气肿疽梭菌CctA基因的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

研究旨在原核表达气肿疽梭菌细胞毒素A （CctA）基因,用纯化的重组蛋白建立其间接ELISA检测方法,a。利用大肠杆菌密码子的偏爱性优化CctA基因序列,克隆至原核表达载体pET-28a （+）,双酶切鉴定原核表达质粒pET28a-CctA并测序。将重组质粒转入大肠杆菌,经IPTG诱导得到高表达的重组CctA包涵体蛋白。包涵体蛋白变性后经镍（Ni）柱纯化,SDS-PAGE检测其纯化效果。以豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清为一抗,用Western blotting方法检测重组CctA蛋白的反应原性。用棋盘滴定法建立间接ELISA检测方法,以复性后的重组CctA蛋白作为检测抗原,摸索抗原包被浓度、封闭液的种类及浓度、抗体的最适稀释度和反应条件等。选用3批气肿疽灭活疫苗免疫豚鼠后采集血清,同时用攻毒和间接ELISA两种方法验证疫苗的免疫效力。质粒双酶切结果显示,得到大小约853 bp的条带,与预期相符,且测序结果正确。SDS-PAGE结果表明,成功表达并纯化大小为35 ku的重组CctA蛋白。Western blotting结果显示,豚鼠抗气肿疽梭菌抗血清与重组CctA蛋白具有良好的反应原性。建立的间接ELISA法的最适条件为：抗原的包被浓度为0.5 μg/mL,于4 ℃包被过夜;封闭液选择10%胎牛血清,37 ℃孵育2 h;二抗的稀释度为1：8 000;室温避光显色10 min后终止反应,测定D_{450 nm}值。当P/N>4.6时,间接ELISA法检测结果与豚鼠攻毒试验结果拟合度较好。本研究成功表达CctA基因并纯化了重组CctA蛋白,建立的以重组CctA蛋白为检测抗原的间接ELISA检测方法,有望成为气肿疽灭活疫苗免疫效果验证的替代方法。     

2BQM-6型免耕播种机设计及播种深度控制研究

根据北方地区免耕作业的农艺要求,设计了2BQM-6型气吸式免耕播种机,实现了破茬、开沟施肥、播种及覆土镇压等联合作业。在此基础上,针对免耕条件下作业地面平整度较差等因素所造成的播种深度变动大的问题,研究了播种深度调节机构和相应的参数。通过ADAMS软件对播种单体进行建模分析,研究其仿形机构不同参数对仿形效果的影响,寻求最佳仿形时的最优参数范围,以满足不同农作物种植深度不同的要求。该调节装置具有调节范围广、灵活及易于操作等特点。     

去花对菊芋数量学性状的影响

以白皮菊芋为试材,通过对现蕾期菊芋去除1/4花、1/3花、1/2花、全部去除和不去花等5个处理,测定叶片、小花、分枝和块茎数量等相关指标,探讨了去花对菊芋数量学性状的影响规律,为提高菊芋块茎生物产量提供理论依据。结果表明:去花1/3、1/2和全株去花提高了单株菊芋块茎数量,降低单株块茎质量,1/4去花对菊芋单株块茎数量和单个块茎质量影响不显著;去花处理降低了二级分枝和一级分枝的数量;去花处理增加了单株叶片的数量和单片叶片的质量;随着去花数量的增加,单株小花数量呈现"降-升-降"的变化规律,单个小花质量呈现"降-升"的变化趋势。     

不同浓度赤霉素和双氧水对刺茄种子萌发的影响

刺茄种子在常规条件下很难萌发。为寻找促进刺茄种子萌发的试剂,试验以不同浓度的赤霉素(0~1 000mg/L)和双氧水(0%~3.0%)溶液处理刺茄种子,观察记录每天的发芽数,并从种子的发芽率、发芽势、发芽指数3个指标探讨赤霉素和双氧水对种子萌发的影响。结果表明:双氧水和低浓度赤霉素(0~400mg/L)对刺茄种子的萌发没有影响,而高浓度赤霉素(600~1 000mg/L)能显著提高种子萌发。     

抗青枯病樱桃番茄品种的初步筛选及评价

对28个樱桃番茄品种的田间抗病性、植株类型、单果质量、果色、可溶性固形物含量等主要经济性状进行调查。试验结果表明,感病品种红艳发病最重,发病率为73.67%,其次是红箭、红日和金艳,发病率分别为23.33%、21.67%和20.33%,其他品种发病率都在20%以下;28个品种的果实颜色、大小、口感等差异明显,除黑宝石映泰及黄金蛋可溶性固形物含量在4.10%以下外,其他品种可溶性固形物含量都达5.20%以上。综合分析,筛选出绿天使、粉仙、红娘9号、绿圆、格丽贝、红椭圆等11个抗青枯病且经济性状优良的樱桃番茄品种,为优质抗青枯病樱桃番茄的选育和推广提供了参考。     

多梯度氮磷添加对高寒草甸植物群落生物量与氮磷含量的影响

为研究不同梯度氮、磷单独及混合添加对高寒草甸植物群落生物量、植物养分含量及化学计量比的影响,本实验分析了青海省门源县典型高寒草甸植物群落地上总生物量,功能群水平地上生物量,植物全氮、全磷含量及氮磷比对多梯度氮、磷添加的响应情况。结果表明：氮、磷添加均对群落地上生物量影响极显著(P<0.001);氮添加对禾草类和豆科生物量影响极显著(P<0.001);磷添加对禾草类和莎草类生物量影响极显著(P<0.001);氮磷交互作用对豆科和莎草类生物量影响显著(P<0.05)。群落水平上,氮添加显著提高了植物全氮含量,对植物氮磷比(N∶P)有正效应,磷添加显著提高了植物全磷含量,对植物N∶P有负效应,植物全磷对N∶P的负效应大于全氮对N∶P的正效应。本研究表明氮、磷添加可能会使高寒草甸植物群落组成和植物养分含量发生改变,植物群落逐渐向禾草类发展;此外,高寒草甸植物生长趋向于受氮磷共同限制。     

布鲁氏菌病无疫小区建设与成效

近年来,我国将无疫小区管理理念应用到布鲁氏菌病防控,以养殖场生物安全防控作为切入点,整合优化布鲁氏菌病关键技术措施,结合科学有效的监督管理,全面推动布鲁氏菌病防控工作。本文重点从建设主体、生物安全体系、监测要点等方面介绍了布鲁氏菌病无疫小区建设标准,总结了布鲁氏菌病无疫小区建设对于提升完善养殖场生物安全体系,推进养殖企业从传统防控到生物安全管理、风险管理转型升级,促进产业高质量发展等方面的成效,以期对下一步工作推进提供参考。     

The research in processing fMRI data using temporal-spatial model based on CCA

In the analysis of cognition of human brain,the fMRI is often used.Corelation is a common method in fMRI data detecting,but its ability should be improved.Based on the Canonical Correlation Analysis(CCA),the temporal correlation and spatial correlation are used together to detect the activated area in the fMRI data.By the application of the method in simulation data and fMRI data,it shows that this method is effective in the detecting.     

A Study on the Mathematical Models for Two Dimensional Guillotine Cullting-stock

Based on the analysis and study on some existed models for two-dimensional Guillotine Cutting-Stock problem, it is pointed out that some kinds of the models may miss some good cutting patterns,and some may result in inadequate solutions because of only considering the patterns with the smallest waste. A kind of revised two-dimensional cutting-stock models are developed,which transform the two-dimensional problem into the one-dimensional one using the dimension-decreasing heuristic method and whose initial patterns are considered comprehensively. In this kind of models, not only the least waste,but also the other constraints,such as the demands and the relative area of the order plates are considered.     

A New Method for Parameterized Design of Metallic Doors and Windows

According to the graphics characteristics of metallic doors & windows design and based on the research of graphics dimension restriction problems. This paper provides a new method for parameterized design of metallic doors & windows in virtue of expression solution. In this method, the restrictions of graphic elements have been changed into the parameter expressions of sizes and positions of graphic elements. Through the calculation of such expressions, the parameter driven method has been reached. Thus the parameterization of graphics can be easier and quicker than before. It can be used to setup the open parameterized graphics libraries.