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141.
大熊猫犬冠状病毒部分S基因的克隆与全S基因序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
从重庆某动物园死亡的大熊猫肝脏中分离到一株病毒,经鉴定为犬冠状病毒(命名为CCV DXMV)。本实验根据CCV K378和CCV Insavc-1株基因序列设计合成了普通PCR引物SF1-SR1和SF2-SR2,以及半套式引物SF3-SR3、SR13、SF13、SF4-SR4和SF14,分段扩增了CCVDXMV株部分S基因,得到了368bp、792bp、737bp、1178bp和985bp5个基因片段。将纯化的RCR产物分别克隆到pGEM—T载体中,通过筛选和鉴定,获得了5个阳性重组质粒。将重组质粒送生物公司测序,将测得的基因序列与先前测定的该株病毒部分S基因序列,拼接成全S基因序列,并与其它株CCV及TGEV HN2002和FIPV79—1146株的S基因序列进行分析比较,绘制进化树。结果表明,该株病毒与CCV K378株的同源性最高,达到99.4%;而与CCV 23/03株的同源性最低,为56.9%;与FIPV和TGEV分别有90.4%和82.1%的同源性。 相似文献
142.
以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用优化的反转录聚合酶链式反应(RT—PCR)技术,扩增了2331 bp的Vp4全长基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T中,构建质粒pGEM-T-Vp4。以SalⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM—T—Vp4.和以胸苷酸合成酶基因(thymidylate synthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的穿梭表达载体pW425t,并将纯化的Vp4基因亚克隆至表达载体pW425t中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-Vp4。将pW425t-Vp4转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13中,通过生长功能弥补筛选阳性克隆,SDS-PAGE分析,可见约87.67Ku融合蛋白。Western blot分析表明,该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性,研究结果为pW425t-Vp4在乳酸菌受体菌株中表达提供科学依据。 相似文献
143.
本试验采用SephadexG-200层析技术纯化猪囊尾蚴(Cysticercus cellulosae)的囊液粗抗原。共获得两种(CF1、CF2)层析抗原,以酶联免疫吸附试验(ELISA)判定抗原的最适包被浓度以及抗体的最适稀释倍数,各阶段最适反应条件,结果证明CF1具有特异性强、敏感性高、稳定性好、重复性强的特点可以作为免疫诊断囊尾蚴病猪IgG。 相似文献
144.
细菌的活的非可培养状态及其在动物微生态制剂生产中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目前,由于多数益生菌(乳酸菌、双歧杆菌等)不耐热,在60℃几乎全部被杀灭,经受不住饲料制粒与膨化过程中高温高压的破坏作用,因而活菌数量少、菌种活性低就成了生产动物微生态制剂公认的难题。尽管采用冻干技术、稳定化技术、微胶囊化技术及包膜等先进工艺,但也克服不了高成本、繁制备等缺点。而且这类产品在饲喂过程中不经常单独使用,而是与抗生素、矿物质预混剂、多维预混剂、浓缩料等配合使用,这样也会使活菌数显著下降,并且产品贮存条件要求较高,需密封、低温、避光、冷藏等等。因此,利用细菌的活的非可培养状态(viable but noneuhurablestate,VBNC)性质,筛选VBNC菌种将会为动物微生态制剂的生产提供新的办法和解决思路。 相似文献
145.
146.
甜玉米田玉米螟发生危害及防治措施 总被引:6,自引:1,他引:6
甜玉米在我国大面积种植历史较短,对甜玉米田亚洲玉米螟发生危害和防治技术研究较少。本文对国内外甜玉米上玉米螟成虫产卵习性、幼虫危害和防治技术研究和应用现状进行了综述,为我国甜玉米田亚洲玉米螟的研究和防治提供参考。 相似文献
147.
采用数量分类方法,对来源于国内外的48份甜瓜种质资源的17个农艺性状进行了聚类分析,研究其遗传亲缘关系。结果表明,供试材料在生态型上可分为两大类群,即厚皮甜瓜类群和薄皮甜瓜类群,其中厚皮甜瓜与薄皮甜瓜杂交的中间型在亲缘关系上与薄皮甜瓜更为接近,划入薄皮甜瓜类群中。厚皮甜瓜类群和薄皮甜瓜类群又分别划分为2个和6个品种群。 相似文献
148.
150.