广东省蒲瓜病毒种类鉴定及多重RT-PCR检测方法的建立

【目的】探明侵染广东省蒲瓜的病毒种类，建立一种可以同时检测多种蒲瓜病毒的RT-PCR检测方法，提高蒲瓜病毒种类鉴定效率，为蒲瓜病毒病的精准监测与防控提供依据。【方法】2018—2022年间，从广东省广州市、惠州市、清远市、汕头市和湛江市的蒲瓜主要种植区采集蒲瓜病毒病疑似样品78份，对采集的样品按照地区和症状进行分类，提取每份样品的总RNA，将一个地区具有相同症状样品的RNA等量混合后进行小RNA深度测序分析。根据小RNA深度测序分析结果，设计特异引物进行RT-PCR验证，从而明确侵染广东省蒲瓜的病毒种类。挑选6种检出率高、危害严重的蒲瓜病毒，根据GenBank数据库设计多重PCR检测引物，通过优化反应体系和反应条件，建立同时检测6种蒲瓜病毒的多重RT-PCR方法。【结果】从采集的78份蒲瓜疑似病毒病样品中，共检测到12种病毒，按照检出率从高到低分别为葫芦内源RNA病毒（Lagenaria siceraria alphaendornavirus,LSEV）(64.1%)、黄瓜绿斑驳花叶病毒（cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）(62.8%)、...     

广西番茄花叶病毒和番茄褪绿病毒的分子鉴定

为明确引起广西番茄呈现褪绿斑驳和花叶症状的病毒病原，采集4个疑似病毒感染的番茄样品，利用小RNA深度测序、RT-PCR、序列分析、遗传进化树的构建等方法对样品进行鉴定及遗传进化分析。研究结果发现，小RNA数据中的41条contigs分别被注释为番茄花叶病毒(tomato mosaic virus,ToMV)和番茄褪绿病毒(tomato chlorosis virus,ToCV);RT-PCR证实了s RNA的结果，且所有样品均存在ToMV和To CV的复合侵染。通过拼接获得ToMV和ToCV RNA2的近全基因序列，ToMV近全基因序列为6383 bp，命名为ToMV-GX;ToCV RNA2的近全基因序列为8031 bp，命名为ToCV-GX。进化树分析发现，本研究获得的ToMV-GX与ToMV中国山西、内蒙古、呼和浩特3个分离物处于一个分支，说明其具有较近的亲缘关系；ToCV-GX与ToCV中国台湾、广东分离物处于一个大分支，说明具有较近的亲缘关系。上述结果证实，引起广西番茄呈现褪绿斑驳和花叶症状的病原是To MV和ToCV，本研究是ToMV和ToCV复合侵染广西番茄的首次报道。     

优质广适两系杂交水稻新组合旺两优98丝苗

旺两优98丝苗是湖南袁创超级稻技术有限公司和广东省农业科学院植物保护研究所以光温敏核不育系W115S为母本，以恢复系粤恢98丝苗为父本配组育成的两系杂交水稻新组合，2020年通过湖南省农作物品种审定委员会审定，2021年分别通过重庆市、广西壮族自治区农作物品种审定委员会审定。     

斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒的巢式PCR检测

旨在建立一种快速、可靠的斜纹夜蛾成虫带核型多角体病毒(Spodoptera litura Nucleopolyhedrovirus, SpltNPV)的分子检测方法，以克服目前常规PCR技术很难检测到斜纹夜蛾成虫带病毒的缺陷。以SpltNPV的蜕皮甾体尿苷二磷酸葡萄糖转移酶(ecdysteroid UDP-glucosyltransferase,egt)基因为检测对象，基于该基因序列设计了巢式PCR引物，其中一对外侧引物egt-F/R和一对内侧引物egt1-F/R，并研究斜纹夜蛾成虫带毒的巢式PCR检测可靠性。结果表明：基于egt基因的巢式PCR方法可以特异性扩增SpltNPV的DNA，引物egt-F/R的扩增检测最低限为10-7μg/μL；且基于引物egt-F/R的两轮普通PCR无法检测出成虫带毒，而采用巢式PCR方法可有效扩增出目的egt片段，巢式PCR检测方法的灵敏度比两轮普通PCR检测方法提高2个数量级。因此，本研究成功建立了基于SpltNPV的egt基因的巢式PCR检测技术，该方法为斜纹夜蛾成虫带毒、传毒等流行病学研究提供了可靠的技术支撑。     

引诱剂和川硬皮肿腿蜂对单丛古茶区天牛的防控效果

【目的】明确引诱剂和川硬皮肿腿蜂对单丛古茶区天牛的防治效果，为广东省潮州市凤凰山单丛古茶区天牛的生物防控提供技术支持。【方法】采用引诱剂诱捕的方法研究ZM-80型诱捕器不同悬挂高度对天牛诱捕效果的影响；利用天牛诱捕器研究F-8、APF-Ⅰ （普通型、持久型、加强型）、蜜糖水、CY-1和CY-2引诱剂对天牛的诱捕效果；采用田间释放法评价川硬皮肿腿蜂不同释放量和释放时间对天牛幼虫的防治效果，并进行川硬皮肿腿蜂区域化防控效果试验。【结果】诱捕效果试验结果表明，诱捕器悬挂高度2 m（高于树冠）诱捕到的天牛总数为13.25头/诱捕器，而悬挂高度1 m （树冠以下）诱捕到的天牛总数仅为2.15头/诱捕器，两者间差异显著（P<0.05）； APF-Ⅰ加强型和CY-1引诱剂对多种天牛均有较好的诱捕效果，诱捕总数分别为19.40和18.35头/诱捕器，两者间差异不显著（P>0.05）；川硬皮肿腿蜂防治效果试验结果表明，释放川硬皮肿腿蜂对单丛古茶区天牛幼虫有较好的控制作用，其中9和10月分别释放30000头/ha川硬皮肿腿蜂1次的效果最好，放蜂30和60 d后的防效分别为63.62%和68.72%。川硬皮肿腿蜂区域化防控试验结果表明，其平均防效为55.03%。【结论】利用APF-Ⅰ加强型或CY-1引诱剂，配合ZM-80型天牛诱捕器悬挂高度高于树冠，对天牛的诱捕效果较好； 9和10月分别按照30000头/ha各释放川硬皮肿腿蜂1次，能有效控制潮州凤凰山区单丛古茶园天牛危害。     

基于CiteSpace的鳞翅目昆虫转录组学研究态势分析

基于《中国知网》和PubMed平台，通过文献计量学的方法分析鳞翅目昆虫转录组学文献数量、年代分布、国家、作者信息、出版刊物及研究内容等信息，并采用CiteSpace V可视化软件进行作者聚簇、关键词共现和研究热点分析。《中国知网》数据库中检索出科技文献10篇，研究机构9个，发文作者9位，来源期刊8种。PubMed数据库共检索出科技文献927篇，发文作者690位，来源期刊162种。2015—2020年鳞翅目转录组学的研究热度很高。其中，夜蛾科、蚕蛾科、螟蛾科、粉蝶科，菜蛾科5个科的资料在CNKI和PubMed数据库相对其他科鳞翅目昆虫更为全面和详细。研究内容涉及高通量测序、基因表达、体外微环境、合成通路蛋白、基因家族、激素、遗传调控、转录应答等方面。研究热点有嗅觉受体、家蚕、毒性、氧化脂类、节肢动物触角、性引诱剂、病毒学、免疫学、核酸分子杂交等。客观总结了国内外的鳞翅目昆虫转录组学的研究现状，分析汇总出研究的热点以及薄弱点，可为昆虫学科研人员提供数据参考。