柑橘新品种‘粤农晚橘’

‘砂糖橘’为广东省栽培面积最大的柑橘品种,其品质优良,但成熟期集中于12月,市场价格颇受影响,生产上期望培育出成熟期不同的品种。2007年12月在广东省清远市飞来峡镇竹园村‘砂糖橘’园中发现1株4年生树的1条大枝结的果实着色期较其他枝条及其他植株果实明显延迟。     

晚熟柑桔新品种‘明柳甜桔’

‘明柳甜桔’是广东省农业科学院果树研究所和广东省紫金县科技局等单位于1992年在春甜桔园中发现的一个优良芽变。经过多点区域试验和品种比较试验,后代优良性状稳定一致。采用A FLP分子标记技术,证明其变异是来自DN A水平上的突变。本品种于1999年1月通过专家组现场鉴评,2006年5月通过广东省农作物品种审定委员会审定并命名为‘明柳甜桔’(见封三彩照)。1品种特征特性树冠圆头形,枝梢生长粗壮,部分有刺,叶脉明显。花小,白色,花瓣披针状,5瓣,少数4瓣;花丝长0.6厘米,基部部分连合,花柱微弯,长0.4厘米;柱头、子房扁圆形,萼片5裂,淡绿色。…     

柑橘黄龙病和衰退病的同步PCR和RT-PCR检测

柑橘黄龙病(HLB)和衰退病(CTV)是2种危害严重的世界性柑橘病害,国内外对其病原检测的研究相当多。研究建立了同时检测HLB和CTV的多重RT-PCR体系,从影响多重RT-PCR扩增的引物浓度、Mg2+浓度、Taq酶浓度、dNTPs浓度、退火温度等方面进行体系优化。结果表明,多重PCR反应的退火温度应优先考虑退火温度高的引物,退火温度高的引物所需浓度要大于相应退火温度低的引物。该体系实现了DNA病原和RNA病原的统一检测,进一步体现了多重RT-PCR的优越性。     

荔枝体胚发生过程中的细胞学观察

以荔枝三月红胚性愈伤组织为材料,采用改良的石蜡切片法观察荔枝胚性愈伤组织结构及体胚发生过程,结果显示荔枝的体胚发生经历球形、心形、鱼雷形、子叶形4个过程;荔枝在胚性细胞分裂发育形成体胚之前,出现与周围细胞明显不同的界限,形成细胞间隔离;比较荔枝胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织的细胞学特性,发现胚性愈伤组织具有核大、质浓、染色深、细胞排列紧密等特点,与非胚性愈伤组织明显不同。通过系统观察荔枝胚性愈伤组织结构以及胚性细胞分裂、生长方式和体胚发生过程,为胚性愈伤组织的利用提供细胞组织学依据。     

‘春甜橘’及其突变体果皮差异相关蛋白质组分析

【目的】柑橘自然芽变材料是柑橘育种的重要来源。‘明柳甜橘’(Citrus reticuiata Blancocv.Mingliutianju,MP)是从‘春甜橘’(C.reticuiata Blanco cv.Chuntianju,CP)中选育出的自然芽变品种。分析‘春甜橘’与其自然芽变‘明柳甜橘’果皮差异蛋白质,探讨导致两品种形态差异的原因。【方法】以花后12周和23周的‘明柳甜橘’和‘春甜橘’果皮为材料,采用双向电泳技术(Two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分离获得野生型与突变型差异表达蛋白点,利用MALDI-TOF-MS质谱鉴定技术分析相关差异蛋白质,并进行功能注释和生物信息学分析。【结果】将提取的果皮总蛋白质经双向电泳后,分别采用硝酸银和考马斯亮蓝染色法进行蛋白质凝胶染色,均获得了清晰的2-DE电泳图。2-DE图谱经Image Master 2D软件分析表明,硝酸银染色法能检测到约1 200个蛋白点,考马斯亮蓝染色法能检测到约500个蛋白质点,从中各选取20个变化丰度2倍以上且重复性好的蛋白点进行MALDI-TOF-MS质谱鉴定和数据库检索分析,共有33个蛋白质有功能注释,其中17个蛋白质在‘明柳甜橘’果皮中表达上调,16个表达下调。按照33个差异蛋白质的功能,可将其分为11类,它们分别参与糖类/能量代谢、胁迫/防御反应、核酸代谢、氨基酸代谢、转录、氮代谢、脂肪酸代谢、蛋白修饰与降解以及未知类。利用KOBAS(KEGG Orthology-Based Annotation System)在线功能分析平台对33个差异表达蛋白质进行信号通路分析,其中18个差异蛋白质有KO注释,共涉及31条信号通路,按照P值大小排列,类黄酮生物合成过程位居第一,说明该信号通路最有可能参与春甜橘芽变形成过程。【结论】综合分析‘春甜橘’和‘明柳甜橘’基因水平及蛋白质水平的差异,推测可能是由参与类黄酮生物合成过程的差异表达基因尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因和差异表达蛋白咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶的差异表达导致了二者的表型差异。     

枳感染柑橘衰退病病毒后的应答基因分析

 枳（Poncirus trifoliata L.）高抗柑橘衰退病病毒（Citrus tristeza virus,CTV）,但相关抗性机理仍不为人所知。以嫁接健康枝条的无毒枳作为对照,用Affymetrix柑橘基因芯片分析了感染CTV后枳叶片中基因的表达变化情况。结果共检测到表达量差异倍数≥ 2的基因295个,其中216个表达上调,79个表达下调。BLAST2GO分析发现,差异表达的基因中与抗逆反应相关的基因最多,乙烯、茉莉酸、赤霉素、脱落酸、生长素、水杨酸等植物激素代谢和调节相关基因为数不少,一些编码细胞壁形成或组分相关蛋白的基因差异表达明显。本研究可为揭示枳抗CTV的机理提供了转录组学线索。     

应用抑制性差减杂交技术筛选锦橙CTV应答基因

【目的】探讨易感柑橘衰退病病毒（Citrus tristeza virus,CTV）品种锦橙CTV应答分子机理,筛选和分析CTV应答基因。【方法】以嫁接CTV强毒株TRL514的锦橙阳性材料叶片为试验方（Tester）,用嫁接无毒枝条的CTV阴性锦橙叶片为驱动方（Driver）,构建CTV侵染的锦橙的正向差减文库。【结果】随机挑选850个阳性克隆测序,其中742条测序成功,去除载体片段和接头序列后得到有效EST 692条。将所有EST序列对应到柑橘的预测基因组转录物,共涉及137个柑橘基因。应用BLAST2GO对这些特异性表达的基因进行功能归类和KEGG分析。结果表明,受CTV侵染的影响,锦橙能量代谢相关基因上调明显,与光合器官碳固定、氮代谢、淀粉和蔗糖代谢等途径相关的EST出现频率较高。另外,与抗逆防御以及苯基丙氨酸合成、类苯基丙烷代谢、类胡萝卜素合成等与植物防御素类物质合成密切相关的代谢途径相关基因较多。【结论】由于CTV的侵染,CTV易感品种锦橙基础代谢改变明显,须通过增强能量代谢和提高自身防御能力来维持自身生长和发育。     

黄皮早结优质高效栽培技术

种植黄皮,应结合生态建园,培育容器壮苗,合理密植和整形修剪,适时疏花疏果和果实套袋,科学施肥,有效控制和利用杂草、防治病虫害,以实现早结优质高效德目标.     

两种砧木对年橘果实品质与产量的影响

AIM: To investigate the effect of ovariectomy (OVX) and simvastatin (SVS) on the expression of osteoprotegerin (OPG) in bone callus of rats. METHODS: Simvastatin (10 mg穔g^-1穌^-1) was injected subcutaneously to tissue overlying the site of fractured tibiae of ovariectomized rats for a treatment period of 5 days. Vehicle reagent was used as control in sham and OVX rats. Bone callus were harvested at time points of 1, 2 and 4 weeks after fracture and the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) and OPG was measured by the method of immunohistochemistry. RESULTS: Compared with OVX+vehicle group, the expression of PCNA decreased by 17.3%, 32.1% and 26.1% in OVX+vehicle group than that in sham+vehicle group (P<0.01), and increased by 60.1%, 67.7% and 67.7% in OVX+SVS group (P<0.01) at the time points of 1, 2 and 4 weeks after fracture, respectively. The expression of OPG was the lowest in OVX+vehicle group. The significant differences of OPG expression between OVX+SVS group and OVX+vehicle group at the 3 time points (P<0.01), and significant differences of OPG expression between sham+vehicle group and OVX+vehicle group at 1st week and 2nd week after fracture (P<0.05) were observed. CONCLUSION: Ovariectomy decreases the expression of OPG in bone callus of rats, while simvastatin increases it, indicating that simvastatin can indirectly inhibit the function of osteoclasts.     

杨桃草酸的分布及其果实草酸含量变化的研究

采用离子色谱法对新加坡甜杨桃和广州本地酸杨桃的叶、叶柄、根和不同发育时期的果实及其不同部位进行了草酸含量的测定,同时对不同施肥处理、热水处理的甜杨桃果实分别进行了草酸含量的测定。结果表明,杨桃果实草酸含量先迅速上升,然后逐渐下降,谢花80d左右处于低峰值;杨桃叶片的草酸含量最高,果肉的草酸含量最低;施有机肥可有效降低甜杨桃果实水溶性草酸含量;热水处理3 min可降低果肉水溶性草酸含量42%以上。