应用ELISA技术诊断鸡新城疫

应用ＥＬＩＳＡ技术诊断鸡新城疫张岐蜀，胡子信（北京农学院牧医系，昌平１０２２０８）鸡新城疫（ＮＤ）的常规诊断方法是鸡胚病毒分离与鉴定和血凝试验与血凝抑制试验（ＨＡ和ＨＩ），但是，其所需时间长，不能满足目前生产上快速诊断这一迫切要求。为寻求一种快速的并...     

鸡抗猪大肠杆菌卵黄抗体的制造

鸡抗猪大肠杆菌卵黄抗体的制造胡子信，袁新，张岐蜀，崔德凤，门常平（北京农学院牧医系）为寻找一种造价便宜、效果确实、无副作用的特效防治制剂，进行了试制。一、菌苗的制造１．菌种：三株猪大肠杆菌标准菌种Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ，由中国兽医药品监察所提供。用...     

鸡马立克氏病三价疫苗的安全性及免疫效力研究

将MD三价疫苗以25000PFU／只的剂量颈部皮下接种1日龄SPF雏鸡，结果表明，疫苗的接种不影响鸡体重的增加；不引起鸡法氏囊、脾脏等组织器官发生MD组织病理学变化，对鸡安全无毒性。用SPF鸡评价MD三价疫苗的免疫效力，三批疫苗对RB1B超强毒株攻击的平均保护效力为95．99％，而且无论是用RB1B超强毒株还是用BJMDV-1血毒攻击，MD三价疫苗的保护效力明显高于HVT＋SB1二价疫苗及HVT冻干苗，好于CV1988疫苗；接种MD三价疫苗的4个品系的商品鸡群，抗RB1B超强毒株攻毒的平均保护效力为94．60％；在模拟MD强毒自然传染的试验中，MD三价疫苗的保护效力达到95．65％。上述效力试验的结果说明：MD三价疫苗的免疫接种可使鸡形成抗MD强毒攻击的坚强免疫力。     

国内外禽流感专利现状分析及对策建议

综述了禽流感国内外专利的申请现状，对申请的专利分布情况进行了归纳和总结，对国内外专利的申请现状进行了对比分析，并针对我国现状提出了如何合理利用现有专利技术的建议及今后发展策略。     

北美宠物产业发展概况

作者概述了北美宠物业的基本概况及发达的宠物业带来的经济和社会效益.     

棘球蚴病免疫诊断技术研究进展

综述了棘球蚴病的多种免疫诊断技术。皮内试验操作简便、迅速、敏感性高，但特异性较差，不宜作为诊断依据，可在流行病学调查中起筛查作用；间接血凝试验快速简易，重复性好，特异性和敏感性较高，具有一定的诊断价值；胶乳凝集试验虽然操作方法简便，但敏感性较低；ELISA操作简便，敏感性高，特异性强，适用于临床诊断和流行病学调查时使用，目前已作为包虫病临床辅助诊断的常规技术之一；DNA探针技术由于其敏感性高，特异性强，是将来发展方向之一。     

鸡抗猪大肠杆菌卵黄抗体的研制

将引起仔猪严重发病的产肠毒素性大肠杆菌Ｋ（８８）、Ｋ（９９）、９８７Ｐ三个菌株．制成大肠杆菌三价菌苗，免疫接种健康产蛋鸡，制成鸡抗猪大肠杆菌高免卵黄液，并用以对仔猪大肠杆菌病进行预防和治疗．取得了理想的效果．     

EDS－BH_（91）毒株血凝特性的研究

本试验主要从红细胞凝集谱、凝集解脱情况以及血凝性的影响因素几方面对本室分离的ＥＤＳ－ＢＨ９１毒株和ＥＤＳ－７６ＡＶ１２７毒株进行了比较系统的测定．试验结果表明：两毒株均能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞，而且２４小时内无解脱现象；对兔红细胞呈可疑；对人、奶牛、绵羊、猪、小鼠、驴的红细胞不能凝集。血凝反应的最适温度为３７℃；最适红细胞浓度为１％；分别以ｐＨ７．４．浓度为０．ｏ１、０．０４、０．１、０．２Ｍ以及浓度为０．ｏ１Ｍ，ｐＨ为５．８、６．８、７．４和８．０的ＰＢＳ作为稀释液进行血凝试验．其血凝滴度无显著差异；０．０５～０．３％的甲醛溶液４℃下处理病毒７２小时以及反复冻融病毒５次，其处理前后的血凝性均无显著差异。８０℃１０分钟就可以破坏病毒血凝性，而５６℃作用１小时对病毒血凝性无影响。０．１２５～０．５００％的胰酶对血凝性的影响不明显；病毒对氯仿不敏感，属于无囊膜病毒。     

用合成多肽为半抗原制备Bt Cry1Ab的单克隆抗体

由于Bt Cry1Aa、Cry1Ab和Cry1Ac晶体蛋白之间具有很高的同源性(82%~90%),采用常规的单抗制备方法很难制取特异性强的Bt Cry1Ab单抗,为了制备抗Bt Cry1Ab蛋白的特异性单克隆抗体(MAB),本研究从NCBI获得了Bt Cry1Ab蛋白的氨基酸序列,根据ANTHEPORT和DNAStar软件对其抗原性、亲水性和表位性分析结果选定BtCry1Ab特异性肽段进行人工合成,并将其偶联于匙孔血蓝蛋白(KLH)免疫动物,应用细胞融合技术制备了抗该肽段的杂交瘤细胞22株。通过ELISA试验从中筛选出与Bt Cry1Ab天然蛋白产生特异性反应的单克隆抗体杂交瘤细胞株一株(3A10)。经检测,其分泌的抗体亚类为IgG1型;轻链属κ型;杂交瘤细胞株染色体数目为89~108条;用其制作的腹水对Bt Cry1Ab合成肽的反应效价为1∶1×107;对Bt Cry1Ab天然蛋白的反应效价为1∶1×104;纯化后的抗体对Bt Cry1Ab合成肽的效价为1∶1×108;对Bt Cry1Ab天然蛋白的效价为1∶2×104。抗体的相对亲和力为0.5μg/mL,对Bt Cry1Ab蛋白的最低可检测值为10ng/mL。ELISA结果显示,3A10杂交瘤细胞株所分泌的MAB能特异性识别合成肽和Bt Cry1Ab蛋白,而对同源的Cry1Ac和Cry1Aa蛋白无交叉反应;本研究所制备的Bt Cry1Ab单克隆抗体能够对常规棉和抗虫棉(Gossypium hirsutumL.)进行有效的区分,并且能特异性的识别其中的Bt Cry1Ab蛋白。     

棘球蚴基因工程苗免疫羊血清抗体的检测

2000年5－12月用ELISA法对青海省贵南县的棘球蚴基因工程苗免疫羊血清抗体进行了检测。结果：免疫前抗体阳性率为30．3％，保护率为3．03；一免后阳性率为40．40％，保护率为2．02％；二免后阳性率为89％，保护率为72％。说明对羔羊加强免疫后可获得痕好的群体保护力。