鸡HNF1α在大肠杆菌中的表达及其纯化

肝细胞核因子1α(hepatocyte nuclear factor 1α,HNF1α)调控众多的肝脏特异性基因,参与机体的脂类、糖类和蛋白质的代谢过程。以PCR技术从本研究室已构建的真核表达载体pc DNA3.1-HNF1α质粒上扩增获得鸡(Gallus gallus)HNF1α的编码序列,在其5′、3′端分别引入的NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点,以此位点将其克隆入p ET30a表达载体,并构建获得重组表达菌BL21-p ET30a-HNF1α。然后以不同浓度的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)(0.1~0.8 mmol/L)优化重组蛋白的诱导表达,并采用15℃的低温诱导重组蛋白的可溶性表达。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western blot分析结果显示,与未诱导组相比,重组表达菌在37℃下,经不同浓度的IPTG诱导4 h后均能产生一条约69 k D的蛋白条带,与预计目的蛋白HNF1α的大小相一致,且IPTG浓度在0.1 mmol/L时诱导重组蛋白的量高于其他浓度组,而低温诱导未能使重组蛋白可溶性表达。于是采用8 mol/L尿素变性包涵体,溶解重组蛋白,通过融合在HNF1α重组蛋白C端的6-His多肽,以Ni2+对重组蛋白进行亲和层析纯化,结合固—液两相法对目的蛋白进行原位复性。结果显示通过Ni2+亲和层析和目的蛋白原位复性相结合的一步纯化法,成功地从包涵体中获得了纯度高达95%以上的重组蛋白HNF1α,这为研究鸡HNF1α在糖脂代谢、机体生长及抗体的制备等方面提供了物质保障。     

微生物膜电极法测定水体中生化需氧量的研究

生化需氧量是一种表征水体有机污染程度的综合指标,广泛应用于水体监测中,运用微生物电极法测定淮河流域地表水和国家标准样品中的生化需氧量含量,并与稀释接种法的测定结果运用数量统计方法进行对比分析。     

渭滨区动物疫病流行病学调查中存在的问题及对策

科学开展动物疫病流行病学调查工作,对于掌握本地区疫病分布情况,分析疫情发生发展规律,开展疫情预测预警,提高动物疫病防控工作的科学性和针对性具有十分重要的意义。本文阐述了宝鸡市渭滨区近几年在动物疫病流行病学调查工作中存在的突出问题,同时就下一步如何做好动物疫病流行病学调查工作做了探讨,以便在今后工作中加以改进,逐步提高流行病学调查工作的质量和水平。     

施工阶段工程造价控制方法探究

建筑工程施工阶段中的工程造价控制对整个建筑工程的完成有着重要的影响,建筑施工也是所有调控项目中灵活性较大、难度系数较高的环节,从实际情况来看,施工过程中造价控制的内容主要包括对施工材料的选择、合同的制定与调整、建立科学合理的造价监督管理系统等,通过这些途径,提高资金和资源的有效利用率,以实现施工阶段工程造价控制与工程的高质量协调统一的目标。     

一种能诱导植物抗病虫的新型植物生化激活剂康壮素

康壮素是由植物病原细菌产生的蛋白激发子开发成的一种农用生物技术产品,剂型为3%微颗粒剂,微毒.2000年在美国获得登记,被美国环保局列为免检残留的农药产品,准许在所有作物上使用.2001年经我国农业部农药检定所审定取得了农药临时登记证,首批推荐在番茄、辣椒、油菜和烟草上使用.     

临夏地区扦插木槿病虫害调查及防治研究

为了解临夏地区木槿病虫害发生情况并进行有效防治，开展了临夏地区扦插木槿病虫害调查及防治方法研究。结果表明，临夏地区扦插木槿病虫害种类主要有细菌性叶斑病、灰霉病和蚜虫。所用药剂均对扦插木槿植株生长安全，无药害发生。20%噻菌铜悬浮剂500倍液为防治木槿细菌性叶斑病最佳药剂，施药2次，防效可达81.07%;50%嘧菌环胺水分散粒剂450 g/hm²为防治木槿灰霉病的最佳药剂，施药2次，防效可达86.81%;3%啶虫脒乳油2 000倍液对木槿蚜虫的防治效果最好，施药后7 d防治效果达92.67%。     

贵州剑河久仰香猪繁殖性状研究

1.1 试验动物 用剑河引进的久仰香猪、贵州大学香猪育种场饲养的剑白香猪以及贵州省畜禽良种场的提供长白猪进行饲养、繁殖及测定。     

贵州香猪遗传资源保护利用进展

香猪是原始小型猪种,具有近交不退化、可放牧饲养的特点,是加工高档猪肉产品的上佳原料,也是用作试验动物的理想猪种[1]。香猪作为一个独特而珍贵的中国地方猪种,从发现之日起,就引起世人关注。本文从香猪的发现、研究和开发利用三个方面介绍香猪遗传资源开发利用的历程。1香猪的发现香猪主产地位于云贵高原苗岭山脉向广西丘陵、盆地过渡的高山和低谷地带。当地地貌复杂,都柳江及其支流纵横交错,将山势切割得幽深而陡峭。中心产区位于我国于贵州