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沙门氏菌属是饲料中污染最高、危害最大的病原性细菌,此菌属种多,分布广,已知的血清型株有2449种。沙门氏菌对人和动物有致病力,如伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌等,动物通过饲料摄人大量菌体后,细菌在肠道繁殖并产生内毒素,对肠道产生刺激作用,引起严重的胃肠炎症状。该菌能引起动物的多种疾病,如禽霍乱、鸡白痢、马流产等,并造成沙门氏菌的传播循环即:饲料一动物一食品原料一人。饲料原料被沙门氏菌污染是造成饲料产品沙门氏菌污染的主要途径,因此国家农业部饲料中心把沙门氏菌的检测作为饲料原料抽检的必检的卫生指标之一。然而饲料中沙门氏菌的检验采用国标方法则相当复杂。为了探索更准确、快捷的检验方法,我们分别采用国标方法和参照法国生物梅里埃公司AOAC食品中沙门氏菌属的生物化学工具鉴定法进行。 相似文献
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为探索鸡新城疫疫苗的最佳免疫方式,通过3组不同的试验对14日龄雏鸡进行新城疫疫苗接种,采用间接酶联免疫吸附试验方法检测不同时间段鸡血清中的抗体水平,并利用SPSS16.0软件对各组数据进行方差分析。结果显示:肌肉注射新城疫疫苗7~21天时鸡血清NDV特异性HI效价与滴鼻试验组相比有较大的差异(P≤0.05),30天后两者差异变小(P≥0.05)。肌注组的抗体水平始终大于滴鼻组,肌注与滴鼻叠加免疫组的抗体水平一直大于肌注组,且90天后两者数值差异显著,肌注与滴鼻叠加免疫后效果最好且持续时间最长。 相似文献
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重组GP5AB蛋白间接ELISA检测PRRSV抗体方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用GST-GP5AB重组蛋白作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了用于检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法。抗原最适包被浓度为2μg/mL,最佳封闭液为0.15%BSA,37℃封闭2 h后,再4℃封闭24 h,血清最适稀释度为1∶200,其作用时间为60m in,酶标抗体最适稀释度为1∶20 000,最适作用时间为90 m in,37℃显色10 m in,S/P≥0.284为阳性,S/P≤0.26为阴性,介于二者之间为可疑的判定标准。该抗原与猪其他4种临床症状类似的疾病的阳性血清反应呈阴性。批内和批间重复性试验结果,变异系数均小于7%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用本方法初步检测了一些疫苗免疫仔猪血清样品,并与重组N蛋白和PRRSV抗原同时进行比较,结果显示3种抗原检测的结果基本一致。 相似文献
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根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株的基因序列,设计U1和U6两套PCR引物和荧光探针,建立了扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR用于检测美洲型PRRSV。用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA、RNA进行扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟(HCV)、猪伪狂犬(PRV)等7种病毒进行特异性检测。结果显示建立的扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR可用于检测PRRSV,其灵敏度为10个拷贝的质粒DNA,而与HCV等非PRRSV无交叉反应。本研究所建立的荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于PRRSV样品的检测。 相似文献
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根据GenBank已公布的传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)株S1基因序列及pPIC9K表达载体序列,设计1对IBV S1基因表达片段的PCR引物,用RT-PCR方法扩增出长度为1 566 bp IBV S1基因表达片段,5′端不含信号肽序列,3′端添加了终止密码子。用限制性内切酶SnaB和Not将S1基因和载体pPIC9K酶切回收后连接,构建了重组表达载体pPIC9K-S1。用限制性内切酶Bgl将表达质粒pPIC9K-S1线性化,然后用电转化的方法导入毕赤酵母GS115,在MD平板上生长的转化子经过PCR鉴定和表型筛选后,获得了整合型阳性重组菌株GS115/pPIC9K-S1 His Muts。将重组菌株在1%甲醇中进行诱导分泌表达,并对表达产物进行SDS-PAGE、Western blot分析。结果显示,IBV S1基因在毕赤酵母中成功获得了表达,表达蛋白的分子量约为76 000,能与IBV阳性血清特异性结合,表达的蛋白占上清中总蛋白量的12.5%。 相似文献
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自然感染日本血吸虫病耕牛血清循环抗原消长规律的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了观察疫区自然感染日本血吸虫病耕牛血清循环抗原消长规律,本试验将血吸虫病非疫区的水、黄牛各10头,转运至安徽省血吸虫病疫区,接受为期8周的自然感染。用斑点酶联免疫吸附试验测定牛血清循环抗原。结果,水、黄牛血清循环抗原滴度均于自然感染第4周后明显上升,水、黄牛自然感染第8周的血清循环抗原最高滴度分为1∶10240和1∶5120,最低滴度则分别为1∶1280和1∶640,水牛循环抗原滴度高于黄牛。虫荷数与血清循环抗原滴度未见有相关性。 相似文献