猪细胞因子cDNA表达文库的构建及其基因的克隆鉴定

为克隆和研究猪细胞因子及相关基因,应用建库试剂盒成功构建了猪细胞因子cDNA表达文库。采取健康猪外周血及淋巴结,分离单个核细胞,经LPS PHA联合刺激不同时间后,提取总RNA。将各组样品混合,分离纯化mRNA。反转录合成cDNA第一链和第二链,与EcoRI和HindⅢ接头连接。酶切和过柱分级分离后,与λScreen载体连接,经体外包装转染E.coliER1647宿主菌,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆猪IL-2和IL-4的cDNA并进行测序。结果表明,成功构建了猪细胞因子cDNA文库,文库原始库容量为8×105,插入片段在300~2 000 bp,扩增得到特定的IL-2和IL-4基因,说明文库质量高、代表性强,为进一步从文库中筛选未知细胞因子及相关基因提供了有效的工具。     

畜产品供应链中的动物疾病与食品安全

随着科技进步和经验的积累,养殖业得到不断发展,人类膳食结构中肉食品的比例越来越高.然而,人类在享受动物性食品的同时,也受到动物疾病,尤其是人畜共患病的挑战.     

动物防疫监督案件中的笔录制作

证据是当事人用来证明其诉讼请求或进行答辩的主要手段,也是人民法院用来查明案情、作出裁判的主要手段和依据。《行政诉讼法》31条规定,证据可分为书证、物证、视听材料、证人证言、当事人陈述、鉴定结论和勘验笔录、现场笔录7种。在动物防疫监督案件中运用最多的是勘验笔录、现场笔录。下面就动物防疫监督案件中如何作好现场调查询问笔录,保证案件的准确性、可靠性,谈一下个人粗浅的认识。现场笔录是专指行政机关及其工作人员在执行职务过程中,在实施具体行为时,对某些事项当场作的能够证明案件事实的记录,又称为当场笔录。在动物防疫监督…     

动物防疫检疫工作的建议对策

畜禽产品肉、蛋、奶是“菜篮子”工程的主要内容,它涉及千家万户,提高动物防疫及动物产品检疫工作,直接关系着人们的生活与健康,这是防检工作神圣的职责。随着市场商品经济的发展,我们将会面临更多、更新、更为严峻的挑战,如何结合洛川实际,适应新形势需要,发挥动物检疫工作的作用,是摆在地方防检人员面前复杂而严峻的课题。1加大宣传力度,提高全民的守法意识《中华人民共和国动物防疫法》的颁布和实施,将动物防疫工作纳入法制化轨道。首先让公民学法、懂法并守法,不断加大《防疫法》和<陕西省实施《动物防疫法》办法>的宣传力度,利用广播、…     

牛肉中替米考星残留的高效液相色谱检测方法研究

试验对国外现有报道的替米考星残留样品提取方法和检测方法进行改进和优化,建立牛肉中替米考星残留的HPLC检测方法,并对该方法的灵敏度、准确度以及精密度进行研究。1材料与方法1.1试验仪器与试剂高效液相色谱仪(Agilent 1100系列),紫外检测器;固相萃取(SPE)柱(Waters,C18,500     

哺乳动物精清诱导排卵活性蛋白质研究

在动物的精清里包含一些与动物生殖生理活动密切相关的活性蛋白和多肽.驼科动物的双峰驼、美洲驼、羊驼和澳洲考拉等哺乳动物精清中含有类似促性腺激素释放激素(GnRH)作用的活性蛋白质,诱导排卵因子(ovulation inducing factor,OIF),它能引发外周血液中促黄体素(LH)峰浓度的出现和诱发母畜排卵.OIF被认为是一种新的生物活性蛋白质或潜在的新型激素.甚至报道在牛等自发排卵动物以及人精清中也存在类似的活性蛋白.这类因子的发现对于哺乳动物生殖生理及繁殖的深入研究具有重要的意义,有助于动物克服繁殖障碍及繁殖疾病的治疗等.     

无公害蔬菜生产的施肥技术

近年来,由于蔬菜生产中农药、化肥的超量使用,造成蔬菜产品中有害物质大量积累,严重影响到人民群众的身体健康。因此,蔬菜生产必须向无公害方向发展。以确保蔬菜中硝酸盐及其它有害物质的含量不超标。下面仅就无公害蔬菜生产中的施肥技术做一简要介绍。1无公害蔬菜生产的肥料种     

柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建

在无RNase污染的环境下,提取柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)子孢子RNA,进而纯化mRNA,采用Oligo(dT)引物反转录合成cDNA第一链和第二链,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头。将所产生的cDNA分子定向克隆到具有EcoRⅠ/HindⅢ黏性末端的λSCREEN载体的两臂之间。用Phage Maker extract对以上连接产物进行体外包装,形成完整的噬菌体,并用该噬菌体转染大肠杆菌ER1647,进行文库容量测定和扩增。以扩增文库的DNA为模板,利用已知基因引物克隆E. tenella3-1E基因,并进行测序。结果表明,成功构建了E. tenella孢子化卵囊子孢子的cDNA文库,文库原始库容量约为4×106pfu/mL,插入片段约100~3000 bp,扩增得到特定的E. tenella3-1E基因,说明文库质量高、代表性强,为进一步从文库中筛选相关基因提供了有效的工具。     

斯氏艾美耳球虫的致病性及病理学研究

用纯种斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊人工感染25只断奶幼兔,进行致病性和病理学研究。试验兔分为1个不感染对照组和4个感染组,各感染组每只幼兔分别口服感染2.0×103、1.0×104、5.0×104、2.5×105个孢子化卵囊。与对照组相比,接种2.0×103个和1.0×104个孢子化卵囊的两个感染组的平均病变记分、肝重指数、血清转氨酶活性有显著差异(P<0.05);接种5.0×104个和2.5×105个孢子化卵囊的两个感染组上述指标有极显著差异(P<0.01)。表明斯氏艾美耳球虫对幼兔具有很强的致病性,能导致严重的肝球虫病。     

木瓜海棠的修剪经验

通过十多年木瓜海棠的栽培,摸索一些以修剪为中心的配套技术,年年花果满树,其主要经验:1、木瓜海棠花芽为混合芽,1～2年生枝条