猪流行性腹泻病毒实时荧光RPA等温检测方法的建立

为建立一种简单、快速的猪流行性腹泻病毒（PEDV）分子检测方法,本研究基于PEDV病毒M基因保守序列,设计一系列扩增引物及其荧光探针,以包含PEDV病毒M基因片段的pUC57质粒为模板,同时以包含猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）及古典猪瘟病毒（CSFV）等病毒膜蛋白或核衣壳蛋白基因序列的质粒作为对照,建立了一种PEDV实时荧光重组酶聚合酶扩增（RPA）等温检测方法,测定了方法的特异性与敏感性。结果表明,该实时荧光RPA方法可在39℃恒温反应20 min特异性扩增PEDV病毒M基因,与TGEV、PRRSV等对照病毒基因无交叉反应,其检测限为10拷贝/μL。应用该实时荧光RPA方法可有效检测出血浆及血浆蛋白粉中的PEDV核酸。本研究建立的实时荧光RPA检测方法简单、快速、灵敏度高,可为PEDV的检测防控提供一种新的、可靠的技术支持。     

犬瘟热的诊治

犬瘟热是一种由犬瘟热病毒引起的犬科动物急性传染病,病犬以双相热、鼻炎、严重的消化障碍和呼吸道炎症为特征。主要对该病的病原、流行病学、临床症状及病理变化等作一阐述,并以一例犬瘟热典型病例的诊治为例,介绍了治疗该病的有效措施,以期为有效防治犬瘟热提供参考。     

Bluetongue: Laboratory diagnosis

Definitive diagnosis of bluetongue virus (BTV) infection, often subclinical in domestic and wild ruminant relies heavily on laboratory techniques for BTV isolation and demonstration of BTV antigens, viral nucleic acids and antibodies. The virus can be isolated from blood components, mainly the erythrocyte fraction, collected from affected animals during the period of febrile response. Semen collected from male animals at the peak of viremia and tissues from affected animals and fetuses may also be used for BTV isolation. The primary procedure for BTV isolation is inoculation of embryonated chicken eggs with a subpassage onto cell cultures (e.g. BKH-21, Vero cell lines). In addition to the conventional techniques such as fluorescent antibody staining and virus neutralization procedures for sero-grouping and serotyping of BTV isolates, immunohistochemical, immunoenzymatic and immunoelectron microscopic techniques, using monoclonal antibodies (MAb), offer more rapid, specific and sensitive approaches for BTV identification and antigen detection. The progress of molecular biology, especially the development of genetic probes for hybridization analysis and polymerase chain reaction techniques for detection of BTV nucleic acids hold the promise of most efficient diagnostic assays. Among the various serogroup-specific assays for antibody detection, the agar gel immunodiffusion (AGID) and competitive (C) ELISA are the most widely used tests. Because of its limitations (i.e. anticomplementary serum and complexity of the procedure) the complement fixation (CF) test is virtually abandoned and is used in only a few laboratories. Although the AGID test is simple to perform and rapid, it is not highly sensitive or quantitative and has limitations in its specificity. Sera containing antibodies to other group of Orbiviruses (e.g. epizootic hemorrhagic disease) may result in non-specific reaction in the AGID test. Among several ELISAs that have recently been developed, the C.ELISA in which a group-specific MAb to BTV is used, has proved to be the most sensitive and specific assay for detection of antibodies to BTV. Following extensive national and international validation, the C.ELISA is gradually replacing the AGID as a universal test to certify ruminants for trade purposes and to diagnose BT infection in domestic and wild animals. The cell culture-based microtiter serum neutralization (MTSN) is the most commonly used assay for the detection of serotype-specific antibodies to the recognized BTVs in animal sera. The MTSN may be used to type virus isolates and also to monitor animal population for specific serotypes of BTV in epidemiological investigations.     

鸡马立克氏病的临床及病理学诊断

近年来，许多经MD疫苗免疫的鸡场，陆续发生以马立克氏病症状死亡的鸡只。本次该鸡场发生的疫情比较严重，通过临床和病理学检查，确诊死于马立克氏病。根据最新研究资料认为，发病的原因与疫苗的接种时间有关。     

一起猪非典型瘟病毒感染的诊断

2017年8月四川省某规模化猪场出现临产母猪产弱子、发抖、死胎,且死胎率达30%,哺乳仔猪成活率明显降低,其中以全身性或局部性阵发痉挛为典型症状。用RT-PCR扩增及序列分析确诊该猪场感染了一种新型的猪非典型瘟病毒(APPV)。这是四川省首次检测到并报道APPV,可为该病的研究和防控提供了一定的参考。     

猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是最近 2 0年来才发展起来的一种新的猪病 ,然而它给许多国家的养猪业带来了灾难性的经济损失。 2 0世纪 90年代晚期 ,我国也有暴发该病的报道。为了加强进口检疫以及防止该病的传播 ,目前最主要的是提高对该病的诊断和防制水平 ,文章就有关该病的病理变化 ,诊断方法的研究进展进行了综述     

新城疫病毒分子生物学最新研究进展

新城疫病毒（NDV）是一种严重危害养禽业的重要病原。本文就对NDV的分子生物学特征、结构蛋白及其功能、NDV的致病本质、分子诊断技术和疫苗研究等方面进行了较为详尽的综述。     

牛环形泰勒虫病二温式PCR诊断方法的建立及初步应用

为建立特异、敏感、快速的二温式PCR诊断方法,根据牛环形泰勒虫裂殖子表面抗原(tams1)基因,设计了一对特异性引物,扩增出大小为154bp基因片段,经克隆、测序分析,与已知基因序列的相似性为96%。用建立的牛环形泰勒虫病二温式PCR诊断方法,对从新疆牛环形泰勒虫病流行地区采集的50份全血样品进行诊断,阳性率为88%,而血涂片检出的阳性率只有58%。经试验验证,该方法具有特异性高、敏感性强、重复性和稳定性好等优点。表明本试验所建立的二温式PCR诊断方法可用于牛环形泰勒虫病的临床诊断、隐性感染检测和流行病学调查。     

动物脑多头蚴病研究进展

脑多头蚴病是由多头绦虫的幼虫寄生于家畜所引起的疾病,人也可感染,但相对较少。该病通常对动物是致命的,给世界许多地区的养殖业造成了巨大的经济损失。论文主要介绍了不同药物对该病的疗效,以及脑多头蚴不同抗原成分免疫原性、分子分类和相关抗原基因的研究进展。     

肇庆地区作物病虫害辅助诊治网络系统的构建与应用

在调查、研究肇庆地区农作物病虫害发生特点、辅助诊断与防治方法的基础上,以软件工程理论、LUBAN模型为基本方法及以ASP SQL SERVER为开发工具,研究构建了肇庆地区作物病虫害辅助诊治网络系统并进行初步运行,结果表明,该系统是一个针对肇庆地区农作物病虫害进行辅助诊治以及相关信息浏览、查询和编辑的网络型农业专家系统,可为肇庆及周边地区的农户提供农作物病虫害远程诊治及信息浏览与查询服务,具有良好的应用前景.