RNA干扰机制及应用研究进展

RNA干扰是外源和内源的双链RNA(double-strand RNA,dsRNA)特异性诱导生物体内同源靶基因mRNA的降解,从而导致转录后基因沉默的现象。目前对于RNA干扰机制已有深入研究,同时RNA干扰在抑制有害基因表达、功能基因组学及基因治疗等方面的应用研究也取得了较大进展。现主要综述了RNA干扰的作用机制、作用特点和技术应用等方面的研究进展。     

花生壳总黄酮提取工艺优化及其抑菌活性研究

采用醇提法探索花生壳中总黄酮的最佳提取工艺,并研究其抑菌活性。结果表明:花生壳总黄酮的最佳提取工艺为乙醇溶液浓度80%、提取温度80℃、提取时间3.0 h、料液比1 g∶20 m L,各因素对总黄酮得率的影响由大到小依次为提取温度、乙醇溶液浓度、料液比、提取时间;验证试验表明,最佳提取工艺下花生壳总黄酮得率为0.618%;抑菌试验表明,花生壳总黄酮对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌具有一定抑菌作用,且其抑菌效果远优于山梨酸钾。     

谷胱甘肽对小麦幼苗铜毒害的缓解作用及其与氮、硫、磷积累的相关性

采用水培法,对外源谷胱甘肽（GSH）缓解小麦幼苗铜毒害及其与氮、硫、磷等元素积累的相关性进行了研究。结果表明,Cu处理（T0组）显著抑制小麦幼苗的生长发育,导致根长、茎叶长、生物量、叶绿素和类胡萝卜素含量以及氮元素积累量下降,诱导了植株蛋白质、内源GSH含量以及硫、磷元素积累量上升。随施用外源GSH浓度的升高,GSH处理（T1、T2、T3组）的小麦幼苗茎叶长、根长、生物量,叶绿素a、b和类胡萝卜素含量、蛋白质含量先上升后下降,内源GSH含量以及氮、硫、磷等营养元素积累量持续上升;其中,T2组小麦幼苗的各项指标与T0组差异均达到显著水平（P〈0.05）,与对照组（CK）无显著差异。外源GSH促进了植株对铜离子的吸收、转运和积累,而外源和内源GSH均与铜胁迫下小麦幼苗氮、硫、磷等营养元素的积累呈极显著正相关（P〈0.01）,其中以T2处理组缓解小麦幼苗铜毒害的作用最显著。     

热应激对肉仔鸡肉品质及抗氧化能力的影响

为探讨热应激对AA肉仔鸡肉品质及抗氧化能力的影响,试验选用35日龄体重相近的健康AA肉仔鸡（公）120只,随机分成2组,一组高温组（34℃）,一组为适温组（21℃）,每组5个重复,每个重复12只。试验期为7 d。结果表明：高温应激组胸肌和腿肌pH值显著低于适温对照组（P ＜0.05）,滴水损失显著高于适温对照组（P ＜0.05）,但两试验组间剪切力无显著差异（P＞0.05）。高温应激组胸肌超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性均低于对照组,且差异显著（P＜0.05）;GSH-Px活性两试验组间无显著差异（P＞0.05）。同时与对照组比较,高温可显著降低腿肌SOD、CAT和GSH-Px活性（P＜0.05）。高温应激组胸肌和腿肌MDA水平显著高于对照组（P＜0.05）。由此可见,热应激可使AA肉鸡肉品质下降,肌肉氧化程度增加,抗氧化能力降低。     

桑褐斑壳丰孢菌pmcamk基因的克隆与表达时相分析

钙/钙调素依赖性蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent protein kinases, CAMK)作为钙信号途径中的关键蛋白,在多种细胞过程中发挥重要作用。以桑褐斑壳丰孢菌(Phloeospora maculans)为研究对象,利用反转录PCR结合RACE技术克隆桑褐斑壳丰孢菌(Phloeospora maculans)钙/钙调素依赖性蛋白激酶基因pmcamk的序列全长,利用荧光定量PCR技术,研究pmcamk在桑褐斑壳丰孢菌侵染宿主后不同时期以及其分生孢子在水中萌发过程中的表达模式,以期深入了解桑褐斑壳丰孢菌Ca²⁺信号转导途径与孢子萌发之间的关系。结果表明,pmcamk的cDNA序列全长为1 422 bp,由1 221 bp的开放阅读框和201 bp的3′非翻译区组成,GenBank登录号为MK713976。pmcamk开放阅读框共编码406个氨基酸残基,蛋白质分子质量约为45.5 kD,等电点为6.28。系统进化树分析表明桑褐斑壳丰孢菌与小麦叶枯病菌的CAMK同源性最高,属于CAMKⅠ类群并且聚类在同一进化分支。在桑褐斑壳丰孢菌...     

微山湖水域重金属分布特征及水质评价

2010年4月对山东微山湖6种重金属分布特征进行研究,结果表明,Cu、Zn、Pb、Cr、Ni、Cd平均含量分别为0.035 9、0.148 0、0.112 0、0.038 0、0.040 0、0.003 7 mg/L;总体表现为运河区>河口区>养殖区。相关分析表明,6种重金属含量具有较强的相关性。逐步回归分析发现,不同重金属受总悬浮物、有机悬浮物、无机悬浮物的影响程度存在较大差异。对微山湖重金属污染现状进行分析表明,Cu、Pb、Zn、Ni、Cd、Cr平均超标倍数分别为2.59、1.35、0.61、0.07、0.02、0倍;超标率分别为100%、60%、70%、20%、20%、0;微山湖重金属污染达到重度污染水平,Cu、Pb为主要的污染元素。     

牛催乳素基因及其单核苷酸多态性与产奶性状关系的研究进展

SNPs是目前遗传标记研究的一大热点,牛催乳素(prolactin,PRL)基因是与产奶性状相关的重要候选基因。PRL基因上的SNPs与牛的产奶量、乳脂量、乳蛋白量、乳脂率、乳蛋白率等性状存在某种关联,可用于牛的标记辅助选择(MAS)育种。笔者从PRL的结构与功能、基因的定位及作用机制、PRL上的SNPs与产奶性状关系的研究等几个方面进行了综述。     

4种改良CTAB法提取石榴成熟叶片DNA的比较研究

【目的】研究从成熟石榴叶片中提取高质量基因组DNA的方法。【方法】根据成熟石榴叶片组织中富含多酚、多糖的特点,以峄城中国石榴种质资源圃20种石榴成熟叶片为材料,分别采用改良CTAB法(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)4种方法提取成熟石榴基因组DNA,通过琼脂糖凝胶、紫外分光光度计分析、ISSR扩增等方法检测所提取DNA的质量。【结果】改良的CTAB Ⅳ法能从各个石榴品种的成熟叶片中提取出基因组DNA,琼脂糖电泳胶孔干净,无拖带,且DNA的纯度和完整性都较好,OD260 nm/OD280 nm的比值均在1.8~2.0之间,无降解现象,其质量、产量都高于其他改良CTAB法。经ISSR- PCR扩增结果表明,此方法提取的基因组总DNA完全适于ISSR分析。其主要的步骤是：在石榴叶片的研磨中添加Vc、PVP等抗氧化物质,加入CTAB提取液后65 ℃水浴30 min后冷却至室温,离心条件为15℃,10 000 r/min,10 min,DNA粗提液用氯仿抽提3次,可获得高质量的DNA。【结论】改良的CTAB Ⅳ法能有效地从石榴成熟叶片中提取到高质量的基因组DNA。     

开放式遗传学实验教学改革的探索

遗传学实验课是高校生物教学中一门非常重要的实验课程。本文介绍了本校遗传学实验室开放式教学改革在培养创新人才方面取得的初步成效。实践证明,实验室开放式教学有利于创新人才的培养。