无乳链球菌dnaJ基因缺失株的构建及其致病性研究

为研究dnaJ基因序列与细菌致病力的关系,本研究构建了dnaJ基因缺失株和互补株,并对其致病性进行验证。参照GenBank中无乳链球菌GD201008-001(登录号:NC_018646)目的基因序列分别设计引物,PCR克隆dnaJ基因上、下游同源臂基因序列,通过融合PCR将两个片段连接到一起,构建dnaJ基因上、下游同源臂融合片段,PCR克隆含有启动子序列的dnaJ基因。将dnaJ基因上、下游同源臂融合片段和含有启动子序列的dnaJ基因分别连接链球菌-大肠杆菌穿梭质粒pSET4s和pSET2,电转化GD201008-001感受态细胞,构建dnaJ基因缺失株ΔdnaJ和互补株CΔdnaJ。通过分析ΔdnaJ和CΔdnaJ的遗传稳定性与形态学变化对dnaJ上、下游基因转录的影响,以及生长速率和斑马鱼攻毒试验评价dnaJ基因对无乳链球菌毒力的影响。经PCR鉴定和测序证明,ΔdnaJ和CΔdnaJ构建成功;与野生株GD201008-001相比,ΔdnaJ和CΔdnaJ在细菌染色形态上均无明显差异,但ΔdnaJ在液体培养基中的生长速度明显减缓;dnaJ基因的缺失未对相邻基因的转录造成影响;ΔdnaJ对斑马鱼的毒力明显下降,对斑马鱼的LD_(50)为5.68×10~4 CFU,约是野生株的241倍。dnaJ基因对无乳链球菌的毒力有显著影响,本试验结果为进一步探究无乳链球菌dnaJ基因的功能提供了参考依据。     

雅安 500种鸟的欢唱

<正>雅安是鹛类和雉类的乐园,也是中国最著名的"模式标本产地"。随着全国乃至世界各地鸟类爱好者更多地走进雅安,这里发现越来越多的鸟种。四川雅安地处成都平原与青藏高原过渡地带,北纬30°穿越全境,境内有蜂桶寨-硗蹟、喇叭河自然保护区、二郎山、栗子坪自然保护区等4个中国重点鸟区,处于全球八大候鸟迁徙通道之一的东亚—澳大利亚迁徙通道之上。     

提升学生企业管理综合能力的改革与探索

根据我院机械制造专业群人才培养目标，主要培养生产、管理与服务第一线的高素质技术技能型专门人才。学生主要从事生产一线的操作、技术和管理工作，是企业的基层组织。因此，加强学生企业基层管理教学工作，从而提升学生企业管理综合能力和就业竞争能力。本文围绕提升学生企业管理综合能力进行了改革和探索。     

泾县竹产业发展探索

正泾县现有竹林面积26万余亩,是安徽省重点竹产区之一,竹林资源优势突出,竹产业发展潜力巨大。经过多年的努力,泾县竹产业具备了良好的发展条件和难得的发展机遇。一是近年来,随着林业产业向纵深发展和林业生产结构的调整,特别是一些国家林业重点工程的实施,各地大力发展竹林、林农营造竹林积极性高涨;二是国家林业局高度重视竹产业发展,《林业发展"十三五"规划》将竹产业发展列为大力发展的特色产业之一,并编制出台了《全     

大西洋鲑工厂化人工苗种培育技术

正大西洋鲑(Salmon salar),属鲑形目,鲢科,鲑属,俗称"三文鱼",是一种冷水洄游性鱼类。20世纪60年代,国外开始三文鱼人工养殖(主要是网箱养殖),由于三文鱼的营养价值高,逐渐被全世界消费者所接受,目前全世界养殖产量已经达到了350万t。我国的三文鱼市场份额已达到了130亿美金,目前国内的三文鱼养殖产量远远不能满足需求,仍然需要大量进口以满足国内消费者需求,进口三文鱼     

红肉火龙果新品种‘金都1号’

 ‘金都1号’火龙果是从中南美洲火龙果原种（Hylocereus costaricensis）与红肉种（H. polyrhizus）的杂交后代中选育出的新品种。果实短椭圆形，平均单果质量572.5 g，果肉深紫红色，可溶性固形物含量21.2%，可食率78.8%，味清甜，有玫瑰香味，品质优。生长健壮，易成花，自花亲和性好，丰产稳产性好，不易裂果，适宜在广西桂南及华南气候相似地区种植。     

汀步在园林中运用探讨

本文结合工程实例,介绍了汀步在园林中的运用,探讨了施工要点。     

抗四环素单链抗体基因表达及免疫学活性检测

为原核表达抗四环素的单链抗体(Sc Fv),并进行免疫学活性的初步测定,将前期克隆的四环素Sc Fv全长基因克隆到p ET-24a载体后转化入大肠杆菌BL21工程菌;IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,间接ELISA分析纯化的表达产物的免疫活性。通过酶切鉴定法、DNA序列测定,证明目的基因构建正确,SDS-PAGE和间接ELISA分析显示表达蛋白为27.8 ku,纯化后的蛋白免疫学活性良好。表明成功表达了具有免疫学活性的四环素Sc Fv,为四环素的药物残留检测方法建立奠定了基础。     

山羊CPT1A基因的克隆表达及肌内脂肪含量的相关性分析

旨在获得山羊肉毒碱棕榈酰基转移酶Ⅰ肝脏亚型CPT1A(Carnitine palmitoyltransferase 1A,CPT1A)基因序列,分析其生物学特征,阐明其组织及细胞分化时序表达规律,同时揭示CPT1A基因在背最长肌、股二头肌、臂三头肌中与肌内脂肪含量(IMF)的关系。选取7只1周岁健康简州大耳羊为试验动物,屠宰后迅速采集心、肝、脾、肺、肾、背最长肌、股二头肌、臂三头肌、皮下脂肪和腹间脂肪组织样品,利用TRIzol法提取总RNA。采用RT-PCR法克隆山羊CPT1A基因,进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR技术检测CPT1A基因在不同组织中的表达水平以及CPT1A在山羊前体脂肪细胞分化过程中的时序表达。使用皮尔逊相关系数进行CPT1A基因表达量与IMF含量相关性分析。通过克隆得到CPT1A基因序列(MH345735)为2 380 bp,包含CDS全长2 319 bp,5′UTR 38 bp和3′UTR 23 bp,编码773个氨基酸。组织表达结果显示,CPT1A在简州大耳羊肝脏和肾脏中的表达水平极显著高于其他组织(P0.01)。细胞时序表达定量结果显示,CPT1A在诱导分化0～5 d逐渐升高,在第5天表达量最高(P0.01),5～9 d逐渐下降。CPTA基因表达量与IMF含量相关性分析结果显示,CPT1A基因表达量与各肌肉组织肌内脂肪含量均显著正相关。结果表明,CPT1A可能在肌内脂肪沉积过程中具有重要调控作用,为进一步研究CPT1A调控山羊脂质代谢的机理研究提供参考。