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[目的]为探索单个转基因阳性细胞快速扩大培养成为细胞克隆的技术体系。[方法]对转染人乳铁蛋白(Human lactoferrin,hLF)基因乳腺特异性表达载体pBLM-C1的单个山羊胎儿成纤维细胞(Fetal Fibroblasts,FF)和乳腺上皮细胞(Mammary Gland Epithelial,MGE)细胞进行克隆。在96孔板中,首先用3种浓度(V/V:0、50%和100%)的适应性条件培养基对单个转染细胞进行细胞单克隆的制备,进而把转染细胞单克隆与非转染细胞共培养进行扩大培养,neo基因被用于筛选基因,以PCR方法鉴定转染细胞基因组DNA。并对单克隆细胞进行染色体核型分析。[结果]与非适应性条件培养基相比,100%适应性条件培养基能够显著提高细胞单克隆存活率;与对照相比,转染细胞单克隆与非转染细胞共培养,显著提高了转染细胞单克隆扩大培养后的比率(FF:53.33%vs.10.00%;MGE:33.33%vs.6.670%),且明显缩短了扩大培养汇合时间(20~30 d);PCR鉴定结果表明,上述方法获得的克隆细胞整合有hLF目的基因;核型分析表明,大部分细胞克隆染色体正常。[结论]该研究可为分离转基因细胞、理想载体的插入及诊断提供一种可靠的方法,并能节省转基因动物生产的及费用时间。 相似文献
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为研究铅暴露所致大鼠脑组织氧化损伤和橙皮素的保护作用机制,大鼠用醋酸铅(500mg Pb/L)和橙皮素(50mg/kg)处理。处理结束后测定大鼠脑组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量。结果表明,铅可显著提高大鼠脑组织中MDA含量(P<0.05),极显著降低GSH含量(P<0.01)和显著降低SOD和CAT活性(P<0.05);与铅处理组相比,橙皮素却能显著降低铅处理脑组织MDA含量(P<0.05),极显著提高GSH含量(P<0.01)和显著提高SOD和CAT活性(P<0.05)。说明铅可导致大鼠脑组织脂质过氧化损伤,橙皮素对铅致脑损伤具有一定保护作用。 相似文献
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山东是一个典型的人多、地少、草原面积较小的省份,面临种植业和畜牧养殖业发展的巨大压力,要巩固山东畜牧业大省的地位,并逐步由畜牧业大省向畜牧业强省迈进,就必须坚定不移地做好农作物秸秆利用这篇大文章。目前,山东省每年生产的农作物秸秆在8000万t左右。2008年,全省秸秆青贮、氨化(微贮)养畜利用达3180万t,占秸秆总量的39.8%, 相似文献
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117.
教育经费预测的理论与实践 总被引:1,自引:0,他引:1
教育的发展是推动经济发展的源泉,同时教育的发展也离不开经济发展的保障.教育经费受制于经济的发展,教育经费的预测理应与社会、经济的发展相结合.本文运用指数曲线预测方法,结合黑龙江省社会、经济发展的总趋势,预测了黑龙江省教育经费的未来发展趋势,并对教育经费保障体系进行了探讨,使教育经费预测结果在实践中具有可操作性. 相似文献
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通辽市农区是国家重要商品粮基地。自“三北”防护林工程建设以来。通辽市农区的林业生产发展很快,现在有林地面积已达75万亩(不包括国营林场造林面积)。笔者通过调查,现将通辽市农区林业生产责任制情况报告如下: 相似文献
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小鼠实验性镉中毒的病理学变化 总被引:4,自引:3,他引:1
为了研究镉对小鼠正常生理功能的影响及引起的睾丸组织病理学变化,评价镉的生物毒性,选用32只6周龄的清洁级健康小鼠(雌雄各半)随机分组后分别用5、7.2、10.4、15mg/kg(按Cd2+计)CdCl2溶液灌胃,48h内统计各组死亡率,按改良寇氏法计算CdCl2对小鼠经口LD50。将16只雄鼠随机分为4组:Ⅰ组为对照组,100mL自由饮水;Ⅱ组1.66rag/100mLCd2+饮水;Ⅲ组3.32mg/100mLCd2+饮水;Ⅳ组6.64mg/100mLCd2+饮水,持续4周。记录4周内小鼠体重、临床表现、病理解剖学和病理组织学变化。小鼠CdCl2溶液灌胃的LD50为9.934mg/kg(按Cd2+计),中毒小鼠表现为精神沉郁、抽搐等神经症状,肠道及各实质器官出血。表明亚慢性镉中毒会抑制小鼠生长,造成巨幼红细胞性贫血,引起体内各器官广泛出血,损坏睾丸正常生理结构。 相似文献
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