有齿食道口线虫msp基因的克隆与表达

以有齿食道口线虫为研究对象,扩增出其雄虫的msp基因,克隆至质粒载体pTrcHis-B中,构建了msp基因重组原核表达载体.经测序表明,目的基因msp已以正确的阅读框架整合至表达质粒中.应用大肠杆菌Top10为宿主菌,通过IPTG诱导方法,表达包含msp基因产物的融合蛋白,经SDS-PAGE分析,表明表达蛋白大小正确,表达量高.     

弓首蛔虫和狮弓蛔虫线粒体nad1基因部分序列多态性研究

[目的]对弓首属犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫、马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫和狮弓属狮弓蛔虫线粒体DNA（mtDNA）中烟酰胺脱氢酶亚基Ⅰ（nad1）基因部分序列（pnad1）进行比较研究，分析它们之间的序列差异和种群遗传关系。[方法]先用同位素（γ^33P）标记上下游引物，通过PCR方法扩增出单个虫体线粒体pnad1片段，然后采用单链构象多态性（SSCP）分析技术对pnad1片段进行多态性研究，最后挑选出代表性样品进行测序，并利用基因分析软件DNAStar（版本5．01）对序列进行分析比较。[结果]犬弓首蛔虫种内pnad1基因序列差异为0．3％-1．9％，与猫弓首蛔虫、马来亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫和狮弓蛔虫的种间序列差异分别为11．0％～14．1％、10．7％～12．4％、12．6％～13．7％和17．5％～18．2％。猫弓首蛔虫种内pnad1基因序列差异为2．8％，与马来西亚弓首蛔虫、牛弓首蛔虫和狮弓蛔虫的种间序列差异分别是12．0％～13．0％、15．1％和18．6％～21．2％。马来西亚弓首蛔虫种内pnad1基因序列差异为0～0．3％，与牛弓首蛔虫和狮弓蛔虫的种间序列差异分别是12．4％～12．8％和18．6％～19．0％。[结论]犬弓首蛔虫、猫弓首蛔虫和马来西亚弓首蛔虫不同地方虫株的pnad1序列都有一定差异（0～2．8%）。但种间pnad1的序列差异（10．7％～21．2％）明显高于种内的序列差异，说明nad1基因可以作为弓首蛔虫和狮弓蛔虫分子分类及种群遗传关系研究的遗传标记。     

犬源华支睾吸虫28ku谷胱甘肽S-转移酶的原核表达与反应原性分析

本研究提取犬源华支睾吸虫总RNA,应用RT-RCR技术扩增28 ku谷胱甘肽S-转移酶(Cs28GST)编码基因,PCR产物经T/A克隆后,亚克隆入pET一30a(+)原核表达载体,构建重组质粒pET-Cs28GST,转化大肠埃希茵BL21(DE3),异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达;表达产物经十二烷基磺酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹分析和鉴定,研究结果显示犬源Cs28GST编码区含有639个碱基,编码212个氨基酸残基,表达的蛋白以包涵体形式存在,大小约为30.6 ku,可被自然感染华支睾吸虫病犬的阳性血清识别,证明Cs28GST基因可在原核表达系统中高效表达并具有反应原性.     

弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能研究进展

刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）是一种重要的人兽共患寄生原虫，具有中间宿主广泛、生活史复杂、传播方式多样、呈全球性分布等特点，可感染几乎所有的恒温动物，导致人兽共患的弓形虫病。弓形虫慢性感染约1/3的世界人口，对免疫缺陷患者、孕妇、孕畜的健康更是造成严重威胁。致密颗粒蛋白是由致密颗粒（弓形虫的一种亚细胞分泌器官）分泌的蛋白质，它们可通过操控宿主（细胞）基因表达、信号通路进而调控宿主细胞的免疫反应和细胞周期，并在蛋白质的转运和定位、营养物质的摄取、纳米管网络（IVN）的形成与稳定性的维持、逸出、慢性感染等生理过程中发挥重要作用。本文综述弓形虫致密颗粒蛋白基本生物学功能的最新研究进展，旨在为深入研究弓形虫的致病机制、鉴定新的抗弓形虫潜在药物靶点和疫苗候选分子提供借鉴。