蜘蛛丝蛋白基因工程的研究进展

蜘蛛丝是一种天然蛋白纤维。由于蜘蛛丝蛋白特殊的序列结构,使其具有独特的理化性能、力学性能及超收缩性能和优良的生物学性能。随着蜘蛛丝在多领域功能性材料应用价值的发掘,蜘蛛丝蛋白基因工程研究不断深入。简要介绍了蜘蛛丝的性能,重点综述蜘蛛丝蛋白序列基本结构和外源表达的研究,以及重组蜘蛛丝蛋白在多种宿主(包括细菌、酵母、植物、动物细胞及家蚕)中表达的研究进展,希冀通过基因工程的手段获得蛛丝蛋白并进行规模化开发生产得到更深入的研究与关注。     

石榴皮多酚提取物对亚急性瘤胃酸中毒相关有害因子的影响

本文通过建立体外亚急性瘤胃酸中毒(subacute ruminal acidosis,SARA)模型,研究不同添加水平的石榴皮多酚提取物(pomegranate peel polyphenol extract,PPPE)对SARA相关有害因子的影响.试验采用单因素试验设计,PPPE设3个添加水平,即分别为发酵底物质量的...     

宠物兔肠道寄生虫感染情况调查

为了解宠物兔肠道寄生虫感染情况,采用卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法对1个宠物市场和2个宠物兔场的305份兔新鲜粪便样品进行检查。结果检出肠道寄生虫5种,总感染率为71.2%,其中球虫感染率最高,为47.2%,隐孢子虫、贾第虫、圆线虫和栓尾线虫感染率分别为2.0%、3.9%、29.5%和1.0%;不同采样点和不同年龄段宠物兔肠道寄生虫的感染率统计学差异均极显著(P<0.01),寄生虫感染随年龄增长呈递减趋势。数据表明宠物兔肠道寄生虫感染率较高,且存在人兽共患机会性原虫,应加强其寄生虫病的防治。     

一种用于非洲猪瘟病毒检测的PCR方法

基于非洲猪瘟病毒(ASFV)VP72基因设计引物,建立一种检测非洲猪瘟病毒的PCR方法。应用本研究所建立的方法与OIE参考的方法进行比较,并对参考实验室提供的非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组以及本实验室收集的野外样品进行检测。结果显示:本研究设计的引物具有良好的特异性,与猪的其他病原没有交叉反应;其敏感性与OIE参考的方法相当;所建立的PCR方法能够成功扩增非洲猪瘟病毒17个分离株的基因组,野外样品检测均为阴性。根据上述研究结果,本研究所建立的方法具有很好的应用性,能够用于非洲猪瘟疫病的诊断以及防控。     

HPLC-PDA法测定兽用中药液体制剂中非法添加的四种解热镇痛类药物

实验建立了兽用中药液体制剂中非法添加对乙酰氨基酚、安乃近、氨基比林、安替比林四种解热镇痛类药物的高效液相色谱-二极管阵列(HPLC-PDA)检测方法.方法采用CAPCELL PAK MGⅡS5 C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,流动相为磷酸盐缓冲液和乙腈(84:16),流速1.0 mL/m...     

‘甘农2号’黑麦品种在青海省不同区域的适应性评价

本试验以‘甘农2号’黑麦(Secale cereale L.)为试验材料,以‘冬牧70’和‘黑饲麦’为对照,来评价‘甘农2号’在2018-2019年在青海省不同区域(海晏县、湟中县、平安区)的适应性。结果表明：3个黑麦品种中,‘甘农2号’在3个试验点的平均干草产量(13.04 t·hm^-2)显著高于‘冬牧70’和‘黑饲麦’,平均纤维含量显著低于‘冬牧70’和‘黑饲麦’;3个试验点中,海晏点3个黑麦品种的平均干草产量(12.06 t·hm^-2)显著高于湟中和平安点;品种×年份交互作用中,2018年‘甘农2号’黑麦的平均干草产量(14.38 t·hm^-2)显著高于其他处理;试验点×年份交互作用中,2018年海晏点3个黑麦品种的平均干草产量(14.47 t·hm^-2)显著高于其他处理。综上所述,‘甘农2号’黑麦干草产量和营养品质高且较稳定,适应青海省海晏县、湟中县和平安区以及其他气候相似区种植。     

贮藏时间与蒙药黄芩对紫花苜蓿草颗粒维生素和化学成分的影响

为有效保全苜蓿草颗粒贮藏过程中维生素及营养品质,本研究以紫花苜蓿草颗粒为研究材料,研究贮藏时间(0,60,120,180,240 d,冷冻240 d)与蒙药黄芩(0%,0.5%,1.0%,1.5%)对其维生素含量和营养品质的影响。结果表明：在贮藏过程中,与其他添加量相比,添加1.5%黄芩有利于保存苜蓿草颗粒维生素B5、维生素C和α-维生素E含量。贮藏60 d及以上显著降低了苜蓿草颗粒维生素B1、维生素B3、维生素C和维生素E含量;贮藏120 d时苜蓿草颗粒DM含量趋于稳定;苜蓿草颗粒贮藏180 d后其CP含量显著降低;贮藏0～180 d期间,随着贮藏时间的延长,苜蓿草颗粒NDF和ADF含量显著升高。与常温贮藏240 d相比,冷冻贮藏相同时间有利于保存苜蓿草颗粒中维生素B1、维生素B5、α-维生素E和OM含量,显著降低DM、NDF和ADF含量。因此,1.5%黄芩添加剂有利于保存苜蓿草颗粒维生素含量,且常温贮藏时间不宜超过60天。     

复合酵母培养物对奶牛产奶性能、氮排放及血液生化指标的影响

为研究饲料中添加复合酵母培养物对奶牛产奶性能、氮排放及血液生化指标的影响,选取年龄、体重、产奶量及泌乳期相近(135±15) d的荷斯坦奶牛24头,随机分为4组,每个处理6个重复,对照组和3个试验组的复合酵母培养物添加量分别为精料浓度的0,0.8%,1.0%,1.2%,随精料饲喂,测定产奶量、乳成分、氮排放及血液生化指标,结果表明,1)试验2组日均产奶量显著高于对照组(P<0.05),各试验组分别比对照组提高8.48%,10.05%,8.97%。2)复合酵母培养物能显著提高乳脂和乳蛋白率(P<0.05),显著降低牛奶体细胞数(P<0.05),以试验2组最低。3)在氮排放量上,试验2组显著低于对照组(P<0.05),各试验组比对照组分别降低8.47%,12.01%,9.36%。4)在血液生化指标方面,复合酵母培养物能提高血清中总蛋白、球蛋白、血糖、胰岛素水平(P<0.05),降低尿素氮水平(P<0.05)。由此可见,本试验条件下,综合考虑产奶量、乳成分、氮排放及血液生化指标,复合酵母培养物的最佳添加量为精料浓度的1.0%。     

红芪粗多糖对免疫应激断奶仔猪生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究红芪粗多糖(CHPS)对细菌脂多糖(LPS)刺激断奶仔猪生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响。选择健康的32头断奶仔猪,按体重相近的原则随机分为5组:对照组(基础饲粮)、LPS组(基础饲粮+LPS)、CHPS低剂量组(基础饲粮+LPS+200 mg/kg CHPS)、CHPS高剂量组(基础饲粮+LPS+800 mg/kg CHPS),每组8个重复,每个重复1头仔猪。试验期为28 d。试验期间记录每头猪日采食量,试验第1、21、28天称重,计算各阶段平均日采食量、平均日增重和料重比。试验第21天,LPS组以及CHPS低、高剂量组仔猪腹膜注射100μg/kg BW LPS,对照组注射等量的生理盐水,注射后3 h,前腔静脉采血,分离血清,测定血清生化指标。结果表明:1)与对照组相比,应激期(22～28 d)LPS组平均日采食量和平均日增重均极显著下降(P<0.01);血清碱性磷酸酶、谷丙转氨酶活性及甘油三酯、总胆固醇、尿素氮和丙二醛含量均显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),一氧化氮合酶活性显著下降(P<0.05)。2)与LPS组相比,CHPS高、低剂量组平均日采食量和平均日增重均显著升高(P<0.05);CHPS低剂量组血清甘油三酯、总胆固醇和丙二醛含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);CHPS高剂量组血清碱性磷酸酶活性极显著降低(P<0.01)。结果提示,在饲粮中添加一定剂量的CHPS能够有效缓解LPS所致免疫应激引起的断奶仔猪生长性能下降,可降低血清甘油三酯、总胆固醇、丙二醛含量及碱性磷酸酶活性,说明CHPS可以有效缓解LPS所致仔猪免疫应激。     

重组鸡Cathelicidins类抗菌肽的融合表达及其对金黄色葡萄球菌抗菌活性的研究

Cathelicidins抗菌肽在家禽天然免疫系统中发挥重要作用,本研究将已构建的含Cathelicidins抗菌肽成熟肽的阳性克隆菌株Rosetta(DE3)/pET30-CathL1S、pET30-CathL2S、pET30-CathL3S分别在37℃、1.0 mmol/L IPTG的条件下进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,Cathelicidins成熟肽片段均在大肠杆菌中以融合形式成功表达,表达产物的表观分子质量分别为7、8、7.5 ku。琼脂糖孔穴扩散法检测结果显示,表达产物对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、鸡白痢沙门氏菌C79-13 (Salmonella pullorum)、巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌及绿脓杆菌等供试菌株均有较强的抑制作用,尤其对抗生素耐药菌株有明显的抑制作用。以雏鸡为实验模型研究重组抗菌肽对金黄色葡萄球菌的体内抗菌活性,结果表明,注射中、高剂量CathL-1抗菌肽试验组(5、10 mg/kg),在试验结束后取肝脏组织匀浆液涂布于TMP平板,未分离到葡萄球菌。各抗菌肽试验组平均增重均高于感染对照组,其中低剂量抗菌肽试验组(2.5 mg/kg)体内抑菌效果虽与普通抗生素相当,但其增重效果尤为明显。