利用正交设计优化金钗石斛的转化体系

为优化金钗石斛的转化体系,以其类原球茎(PLBs)为材料,利用正交设计研究了影响农杆菌介导转化的因素.结果表明:PLBs预培养1 d、侵染的菌液OD600值1.2、乙酰丁香酮(AS)100μmol/L、共培养5 d时,每100mg鲜物质量材料上的GUS染色蓝点数最多;单因子试验表明AS适宜的浓度为50μmol/L;PCR结果显示得到了转化呈阳性的PLBs;初步表明此体系可用于金钗石斛的遗传转化研究.

Abstract：

In order to optimize the Agrobacterium-mediated transformation system for Dendrobium nobile Lindl, effects of preculture time, bacterial concentration, acetosyringon (AS) concentration and co-cultivation time on Agrobacterium-mediated transformation of protocorm like bodies (PLBs) of D. nobile Lindl were studied in an experiment with orthogonal design. The results showed that number of GUS staining blue spots per 100 mg flesh weight of PLBs was the greatest in the treatment of the combination of preculture for one day, 1.2 of bacterial concentration (OD600), 100 μmol/L of concentration of AS and co-culture for five days. Single factor experiment showed that the appropriate concentration of AS was 50 μmol/LPCR confirmed that positive transformed PLBs were obtained. It is tentatively concluded that this system can be used in the study of transformation of D. nobile Lindl.     

GA3 与 6-BA 复配处理对甘薯催芽育苗的影响

【目的】为有效缓解生产中 GA3 浸种催芽所导致的甘薯细苗、弱苗问题，研究 GA3 与 6-BA 复配 浸种处理提升薯苗品质的可行性。【方法】设 1、5、10 mg/L GA3 单独浸种及其分别与 5 mg/L 6-BA 复配后浸 种处理，命 名为 G 组与 GB 组，另设清水浸种（G0，CK1 ）和 5 mg/L 6-BA 单独浸种（G0B，CK2 ），共 8 个处 理，研究其对甘薯品种‘心香’薯块萌芽、薯苗生长形态、单苗质量、干物质率及薯苗采收量的影响。【结果】 1 mg/L GA3 浸种处理对调控甘薯萌芽与薯苗生长形态效果最好，薯块平均根眼萌动数达 11 个，总芽数达 16.33 个， 平均苗高达 8.80 cm，苗基部直径为 3.01 mm。随着 GA3 浓度升高，苗基部直径、单苗质量、干物质率均变小， 薯苗品质变差。在 GA3 与 6-BA 复配处理后，薯苗品质得到有效改善，且 GA3 浓度越高效果越显著，10 mg/L GA3 与 5 mg/L 6-BA 复配浸种处理提升薯苗品质效果最好，苗基部直径为 3.40 cm，干物质率最高，且单苗质量 相对 GA3 单独浸种处理有所提高。两个处理均可有效提高薯苗的采收量，且差异较小，其中 GA3 单独处理组 G1+G5+G10 的采收量为 282 株，但薯苗品质较差，而 GA3 与 6-BA 复配处理组 G1B+G5B+G10B 的采收量为 281 株， 薯苗品质明显改善。【结论】综上，6-BA 对于高浓度 GA3 浸种催芽所带来的负面作用具有一定的缓解，使得薯 苗茎秆粗壮、干物质率提高、种苗品质提升，且以 10 mg/L GA3 与 5 mg/L 的 6-BA 复配处理对甘薯品种‘心香’ 缓解效果最为明显。