赤霉素高产菌株筛选及发酵条件优化

以15株产赤霉素的藤仓赤霉菌(Gibberella fujikuroi)为出发菌株,对其脂肪酶活性、制霉素抗性、固态发酵效率进行了比较分析,以期选育出赤霉素发酵生产的优良菌株。结果表明:筛选出2株遗传稳定性好、生产效率高的菌株GA-YJ1704、GA-YJ1715,其发酵效价分别为4.67、4.77 g·kg^-1(干基)。该研究结果对赤霉素固态发酵生产的实现具有重要意义。     

高产海藻糖突变菌株YUV3海藻糖合酶基因克隆及原核表达

海藻糖合酶(Trehalose synthase,TreS)属于α-淀粉酶家族(α-amylase family),是生物体内通过TreS途径生成海藻糖的一种酶类。利用PCR技术,从本试验室筛出的高产海藻糖突变菌株YUV3中扩增了海藻糖合酶基因(TresY),将其克隆到原核表达载体pET-28a(+),得到重组质粒P-TresY,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,重组蛋白经SDS-PAGE分析,得到一条分子量约为110kDa的特异条带,并经Western blotting分析鉴定,表明成功构建重组质粒P-TresY并在大肠杆菌中表达,为进一步的研究奠定基础。     

代料栽培平菇应遵循哪些原则

众所周知，在食用菌栽培领域，棉子壳是栽培多数食用菌的首选原料。菇农之所以喜欢使用棉子壳作为食用生产的主要原料，是因为棉子壳所含营养比较全面，吸水性强，透气性好，便于发菌出菇，产量高。然而，自2008年以后，我国棉花种植面积和产量不断减少，棉子壳价格一路上涨，到2011年春，棉子壳的进价已高达2500元／t。由于棉子壳价格飞涨，再加上菌种、人工等费用，     

限制性内切酶的命名和书写

限制性内切酶主要是从原核生物中提取的。现在通用的命名原则是:第一个字母是细菌属名的首字母,第二、三个字母是细菌种名的前二个字母,这些字母都要求斜体;如果同一生物种内又分为不同的血清型和菌株,其菌株名称的第一个字母用正体,并放在第三个字母后面。比如限制性内切酶HincⅡ     

自然发酵豆豉曲中产AMP脱氨酶菌株的筛选及其产酶条件研究

[目的]筛选能高产AMP脱氨酶的野生菌株,并对该菌株进行菌种鉴定和发酵条件优化.[方法]通过大豆的自然发酵制备豆豉曲,并分别以PDA、MRS和YPD 3种培养基进行豆豉曲中微生物的分离纯化,将获得的分离菌株进行液体发酵培养,并检测发酵液的AMP脱氨酶活力.[结果]试验通过3种培养基分离纯化,获得纯种菌株51株.通过进一步的摇瓶发酵培养,检测到具有AMP脱氨酶活性的菌株为16株,选取活性最高的DCP-23菌株进行菌落形态和菌丝形态分析,初步鉴定该菌株为青霉菌属.通过摇瓶发酵条件优化,确定该菌株产酶的适宜发酵条件为：培养基初始pH为6.0,接种量为6％,30℃发酵60h.在上述发酵条件下,发酵液中的AMP脱氨酶可达到293.7 U/ml.[结论]试验获取了1株能产较高活性AMP脱氨酶的野生青霉菌株DCP-23,可为高产AMP脱氨酶的菌株研究提供参考.     

蛹虫草Fjnu-01菌株发酵液及菌丝体干粉对果蝇寿命的影响

[目的]明确蛹虫草发酵液及菌丝体干粉对果蝇寿命的影响效果,为研发蛹虫草抗衰老食品提供理论依据.[方法]分别采用低(0.5％)、中(1.0％)、高(1.5％)剂量蛹虫草Fjnu-01菌株发酵液及发酵菌丝体干粉喂养果蝇,以最高寿命、平均寿命及寿命延长率3个指标评价其对果蝇寿命的影响.[结果]蛹虫草Fjnu-01菌株发酵液及菌丝体干粉均能极显著提高果蝇的平均寿命和最高寿命(P＜0.01).当发酵液添加量为1.5％时,对雌、雄性果蝇的寿命延长率最高,分别为79.09％和74.86％;当菌丝体干粉添加量为1.5％时,对雌、雄性果蝇的寿命延长率也最高,分别为71.18％和68.57％.[结论]蛹虫草Fjnu-01菌株发酵液及菌丝体干粉对果蝇寿命均有极显著的延长作用,且发酵液对果蝇的寿命延长效果优于菌丝体干粉,蛹虫草Fjnu-01菌株发酵液及菌丝体干粉对雌性果蝇的寿命延长效果优于雄性果蝇.     

固态发酵法生产大豆多肽的初步研究

以豆粕粉为原料,以大豆多肽转化率为指标对固态发酵生产条件进行了优化,并对获得的13株蛋白酶产生菌株进一步筛选。结果表明:最佳发酵条件为基质含水量40%,接种量1%,初始pH值6.5,发酵时间120 h,发酵温度28℃;各菌株对蛋白含量无明显影响,但蛋白水解度存在较大差异,其中米曲霉(Aspergillus oryzea)1001和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵后大豆多肽含量可高达26.44%和25.46%。     

鸡腿菇高产栽培技术研究

鸡腿菇是一种营养保健价值较高、市场前景广阔的珍稀食用菌。该试验主要从品种选择、原料配方、栽培模式几个方面研究了鸡腿菇栽培新技术。结果表明：鸡腿菇菌株特白33和特白39产量高,品质优,适合在安庆地区栽培推广。在栽培配方上,用部分稻草代替棉子壳栽培鸡腿菇,可充份利用当地丰富的稻草资源,降低生产成本,增加经济效益。在栽培模式上,室内箱栽模式优于室外袋栽模式,是鸡腿菇栽培的未来发展方向。     

海洋放线菌BH3A8代谢产物杀线虫活性研究

植物寄生线虫的危害日趋严重,利用生物防治技术是控制线虫危害的研究重点。对从渤海海域不同深度水样中筛选出的具有杀线活性的菌株BH3A8代谢产物进行研究,测定了BH3A8代谢产物杀线虫谱和对南方根结线虫的温室防效以及对松材线虫形态与运动频率的影响。结果表明,BH3A8代谢产物对南方根结线虫幼虫毒力最强,对松材线虫幼虫毒力次之,对大豆孢囊线虫幼虫毒力最弱。在温室测定中活性菌株发酵液对南方根结线虫防治效果为73.75%。活性菌株代谢产物明显抑制松材线虫运动频率。中毒线虫起初表现为虫体扭曲、颤抖、痉挛,接着线虫游动缓慢、扭动身躯,最后线虫反应迟钝,摆动减慢,首尾同侧展开,标志着线虫死亡。虫体死亡多为僵直状态。BH3A8杀线虫谱广、效果好、使用成本低,在生产上具有很好的应用前景。     

Establishment of Kinetics Models for Batch Fermentation Process of β-mannase with Bacillus licheniformis HDYM-04

In order to improve the yield of β-mannase and to investigate the rules of fermentation production, a high-yield β-mannase producing strain, Bacillus licheniformis HDYM-04, was used to investigate the kinetics models based on the optimal fermentation conditions： HDYM-04 strain was fermented at 37℃ for 30 h with agitation speed at 300 r/min and aeration rate at 3 L/min in a 5 L fermenter, the initial addition amount of konjac flour was 2%（w/v）, the initial pH of medium was 8.0, and the inoculum concentration was 6.7%（v/v）. Three batch fermentation kinetic models were established （cell growth kinetic model, substrate consumption kinetic model, product formation kinetic model） bases on Logistic and Luedeking-Piret equations. To be specific, cell growth kinetic model was dX/dt =0.431X （1- X/ 15.522 ）, substrate consumption kinetic model was -ds/dt =1.11 dX/dt ＋0.000 2 dP/dt ＋0.000 8X, and product formation kinetic model was dP/dt=133.1 dX ＋222.87X. The correlation coefficients R^2 of the three equations were 0.990 21, 0.989 08 and 0.988 12, respectively, which indicated a good correlation between experimental values and models. Therefore, the three equations could be used to describe the processes of cell growth, enzyme synthesis and substrate consumption during batch fermentation using B. licheniformis strain HDYM-04. The establishment of batch fermentation kinetic models （cell growth kinetic model, substrate depletion kinetic model, product formation kinetic model） could lay the theoretical foundation and provide practical reference for the applica- tion of HDYM-04 in fermentation industry.