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目前我国菠萝产区已相继报道3种菠萝凋萎相关病毒(PMWaV-1、PMWaV-2和PMWaV-3)。通过建立这3种菠萝凋萎相关病毒实时荧光定量RT-PCR(RT-q PCR)同步定量检测方法,为菠萝凋萎病毒的定性定量研究提供技术手段。根据这3种菠萝凋萎相关病毒的外壳蛋白基因序列分别设计特异性引物和Taq Man水解探针,在优化PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3三重RT-q PCR反应体系后,以PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3 CP基因目的片段的重组质粒为标准品绘制标准曲线,初步建立了PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3三重RT-q PCR检测方法。其中PMWaV-1标准曲线为y=-3.283logx+39.02,其扩增效率达101.7%,线性相关系数R2=0.999;PMWaV-2标准曲线为y=-3.393logx+37.53,其扩增效率为97.1%,线性相关系数R2=0.998;PMWaV-3标准曲线为y=-3.171 logx+38.48,其扩增效率为106.7%,线性相关系数R2=0.996;这表明3种菠萝凋萎相关病毒质粒标准品在同一反应体系中可稳定扩增,且线性关系表现良好,可用于后续试验。灵敏度试验数据表明,该方法对PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3的最低检测线分别为99,98,868拷贝;重复性试验表明PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3三重RT-q PCR扩增曲线的标准差小于0.267,变异系数小于1.44%。这表明建立的三重RT-q PCR检测方法可快速、准确、稳定地定量检测PMWaV-1、PMWaV-2、PMWaV-3等3种病毒,为PMWaV的定性定量研究和复合侵染机制的探索提供了技术基础。 相似文献
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分析了四川省东坡区农用地流转的现状、绩效和存在的问题,提出了建立健全农村社会保障制度、加强土地流转的规范管理和建立中介组织等促进农用地流转的对策建议。 相似文献
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水利工程水土保持准入条件 总被引:1,自引:0,他引:1
水利工程具有规模大、技术复杂、工期较长、投资多的特点,其占地和淹没面积大,永久占地多,特别是占用耕地多,挖填土石方量大,弃土弃渣量大点多。水利工程建设对江河、湖泊以及附近地区的自然面貌、生态环境、自然景观,甚至对区域气候,都将产生不同程度的影响。根据有关法律、法规、标准、政策、发展纲要以及行业发展规划,结合水利工程特点和水土流失特征,提出水利工程项目水土保持准入条件,以及水利工程项目水土保持方案的准入条件。 相似文献
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耕地是人类生存和发展最宝贵的物质基础。当前四川耕地资源数量不断减少,耕地质量日益下降,不利于经济社会的持续发展。本文分析了四川省耕地资源的数量和质量态势及影响因素,并提出了建立健全耕地保护制度、盘活存量土地和加强中低产田改造等实现耕地资源持续利用的政策建议。 相似文献
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