鸡RNF165蛋白多克隆抗体制备及其生物信息学分析

【目的】 制备鸡环指蛋白165（RNF165）多克隆抗体并对RNF165蛋白进行生物信息学分析,以期为研究鸡RNF165的生物学功能提供参考。【方法】 以鸡胚成纤维细胞（DF-1）为试验材料,提取总RNA,反转录获得cDNA,通过PCR扩增RNF165基因,将其连接至pET-28a （+）质粒构建重组表达质粒pET-28a-RNF165。将测序正确的重组表达质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达,将表达的融合蛋白纯化后按照制定的免疫程序免疫7周龄BALB/c雌鼠。第3次免疫7 d后,分离小鼠血清,用Western blotting检测鼠抗RNF165蛋白多克隆抗体的特异性,间接ELISA法测定其效价。使用在线生物信息学软件对RNF165蛋白理化性质、信号肽、磷酸化位点、亚细胞定位、跨膜结构、二级结构和保守结构域进行分析。【结果】 成功扩增得到大小为1 068 bp的RNF165基因。成功构建原核表达载体pET-28a-RNF165,并诱导表达出约43 ku的RNF165蛋白。Western blotting结果显示,制备的鼠抗RNF165蛋白多克隆抗体能特异性识别DF-1细胞中过表达的RNF165蛋白,效价为1：32 000。生物信息学分析结果显示,RNF165蛋白由350个氨基酸组成,分子质量为39.88 ku,等电点为7.13,不稳定指数为69.87,为亲水性蛋白,不含信号肽和跨膜结构域,有29个磷酸化位点;RNF165蛋白二级结构主要由无规则卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角组成;RNF165出现在细胞核内的概率最高,为47.8%;RNF165蛋白质C-端296―341位氨基酸残基为RING-Ubox超家族保守结构域。【结论】 本研究所制备的鼠抗RNF165多抗隆抗体具有较高的反应性和特异性,RNF165蛋白为亲水性蛋白,主要在细胞核内表达,结果可为研究RNF165蛋白的生物学功能提供材料支持。     

北方园林中冬季植物景观的表现

冬季在我国北方是一年四季中最长的季节 ,园林中冬季植物景观的表现是设计中的难点 ,为了表现好冬季园林中的植物景观 ,应做到常绿针叶树与落叶树并重 ,适当点缀常绿阔叶树 ,同时应加强冬态管理。     

曹州木瓜果实香气物质的研究

利用顶空固相微萃取法提取芳香物质,气相色谱-质谱联机定性定量分析,测定曹州木瓜狮子头、剩花、豆青和玉兰的挥发性物质,并对木瓜不同品种的香气组分进行分析探讨.共测定出145种香气组分,曹州木瓜狮子头、剩花、豆青和玉兰分别为70、70、69和70种,各自占总峰面积的99.88%、99.7%、99.97%、99.37%,以醇类、醛类、烯烷类、酮类、酯类、杂环类等为主,其中又以C6醇(如1-己醇、2,4-己二烯-1-醇、反式-2-甲基-环戊醇等)、C6醛[(E)-2-己烯醛、2-己烯醛、E,E-2,4-己二烯醛等]居多.结果表明:狮子头、剩花、豆青和玉兰不同品种香气组分存在一定的差异,但大部分主要组分相同;主要组分含量差异是曹州木瓜不同品种间香气不同的主要原因.     

塞罕坝地区湿地资源及其保护对策

通过对塞罕坝地区范围内湿地资源的调查、汇总和分析,结果表明:此区湿地类型众多,面积达5088.5hm2;湿地植物种类比较丰富,有48种之多;以湿地为生境的鸟类有50多种。说明了湿地资源的丰富性、多样性及重要性,并对其存在的问题及解决方法进行了初步的探索。     

补充光照对欧洲云杉苗木生长的影响

光周期具有抑制苗木早期休眠,延长其生长期的作用,具有促进欧洲云杉苗木生长的作用,其在形态指标和生物量上表现得极显著.欧洲云杉大棚育苗补充光照的完整技术可采用整夜补光,随着光强度的增加,苗木生长形状各指标呈渐增的趋势.光质以白光较好.     

杭州城区高架桥绿化现状与植物的选择

分析了杭州市城区高架桥(含立交桥，下同)绿化植物品种，探讨了高架桥绿化植物品种的选择方法，并提出了高架桥绿化养护保水第一的观点。     

鸟的“特异功能”

苍蝇造成火车相撞１９９２年１０月，在英国的肯特郡，有两列火车相撞，造成５人死亡，近百人受伤。经查，肇事者竟是苍蝇。原来是苍蝇屎从里面弄脏了铁路交通信号灯的红色信号透镜，信号灯光变得十分暗淡，加之天气有雾，以致酿成大祸。据分析，是信号灯的热量把苍蝇招进里面过冬。信号灯里面即使是最冷的天气，也能达到３０℃～３５℃。老鼠引发火灾１９８１年３月，日本东京的一座１０层大楼—雅云大厦发生火灾，烧死１人，烧伤２０人。１９８３年１０月１日，四川省宜宾市的一家百货公司仓库失火，烧毁价值两万余元的物资。这两起火灾的…     

核桃楸光合特性的初步探讨

<正> 核桃楸(Juglans mandshurica Maxim.)是东北三大珍贵硬阔树种之一,它材质好,果仁营养丰富,又可供药用。在小兴安岭、长白山和辽东山区的河谷两岸及山麓分布较多,河北、山东、山西、河南等地以及西伯利亚、朝鲜、日本等国均有分布。为了扩大发展这一珍贵树种,了解和掌握该树种的生态生理特性是     

地涌金莲引种及其栽培技术

对引进的地涌金莲进行生长特性观察和栽培技术研究的结果表明：地涌金莲适应性强，栽培管理较简单粗放。能在我市正常生长并开花。且花期较长、花形奇特、花色艳丽，是一种具有潜力的园林绿化植物。     

沙棘产业化发展初探

沙棘,又名酸刺、黑刺,属胡颓子科沙棘属,是具有共生固氮能力的野生落叶灌木。根系发达,萌蘖力强,不但是保持水土和改良土壤的优良树种,同时也是经济价值较高的经济树种。隆德县位于宁夏回族自治区南部山区六盘山西麓,属大陆性季风气候,处在中温带半湿润向半干旱过渡地带,气候条件适宜沙棘的生长。