农杆菌介导的药用植物遗传转化

利用根癌农杆菌、发根农杆菌介导药用植物的遗传转化。对转化过程中转化方法及转化后的鉴定、影响植物遗传转化的因素与次生代谢产物以及转基因药用植物的获得等方面进行综述。     

芹菜愈伤组织转化的研究

芹菜(Apium graveolens L.)外值体能被含Ti质较载体的根癌农杆菌感染,目前已得到转基因的愈伤组织.该载体带有一个嵌合的npt-Ⅱ(新霉素磷酸转移酶Ⅱ)基因和一个胭脂碱合成酶基因.经胭脂碱测定和DNA分子杂交实验表明,外源的卡那霉素抗性基因已导入芹菜细胞.     

甜椒Ti+离子注入相关诱变育种效应研究

进行了Ti+离子注入甜椒诱变相关育种效应的研究。结果表明,低能Ti+离子注入后能引起甜椒形态特征的变化,其中在小剂量时表现为改善植物的生长发育状况,促进生长与分枝;在大剂量时表现为突变株增加诱发新变异。另外离子的注入引起叶片中Na、Mg、K、Ca、Si等元素含量下降,Al、Fe的含量上升。     

溶胶-凝胶法在金刚石表面涂覆纳米TiO2薄膜

通过溶胶-凝胶法制备二氧化钛溶胶，采用浸渍的方法在工业金刚石表面涂覆TiO2薄膜，扫描电镜和能谱分析结果表明，该方法可以在金刚石表面涂覆TiO2薄膜，薄膜将金刚石磨料包裹完全，红外光谱分析显示TiO2与基体金刚石表面形成稳定的Ti-O-C化学键．综合热分析对金刚石抗氧化性能检测结果为：涂膜金刚石较未涂膜金刚石抗氧化温度提高100℃。     

野生型农杆菌Ti和Ri质粒对马铃薯的双转化研究

用不同的野生型根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）T37，B6，TFA16YE和发根农杆菌（Agrobacteriu．rhizogenes）TR105，15834，A4对马铃薯普通栽培种品种“甘农薯1号”的块茎圆片、茎段采用两步侵染法和一步侵染法进行了双转化实验。结果表明：两步侵染法效果较好，并得到了分化苗。试验证明，Ti和Ri质粒上的T-DNA可进入同一个受体细胞并进行表达，2种T-DNA上的不同激素在受体细胞中表达可以使受体细胞建立新的激素平衡，从而提高了转化细胞分化苗的能力，可以克服野生型农杆菌难以分化苗的缺点，为今后用野生型质粒作载体以及同时向一个受体细胞中转移多个基因打下了基础；此外不同菌种组合的效果不同，分化植株的形态差异也很大；试验还发现，T-DNA在整合到受体细胞染色体上时，可以引起某些基因发生突变。因此，今后只要用双转化法能使野生型农杆菌双转化的细胞分化出正常植株，则野生型农杆菌就可以作为一种重要的诱变源为育种提供较多的变异。     

Ti质粒介导的B、t、k-δ内毒素蛋白基因转化大豆的初步研究

以Ｔｉ质粒为介导，将ｐＫＴ５４Ｂ７Ｃ５质粒上的Ｂ、ｔ、ｋ－δ内毒素蛋白基因导入东北大豆“黑农３７”、“黑农３９”等品种。采用多种外植体和感染方法，从胚轴和子叶节诱导出丛生芽与再生植株。经卡那霉素筛选和冠瘿碱检测，初步证明外源基因导入大豆基因组中。共获得８１株再生植株，其中成活３０株，仅３株结７个荚，得到７粒种子。ＰＣＲ检测和ＤＮＡ分子杂交，鉴定这７株再生植株呈阳性反应，证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组中。７粒种子均已萌发，植株生长发育正常