植物病毒载体介导的可溶性甲烷单加氧酶B亚单位在蚕豆植物中的表达

用基因操作技术将编码可溶性甲烷单加氧酶B亚单位（Soluble Methane Monoxygermse-B component：SMMO-B）的基因全长序列导入来自三叶草黄脉病毒（Clover yellow vein virus；CIYVV）侵染性全长cDNA克隆的侵染性植物病毒表达载体pCIYVV／CP／W基因组的NIb／CP基因之间，构建了重组病毒克隆pCV—mmoB。用上述重组病毒克隆接种该病毒的自然寄主植物蚕豆，表现了与野生型CIYVV相同的症状。RT—PCR检测结果表明，子代病毒基因组中的外源基因获得了转录。蛋白质杂交（Western blotting；WB）检测结果表明，sMMO—B亚单位蛋白在被重组病毒克隆侵染的寄主植物中获得了表达。     

马铃薯Y病毒复制酶基因植物表达载体构建及转基因烟草的培育

用ＢａｍＨＩ／ＫｐｎＩ从重组克隆ＰＺＤ－１中切下马铃薯Ｙ病毒脉坏死株系复制酶基因，将其插入质粒ＰＲＯＤ２相庆切点中构成植物表达载体。用重组ｐＲＯＤ２转化农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４菌株，通过重组农杆菌侵染叶盘将复制酶基因转入烟草品种ＮＣ８９中获得转基因植株。分子生物学检测结果表明，复制酶基因在转基因烟草中获得品种ＮＣ８９中获得转基因植株。分子生物学检测     

植物抗病毒基因工程策略及其研究进展（Ⅱ）

植物抗病毒基因工程策略及其研究进展（Ⅱ）王振东，房德纯（沈阳农业大学植保系）二、复合基因策略复合基因策略是提高工程植株抗性的有力途径。目前采用的复合基因策略有３种，即两种不同基因控制一种病毒，多种基因控制病毒的混合侵染及抗虫基因和抗病基因结合控制一种...     

大白菜芜菁花叶病毒简化提纯程序的研究

大白菜芜菁花叶病毒(TuMV)沈阳分离物,是本研究组分离和纯化的毒原。在无虫温室中以人工接种于大白菜(小白口)叶片,适期收获,称重,冰冻过夜。次日加适量0.02M磷酸缓冲液,pH7.2匀浆。并进行差速离心;低速离心3000rpm,30分钟去寄主细胞器,取上清液搅拌加4％聚乙二醇(PEG—MW6000)及3％NaCl(W/V),搅拌沉淀病毒粒体,进行一系列低速及超速离心。超速离心后的沉淀物用0.01M磷酸缓冲盐液(含0.015M尿素)悬浮,得到纯化的TuMV制品。经电子显微镜检查,提纯物中含有大量单个非集聚的TuMV粒体。粒体平均长度为720nm,结构保持良好,粒体断裂现象很少。提纯物经指示植物接种测定,具侵染性。这一简化提纯法可以免去蔗糖密度梯度离心等过程,取得较为相似的效果。     

脚缚式种子点播器的试验与研究

脚缚式种子点播器是一种缚在脚上，利用人的行走重力即可完成种子点播工作的小农具。这种点播器最适用于农作物的行间套种．亦可用于连后点播或颗粒肥料点穴施肥。具有结构紧凑、价格低廉、能精量点播、改善劳动条件、降低劳动强度、加快抢种速度等特点。该点播器已由国家专利局受理实用新型专利。农诈物的行间套种与茬后点播，传统的方法是一人用极头挂穴．后面跟一人技种、掩土、镇压。每点播一穴，挖穴入和投种人都需要弯腰弓背一次，劳动条件差、强度大、效率低。特别是在套种措穴时，还会将农作物磁倒．给机械化收割造成困难。为此需设…     

柞蚕微孢子虫侵染后柞蚕5龄雌雄个体血淋巴蛋白质含量和组成的变化及差异分析

以柞蚕5龄幼虫为材料添食柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi,Np),通过测定与分析不同性别5龄幼虫血淋巴蛋白质含量和组成变化的差异,为探究柞蚕对柞蚕微孢子虫感染的免疫应答提供依据。感染柞蚕微孢子虫的不同性别柞蚕5龄幼虫的血淋巴蛋白质含量随蚕体发育进程出现不同的变化:雌性个体与雄性个体分别在添食Np后24 h与48 h,血淋巴蛋白质含量极显著增加(P<0.01),且持续至添食后96 h,其中雌性个体的血淋巴蛋白质含量又极显著高于雄性个体(P<0.01);在添食Np后120 h,雌、雄个体的血淋巴蛋白质含量与对照组无显著性差异(P>0.05)。SDS-PAGE分析表明,添食Np后的柞蚕5龄幼虫血淋巴蛋白质组成与对照组基本一致,均显示出20条分子质量在20.1～97.2 kD的蛋白条带,其中雌、雄个体在添食后96 h,大小约44 kD的蛋白条带明显加深,大小约28 kD的蛋白条带雌性个体在添食后144 h、雄性个体在添食后120 h明显加深,且雄性个体在添食后120～168 h大小约42 kD的蛋白条带明显加深,但在添食后192 h与对照组无明显差异。研究结果说明Np侵染后,柞蚕5龄幼虫血淋巴蛋白质的含量及组成均产生了一定的变化,并且雌雄个体间的变化存在差异。     

山桃稠李育苗技术探讨

分析了山桃稠李的生物学特征、分布区域和生活习性及用途,在实践和探讨的过程中,总结了培育山桃稠李苗木的经验,并详细地探讨了山桃稠李育苗的主要技术和具体管理措施。     

气缸垫冲坏的象征及原因

气缸垫冲坏的象征及原因气缸垫冲坏的主要表现：气缸垫向外漏水,有泡沫或气流声;气体渗入冷却水套导致水箱口冒气泡,严重时向外喷气,象“开锅”一样;若水漏进气缸,则排气管冒白烟,重者向外喷水。气缸垫冲坏的原因有：缸盖螺母的紧度不一致或紧度不够;发动机过热而...     

马铃薯Y病毒普通株系外壳蛋白基因的克隆与原核表达载体的构建

本研究报道马铃薯Ｙ病毒普通株系外壳蛋白基因ｃＤＮＡ克隆,全序列分析及其原核表达载体构建的结果。从感染ＰＶＹ的烟草叶片中提取病毒粒体,ＳＤＳ－酚法提取病毒核酸。以所提核酸为模板,用一对ＰＶＰＣＰ基因引物进行ＲＴ－ＰＣＲ,扩增了０．８０ｋｂ的特异性核苷酸片段。该片段大小五国外报道的ＰＶＹ ＣＰ基因一致,将ＰＤＲ产物插入到克隆载体ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）中转化大肠杆菌ＤＨ５α。     

库尔勒香梨叶螨种类初步鉴别及药剂防治研究

通过形态特征的观察及业内专家研究结论,初步鉴定香梨园发生叶螨的种类为二斑叶螨。通过分析不同化学药剂的田间防效,主要包括卵及成虫的致死率,确定20%阿维乙螨唑悬浮剂与30%乙唑螨腈悬浮剂混配防治效果最好。