育必需的一类微量营养物质,水果是人类维生素C营养的重要来源,而不同水果中的维生素C含量相差很大,因此克隆植物中维生素C合成的相关酶基因,对维生素C含量低的水果进行基因改良,具有重要意义。根据有关文献对植物中维生素C的合成途径,相关酶基因的克隆以及应用生物技术的方法对维生素C含量进行遗传改良进行了综述。     

西瓜柱头ATP酶活性及分泌活动研究

用光学显微镜和电子显微镜研究了西瓜柱头结构、ATP酶活性和分泌活动。结果表明,柱头属于湿柱头类型,最外层是乳突细胞,内层为薄壁组织。授粉后10min,乳突细胞质膜和胞间连丝上ATP酶活性强;30min后,质膜上ATP酶活性极弱,但液泡膜上有很强的ATP酶活性;授粉1h后,ATP酶活性很难检测到。分泌活动始于开花前1d;开花后,授粉的柱头分泌活动急剧增强,授粉10min后分泌物最多,30min后不再产生新分泌物;1h后,细胞解体;24h后分泌物变干燥;未授粉的柱头分泌活动没有激增过程。     

根瘤菌与三种化肥配合施用对花生生长的影响

在鄂东地区选择8个花生种植地作为田间试验点,研究了花生根瘤菌与氮、磷、钼化肥混合施用时对花生营养生长和生殖生长的影响.结果表明:在鄂东8个试验点,花生接种根瘤菌后生长受到明显影响,其株均鲜重和667m2产量分别增加27.9%和11.1%;接种根瘤菌后再混合施用3种化肥,还能对花生生长产生积极效应.     

H9N2亚型禽流感病毒传播途径特性的比较及其表面基因序列分析

选择中国大陆最早分离的H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)A/Chicken/Guangdong/SS/94(H9N2)(缩写为SS株)和1998年大流行时期分离的H9N2亚型AIVA/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)(缩写为F株)为研究对象,对其在SPF鸡体内的复制能力和传播途径特性比较后发现,F株在4周龄SPF鸡气管中的复制能力高于SS株,F株可以经气溶胶传播途径传播,SS株不能经气溶胶传播途径传播;利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获取F株和SS株的HA和NA基因的cDNA,序列分析得知,F株和SS株的HA和NA基因的同源性分别是96.6%和98.1%;HA基因的裂解位点氨基酸序列都是PARSSR↓GL,但有5个氨基酸的差异,即166位N(F)→D(SS)、198位A(F)→V(SS)、217位V(F)→I(SS)、335位G(F)→R(SS)、504位L(F)→S(SS);2株病毒的NA基因在63~65位都存在氨基酸缺失,但在NA基因红细胞吸附位点的氨基酸序列不同,分别是IKKDSRSG(F)和IKEDLRSG(SS)。F株和SS株的传播特性差异是否与其表面基因序列有关,有待进一步研究。     

禽流感病毒H5亚型主要保护性抗原在禽痘病毒中的高效表达

将H5亚型禽流感病毒血凝素HA基因克隆入插入载体pllS中获得重组转移质粒p11SH5A,通过酶切鉴定获得了预期的转移质粒p11SHSA,将质粒p11SHSA和野生禽痘病毒(wtFPV)共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),通过蓝白斑筛选纯化得到重组病毒rFPV-11SH5A.以间接免疫荧光法证实,HA基因得到了表达.将该重组病毒rFPV-11SH5A以10(5)PFU/只免疫7日龄SPF鸡,于7、10、14、18、21d分别采血分离血清检测HI抗体,于免疫21d后用10(5)ELD50的野生病毒进行肌肉注射观察疫苗保护率.结果表明,该疫苗能提供100%的保护.     

粉碎粒度对粗蛋白测定结果的影响

将同一饲料样品按4分法缩分为3份，1份按GB／T6432-94制备样品，另2份过20目和40目筛片粉碎制备样品，按姜懋武提出的改进方法测定粗蛋白（CP），研究样品的粉碎粒度对CP测定结果的影响。结果表明，不同粉碎粒度制备样品测定的CP结果，不同饲料样品间没有表现出相同的规律。在测定的11个样品中，只有3个样品（仔猪前期颗粒料、生长育肥猪浓缩料和肉用仔鸡后期颗粒料）的CP测定值不受粉碎粒度变化的影响（P〉0．05），其他8个样品的CP测定值均受饲料粉碎粒度的影响（P〈0．05或P〈0．01），但不同品种间表现的规律不尽相同。玉米、小麦和大豆等籽实类饲料原料，除玉米20目和40目间无显著差异外，其余不同粉碎粒度间均表现出差异极显著。饼粕类饲料原料中，豆粕与棉粕60目组极显著高于20目和40目组，20目和40目组间差异不显著；花生粕与菜粕20目组显著高于40目和60目组。肉用仔鸡后期浓缩料40目和60目极显著高于20目，40目和60目间差异不显著。