哺乳动物腔前卵泡卵母细胞的研究进展

本文简要回顾了哺乳动物腔前卵泡卵母细胞的研究历史，重点讨论了有关理论及方法学问题。     

不同激素对牛卵母细胞体外成熟的影响

对比了促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和17β雌二醇(17β-E2)在相同浓度条件下,分别使用时对牛卵母细胞体外成熟的促进能力。结果表明:这3种激素单独使用时,都具有促进牛卵母细胞体外成熟的能力,但在实验设定的同一浓度下,FSH组牛卵母细胞体外成熟率最高,LH次之,17β-E2最差。     

哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展

综述了近年来关于哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存的研究进展,并对这项技术的发展前景进行展望。重点讨论了影响哺乳动物卵母细胞玻璃化冷冻保存的几种因素,包括冷冻保护剂的种类和浓度、冷冻方法和卵母细胞所处的发育阶段等,以及冷冻过程中细胞膜、微丝、微管、皮质颗粒、纺锤体和线粒体等出现的损伤。目前,玻璃化冷冻法存在的最主要问题是冷冻过程中造成超微结构不可逆转的损伤影响胚胎发育,亟待解决。     

犬繁殖生物技术概述

繁殖生物技术,亦称人工辅助繁殖技术(Assisted repro- ductioive technique;ART)。人工授精(Artificial insemination;AI)、胚胎移植(Embryo transfer,ET)以及所有围绕配子和胚胎进行的操作技术都属此范畴。本文对犬的繁殖生物技术进行概述,主要集中在胚胎、精液冷冻保存、人工授精(AI)、卵母细胞体外成熟(In vitro maturation;VM)、体外受精(In vitro     

家兔原始卵泡卵母细胞体外发育的培养体系研究

本研究根据家兔卵巢的发育特征初步探讨了家兔卵巢卵母细胞体外发育的培养体系。采集新生或30日龄家兔卵巢在不同培养液中培养,并分析家兔卵母细胞的体外发生与成熟情况与体内正常发育的兔卵巢卵母细胞之间的差异,来筛选和优化家兔卵巢卵母细胞的体外培养体系。本试验从高糖DMEM、FSH浓度、BSA/血清等3个方面来筛选较好的培养条件,结果表明:①不添加高糖DMEM的M199培养液与添加的相比,卵巢上卵母细胞数量要多,但随着培养时间的延长,组织块上卵母细胞的形态会变得不清楚;②家兔卵巢组织在FSH浓度为50和100m IU/m l、添加血清的DMEM/F12培养液中生长较好,体外培养24d后,卵母细胞数量多,直径增加到65μm;③与添加BSA的培养液相比,添加血清的培养液中的卵巢卵母细胞生长状态较好,体外培养28d后,卵母细胞数量多,并且直径可达65μm。     

卵母细胞体外成熟与体细胞核移植

众所周知,体细胞核移植中体细胞必须在去核的卵母细胞内进行重编程,以恢复其全能性,而卵母细胞的成熟程度则会直接影响体细胞的重编程过程。所以卵母细胞的体外成熟,作为体细胞核移植过程中的一个关键环节而为人们所关注。哺乳动物在胎儿出生前后就形成了一定数量的卵母细胞,在胎儿时期,卵巢内有相当数量的由原生殖细胞形成的卵原细胞,卵原细胞进一步形成初级卵母细胞(此期又称为GV期),此时卵母细胞生长极不明显可持续几个月到几十年。性成熟后,卵母细胞进入迅速生长阶段,形成大量卵黄,积累各种营养物质,完成了卵质的分化,合成储存了胚胎早…     

山羊卵母细胞体成熟培养条件的研究

从山羊屠宰场收取卵母细胞，置于39％、5％CO2的培养箱中，作24小时体外成熟培养。在含10％犊牛血清(FCS)的成熟培养液里分别添加0％、20％~N卵泡液，试验结果表明，成熟卵母细胞率分别为54．5％、66．7％，差异不显著。在成熟培养液里添加不同血清，即10％犊牛血清(FCS)和羊血清(NGS)，试验结果表明，成熟卵母细胞率分别为54．5％、65.4％，差异不显著。     

激活方法对水牛卵母细胞孤雌发育的影响

系统探讨了几种激活方法对水牛卵母细胞孤雌发育的影响。体外成熟 (IVM) 2 6 h的水牛卵母细胞经 7%乙醇(EH)、钙离子载体 (A2 3187)或离子霉素 (Ion)激活处理 5 min后 ,在 2 m mol/ L 6 -甲二氨基嘌呤 (6 - DMAP)中培养 3～4 h,然后再继续培养 6～ 11d,观察其胚胎发育情况。结果发现 ,5μmol/ L Ion激活处理的水牛卵母细胞分裂率显著高于 EH处理的卵母细胞 (6 3.0 % vs5 4 .2 % ,P<0 .0 5 ) ,其原核形成率也显著高于 EH处理的卵母细胞。激活处理前 ,无Ca2 培养液孵育时间的长短 ,对水牛卵母细胞孤雌发育无显著影响 (P>0 .0 5 )。如用 A2 3187激活处理水牛卵母细胞 ,其激活分裂率则随着浓度的升高而提高。从而表明 ,5 μmol/ L Ion可有效激活水牛卵母细胞     

牛不同直径卵泡内卵母细胞体外受精后的卵裂率和染色体异常分析

将不同直径牛卵泡内卵母细胞体外成熟培养22h后，对其体外受精后的卵裂率，胚胎发育速度和胚胎染色体异常发生率进行了研究。结果表明，体外受精后48h，直径3－6mm卵泡内卵母细胞外受精后的卵裂率明显高于直径1－2mm和7－10mm卵泡内卵母细胞体外受精后的卵裂率（P＜0．05）。体外受精后48h，直径3－6mm包泡内卵母细胞体外受精后的胚胎的发育速度明显快于直径1－2mm和7－10mm卵泡组胚胎（P＜0．05）。通过对不同卵裂期胚胎的染色体标本分析表明，直径1－2mm卵泡内卵母细胞体外受精后的胚胎染色体异常发生率明显高于直径3－6mm卵泡组（P＜0．05），但与直径7－10mm卵泡组之间无显著性差异。