温泉中降解纤维素嗜热细菌的分离与鉴定

采用纯培养的方法,从美国内达华州温泉和中国福建永泰温泉分离得到27株嗜热细菌,从中筛选得到产纤维素酶的嗜热细菌并进行了16S rDNA鉴定。结果表明,LY7和LY8是产纤维素酶的嗜热细菌,菌株LY7与脂环酸芽孢杆菌属(Alicyclobacillus)的同源性达到99%,菌株LY8与土芽孢杆菌属(Geobacillus)的同源性达到99%,生长温度范围在40~70°C之间,最适温度65°C。酶学性质分析表明,LY8的内切酶酶活高达145 IU/mL。     

DNA测序技术及其应用研究进展

本文首先介绍了第一代、第二代、第三代DNA测序技术的原理、特点,在此基础上介绍了第二代测序技术在基因组测序、重测序,RNA测序,宏基因组,DNA甲基化等方面的应用。第一代测序技术以Sanger测序法为代表,操作繁琐、成本较高,不能满足大规模测序的需要。第二代测序技术以高通量、低成本为主要特点,主要包括Illumina公司的Solexa测序技术、罗氏公司的454测序技术和ABI公司的SOLiD测序技术,目前已广泛应用于生命科学研究的各个领域。第三代测序技术以单分子测序为主要特点,目前已经初见端倪,但是还没有被大规模广泛应用。     

菌草灵芝菌糟的饲用安全性

通过小鼠急性毒性试验、30 d喂养试验、黄曲霉毒素B1的测定和重金属测定,研究菌草灵芝菌糟的饲用安全性.结果表明:小鼠经口的急性毒性MTD>20 g.kg-1,对小鼠无不良影响;30 d喂养试验期间,各组小鼠的生长不受影响,且添加5%、15%灵芝菌糟组小鼠日增重分别比对照组提高21.62%(P>0.05)、27.03%(P<0.05).剖检未见组织器官病变,对血常规检测指标基本无影响(P>0.05);黄曲霉毒素B1、重金属含量均在饲料卫生标准限定范围内.     

5种菌草苗期抗盐性的评价

为探明莱竹、芦竹、巨菌草、象草、稗草等5种菌草苗期的抗盐能力,分别以0(CK)、50、100、150、200、250 mmol.L-1NaCl处理模拟盐胁迫,测定叶片的可溶性糖含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、细胞膜透性、丙二醛(MDA)含量等生理生化指标及恢复试验后植株的死亡率,并利用隶属函数法对以上指标进行综合评价.结果表明:随着NaCl胁迫浓度的升高,5种菌草植株的死亡率、细胞膜透性呈升高的趋势;稗草、巨菌草、象草的SOD、POD、CAT活性,可溶性糖、MDA含量呈先升后降的趋势,莱竹、芦竹的SOD、POD、CAT活性,MDA含量呈升高的趋势;稗草、莱竹、象草、巨菌草、芦竹的半致死NaCl胁迫浓度分别为132.6、129.8、105.9、114.9、164.1 mmol.L-1,其生理指标平均隶属函数值分别为0.58、0.43、0.94、0.06、0.02,5种菌草抗盐能力的强弱为:芦竹>稗草>莱竹>巨菌草>象草.     

5种菌草草粉栽培灰树花培养基配方筛选

以5种菌草(象草、巨菌草、五节芒、芒萁和类芦)草粉为试材,采用三级系统筛选法从菌丝生长速度和菌丝长势等方面对25个配方进行了初步筛选研究,以期得到菌草栽培灰树花的最佳配方。结果表明:菌草栽培灰树花的最佳配方为五节芒50%、芒萁28%、麸皮5%、玉米粉15%、石膏2%,含水量为60%。该配方下灰树花的菌丝体生长速度快,达0.405 cm·d~(-1);灰树花子实体的生物转化率最高,为43.39%。     

水分处理对巨菌草蒸散发过程及地上部生长的影响

利用盆栽试验研究了3种水分处理条件下(每周25、50、75 mm)巨菌草的蒸散发及其组分的规律.结果表明,巨菌草的蒸散发随水分输入的增多而增加,平均蒸散量分别为1.96、2.95和3.83 mm·d-1;平均蒸发与蒸散发的比值分别为0.467、0.429、0.422,说明输入水分增多使得巨菌草的蒸腾失水增加;根据平均蒸散发和平均蒸发与蒸散发比值,巨菌草的平均蒸腾速率分别为1.04、1.68、2.21 mm·d-1.随着巨菌草的生长,不同水分处理之间蒸散发的差异逐渐增大,土壤蒸发占蒸散发的比例逐渐下降,巨菌草蒸腾作用成为水分的主要散失途径.增加水分输入可极显著增加茎鲜重、叶鲜重和总干重,降低叶茎比和含水率.     

菌草与莲子废弃物混合基质栽培的平菇子实体氨基酸与脂肪酸组分分析

设置2种配方,即巨菌草38%+莲子壳39%+麸皮20%+石灰3%(配方1)和五节芒38%+莲子蓬19%+莲子壳20%+麸皮20%+石灰3%(配方2),用菌袋栽培平菇,依据国家标准,测定平菇子实体氨基酸与脂肪酸组分.结果表明：配方1栽培的平菇子实体氨基酸总量为169.06 g·kg^-1,必需氨基酸含量为69.42 g·kg^-1;配方2栽培的平菇子实体氨基酸总量为166.35 g·kg^-1,必需氨基酸含量为67.53 g·kg^-1.二者均含有17种氨基酸,其中谷氨酸和天门冬氨酸含量较高;二者第一限制性氨基酸均为亮氨酸,其评分分别为79.73和79.20;二者必需氨基酸组成比例符合世界卫生组织(WHO)/联合国粮农组织(FAO)推荐模式.前者主要含有9种脂肪酸,后者主要含有8种脂肪酸,均以软脂酸(C16∶0)、油酸(C18∶1n9c)、亚油酸(C18∶2n6c)为主.前者脂肪酸中软脂酸、油酸、亚油酸含量分别为10.8%、18.1%、62.1%,后者分别为9.8%、12.6%、70.3%,均存在显著差异;二...     

响应面法制备小球藻多肽-钙螯合物的制备工艺

为探究小球藻多肽-钙螯合物的较佳制备工艺,以小球藻干粉作为原料,对其进行酶解,获得小球藻多肽,以螯合率为指标,对小球藻多肽与CaCl_2的螯合工艺进行了优化,考查了螯合时间、螯合温度、肽钙质量比、底物质量分数和pH值对螯合反应的影响,通过Box-Behnken试验设计与响应面分析,同时建立螯合物制备工艺的二次项数学模型并验证其可靠性,优化后确定为螯合温度50℃,pH值9,肽钙质量比3∶1,底物质量分数5%,螯合时间60 min,最终螯合率可达96.14%。研究为合成新型补钙制剂(多肽-钙螯合物)的开发提供了理论依据,也为小球藻的开发利用提供了一个新的开拓思路。     

褐飞虱中肠上皮细胞膜结合氨肽酶N在Sf9昆虫细胞内的表达

褐飞虱(Nilaparvata lugens)是中国水稻(Oryza sativa)生产中对水稻危害极为严重的农业害虫之一。随着微生物杀虫剂苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringsis,Bt)的使用及转Bt杀虫基因作物的推广,对Bt不敏感的褐飞虱的防治将成为难点。当前研究表明Cry毒素与靶标昆虫中肠膜结合氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)的结合是Bt Cry毒素毒理机制中的重要步骤。本研究对褐飞虱转录组数据中获得的一个褐飞虱中肠apn基因进行全长克隆,构建Bacmid-bphAPN重组杆状病毒载体,并在草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞(Sf9)中表达。经Western blot、蛋白质谱及免疫荧光定位检测证实bphAPN蛋白成功表达。细胞毒性实验结果显示表达了褐飞虱中肠APN的Sf9细胞对Cry1Ac活化蛋白不敏感。褐飞虱中肠APN的体外真核表达有助于褐飞虱中肠APN的特征分析,为开发对褐飞虱有毒性作用的新型Cry毒素提供了资料基础。     

产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选与鉴定

β-葡萄糖苷酶是纤维素分解酶系中的重要组成部分,具有广泛的应用前景。以牛瘤胃为材料,筛选得到4株β-葡萄糖苷酶产生菌株,采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定各菌株的β-葡萄糖苷酶酶活力,选取1株β-葡萄糖苷酶酶活力较高的菌株,结合16S rDNA序列分析方法对其进行分子生物学鉴定。结果表明:筛选到1株产β-葡萄糖苷酶活力为6.589U·mL~(-1)的菌株命名为TA1;经鉴定该菌株为液化沙雷菌属(Serratia liquefaciens)。研究结果对产β-葡萄糖苷酶的微生物资源获取具有一定的借鉴意义。