白玉蜗牛养殖技术

1．生物学特性白玉蜗牛属雌雄同体的软体动物,贝壳呈螺旋形,体躯几乎全是肌肉,无骨骼,主要依靠肌肉伸缩移动。 （1）习性白玉蜗牛喜在阴暗潮湿、疏松多腐殖质的环境中生活,昼伏夜出,畏光怕热。对环境极为敏感,最适温度为25～28℃,相对湿度为75％-85％。当温度低于15℃或高于35℃时呈休眠状态,停止生长和繁殖。     

低温弱光对西葫芦幼苗生长生理指标的影响

以西葫芦幼苗为试验材料,通过低温、弱光、低温弱光3种胁迫方式分别处理幼苗,测定西葫芦幼苗的光合作用相关参数,研究其在低温弱光逆境条件下叶片光系统受损伤的程度,以明确叶片内的细胞受损伤程度。结果表明:低温、弱光、低温弱光3种胁迫条件下,西葫芦幼苗叶片的叶绿素荧光参数(Fv/Fm、NPQ)、叶绿素含量、过氧化氢酶(CAT)活性以及超氧化物歧化酶(SOD)活性均有不同程度的降低,而丙二醛(MDA)和过氧化物酶(POD)活性均不同程度的升高。其中弱光条件下叶绿素荧光参数下降最多,而低温弱光在一定程度上缓解了弱光伤害。弱光胁迫下的西葫芦幼苗生理指标显著性差异最大,说明弱光对生物膜的影响最大。     

丝瓜ISSR反应体系的优化

以丝瓜基因组DNA为模板,对ISSR反应中主要5个影响因素Mg~(2+)浓度、dNTP浓度、TaqDNA聚合酶浓度、引物浓度和DNA模板浓度,建立丝瓜ISSR-PCR反应的体系。根据实验确定的最佳反应体系为:25μL ISSR体系:50 ng DNA,0.2 mmol/L dNTP,1 U Taq酶,0.4μmol/L的单条引物,2.5μL 10×Buffer,2.0 mmol/L Mg~(2+)。在此基础上,对12个引物的退火温度进行优化。最终选用60份丝瓜品种对所确定的扩增体系及扩增程序进行验证,检测结果表现为扩增产物条带清晰明亮、亮度高和重复性好,表明本试验所确定的反应体系及反应程序适用于丝瓜的ISSR分子标记为丝瓜种质资源的鉴定、分类和丝瓜的杂交育种提供参考依据。     

丝瓜总酚提取和测定方法的优化

为建立简单、稳定的丝瓜总酚提取和测定体系,对丝瓜果肉总酚的超声波辅助提取和福林-酚比色测定方法进行优化。丝瓜果肉与80%乙醇在比例为1∶10、40℃下超声波提取30min,总酚的提取效果较好。在测定波长750nm、0.5mol·L~(-1) Na2CO3体积3mL、0.5mol·L~(-1)福林-酚体积1.5mL、反应温度30℃、反应时间60min时,总酚含量与吸光度呈良好的线性关系:Y=0.6279 X+0.0273(R2=0.9947),说明此方法能够简便、准确、快速的测定丝瓜总酚含量。     

樱桃番茄新品种富丹的选育

选择亲缘关系较远且性状差异较明显的9个樱桃番茄高代自交系,配制了39个杂交组合。通过比较观察,组合T-014(富丹)综合性状表现优良,生长力强,中早熟,果实椭圆形且光泽,红色,果肉多,种子少,品质佳,糖度7.6～8.2度,单果重12～16g。参加福州、宁德、三明多点试验,总产量达49000～51000kg/hm2,分别比对照品种增产15.3%、13.7%、16.5%。     

应用RAPD标记鉴定苦瓜杂种纯度

以苦瓜杂交种“闽研2号”及其亲本为材料,利用RAPD标记技术对苦瓜杂交种的多态性进行分析.结果表明:在供试的200条RAPD引物中,筛选出1个引物S115能区分杂交种及其亲本种子.利用互补型RAPD引物S115对苦瓜杂交种“闽研2号”的纯度进行了快速鉴定,结果与田间鉴定结果一致.     

根癌农杆菌介导草莓遗传转化研究

利用带有内含子gus基因的瞬时表达,研究影响根癌农杆菌介导"鬼露甘"草莓遗传转化的若干因素。结果表明:草莓叶片外植体对卡那霉素较为敏感,适宜的筛选浓度为20mg/L,可明显抑制非转化组织的生长;300mg/L的羧吩青霉素可有效抑菌,对外植体生长影响也较小;预培养2-4d有利于转化;共培养2-3d有利于提高转化频率并避免了农杆菌的过度生长;OD600nm值为0.4的菌液侵染10min效果最佳。再生植株经PCR检测初步证明gus基因已成功整合到草莓基因组中。     

反义乙烯受体FaEtr2基因对草莓的转化

通过根癌农杆菌EHA105介导转化草莓叶片,在卡那霉素选择压下连续分化选择、扩繁和生根培养,获得了26株转乙烯受体FaEtr2反义基因植株。PCR和Southern blot检测证明,该基因已经整合草莓染色体中。Northern分析表明,转入的反义基因对靶基因都有部分的抑制。对果实乙烯释放量测定表明,转基因草莓中乙烯释放量降低。     

草莓叶叶黄素循环组分超高效液相色谱分析

为建立草莓叶叶黄素循环组分超高效液相色谱(UPLC)的分析方法,优化草莓叶叶黄素循环组分的提取条件,建立适宜的UPLC测定方法,通过研究强光下各组分含量的变化规律进行验证,结果表明,以丙酮为提取剂,不经过皂化直接提取,采用C18色谱柱,以乙腈∶甲醇=9∶1为流动相,流速0.5 m L/min,波长445 nm,柱温30℃能较好地分离及测定草莓叶叶黄素循环各组分,方法快速稳定,检测时间仅需1.2 min。强光下,玉米黄质、叶黄素循环库和脱环氧化程度均明显升高而紫黄质下降,符合叶黄素循环调控规律,证实此方法可靠。可见,实验所建立的UPLC测定方法适合草莓叶叶黄素循环组分分析。     

草莓NCED基因正反义表达载体和RNAi载体的构建

根据草莓（Fragaria ananassa Duch）NCED基因序列（GenBank： HQ399498），克隆NCED基因开放阅读框，将该片段插入植物表达载体pBI 121的CaMV 35S 启动子和NOS 终止子之间，构建了正义表达载体pBI 121NCED。克隆NCED基因正义、反义片段和作为内含子的gusA基因片段，以植物表达载体pBI 121为基础，以pCAMBIA2301作为中间载体，通过多次酶切和连接，成功构建了草莓NCED基因RNAi表达载体pBI 121NCEDRNAi和反义表达载体pBI 121NCEDF。经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后，成功将pBI 121NCED、pBI 121NCEDF和pBI 121NCEDRNA 3个重组表达质粒导入农杆菌EHA105中。研究结果为进一步研究草莓NCED基因的功能奠定了基础。