延边猪巴氏杆菌的分离与鉴定

本文对近年来引起延边猪突然死亡的主要病毒进行分离鉴定,进而为疫苗的研发奠定基础,通过对致病细菌培养、细菌形态学观察、细菌培养特性鉴定、细菌生化鉴定、动物接种以及药敏试验的方法对延边猪巴氏杆进行分离培养与鉴定。试验结果表明该病菌于厌氧条件在兔鲜血琼脂平板生长状态良好;革兰氏染色呈阳性,镜检呈圆形、链状;甲基红试验呈红色;能够产生H2S气体;药敏试验该菌株对阿莫西林和先锋V高度敏感。从疑似发生延边猪巴氏杆菌病患猪的肺脏和淋巴结中可以分离到巴氏杆菌。     

嘉陵江合川段秋季微生物多样性研究

为了解嘉陵江合川段秋季微生物多样性,通过16S rRNA基因扩增和测序分析了2017年9月嘉陵江合川段利泽、渠江口、涪江口、草街4个监测点水样和底泥微生物的多样性和种类结构。结果显示:河流上下游水体中微生物物种组成相似、有延续性,利泽和涪江口,渠江口和草街水体中微生物组成均呈现相似;底泥中微生物组成与小区域水文环境相关,涪江口和渠江口水文环境相似,底泥中微生物群落结构也呈现相似;缓流环境更适应微生物生存繁殖,处于监测尾端的草街水体和底泥中微生物数量最多;环境影响因子中总磷、总氮和pH对水体中微生物群落结构组成表现出较大影响;水体中变形菌门、放线菌门、拟杆菌门和蓝细菌门较为丰富,显示该水域有富营养化的趋势。     

斑点叉尾鮰套肠病的防治

2009年3～5月,重庆某渔场饲养的斑点叉尾鮰发生了一种非常严重的暴发性疾病。3月中旬,小叉尾鮰始发鱼病,13死亡量在5～15kg左右。26日大叉尾鮰出现相同症状,也开始死亡。随着水温日益升高病情发展迅速,造成损失极为严重。截至5月11日,叉尾鮰共死亡6465kg,在极短的时间内造成了极其严重的经济损失。经检查诊断是叉尾鮰套肠病。     

新乐市地表基质有机碳储量变化趋势及影响因素

为探究有机碳储量在地表基质中的变化趋势及影响因素，利用新乐市2005年和2021年两期数据，按地表基质类型划分方式计算新乐市地表基质有机碳储量，分析新乐市地表基质有机碳储量的变化趋势及决定因素。结果表明，2005-2021年，新乐市地表基质有机碳总储量呈增长趋势；表层平均有机碳含量和单位基质碳含量均与基质粒径大小呈负相关；表层(0～0.2 m)平均有机碳含量增长率与基质粒径大小呈负相关；深层(2.0 m)平均有机碳含量增长率与基质粒径大小呈正相关。新乐市地表基质有机碳总储量处于增长趋势，其中粗骨土中有机碳储量减少的主要因素是河道采砂造成地表基质破坏，有机碳流失；砂土和壤土中有机碳储量呈增长的主要因素是植树造林和合理的农业活动。     

玉米COBRA基因家族分析及重要成员ZmCOBL03基因编辑

利用生物信息学的方法分析玉米COBRA家族10个成员的序列特征、与其他物种的进化关系和组织特异性表达模式。结果表明,10个COBRA家族基因都含有CCVS保守结构域,并且均定位于细胞膜上。系统进化分析结果显示,该家族可以分为2个亚族,每个亚族内的基因具有相似的基因结构和理化性质。以ZmCOBL03为候选基因开展基因编辑,采用双靶标位点的设计思路,利用农杆菌介导的玉米遗传转化技术和CRISPR/Cas9基因编辑技术,成功获得ZmCOBL03基因靶向突变的玉米株系。表型分析证实,ZmCOBL03基因突变后严重影响了玉米的正常发育,表现为植株极端矮化且生殖生长受到抑制,证实ZmCOBL03基因在植物细胞壁纤维素合成中发挥重要作用。     

重庆市本土黄鳝全人工繁殖技术研究

<正>重庆作为美食之都，黄鳝在老百姓日常生活中广受欢迎，消费需求非常大。由于野生资源的过度捕捞，以及本土黄鳝全人工繁殖技术尚未突破，导致人工养殖规模和产量较小。2021年重庆市黄鳝产量只有789吨，在全国排名第7位，完全不能满足消费需求，市场大部分由湖北、江西、安徽等地供应，导致黄鳝价格过高。为了解决重庆黄鳝养殖苗种供应量不足的问题，本单位通过开展重庆本土黄鳝全人工繁殖技术研究，为重庆地区黄鳝人工繁殖提供技术支撑，促进黄鳝养殖产业可持续发展。     

PK-15细胞的THBS3基因缺失抑制PRV复制

为探索猪血小板反应蛋白3(thrombospondin 3,THBS3)在PRV复制中的功能，利用CRISPR/Cas9系统构建THBS3基因缺失的PK-15稳定细胞株。首先，根据THBS3基因序列和CRISPR/Cas9靶点设计原则设计并合成2对sgRNA序列，退火后连接到Lenti-CRISPRv2慢病毒表达载体；与慢病毒包装质粒共转染人胚肾细胞(HEK293T)获得重组慢病毒，收集细胞上清并离心去细胞碎片后转导PK-15细胞，进行嘌呤霉素筛选获得THBS3敲除的PK-15细胞株；将重组病毒rPRV-GFP接种至野生型和缺失型细胞评价病毒复制差异。结果显示，表达sgRNA的重组质粒构建成功；将收获的慢病毒转导细胞后通过筛选获得1株无THBS3蛋白表达细胞株(PK-THBS3-KO),通过测序发现外显子3有1个碱基的插入；感染试验显示，THBS3基因缺失后抑制了PRV复制。结果表明，通过CRISPR/Cas9系统成功构建了PK-15的THBS3基因敲除的稳定细胞株，PRV感染试验显示基因缺失后抑制了病毒复制。