海南岛南繁区棉花根结线虫病发生情况调查及综合防治

用5点法调查海南岛南繁区棉花根结线虫病,并采集棉花根结线虫病样本。运用形态学观察和同工酶分析鉴定棉花根结线虫。结果表明：(1)南繁区的南滨农场和师部农场的棉花根结线虫病发病率达40%,发病程度最高为3级,根结指数最高为29;(2)鉴定该棉花根结线虫为南方根结线虫。初步提出棉花根结线虫病的防治方法主要是农业防治、生物防治、物理防治和化学防治相结合的综合防治方法。     

象耳豆根结线虫Hsp70基因的克隆与原核表达

采用RT-PCR、c DNA末端快速扩增法(RACE),克隆了象耳豆根结线虫Hsp70基因的全长c DNA(Me Hsp70)序列。Me Hsp70 c DNA全长2 203 bp,含有1 959 bp的开放阅读框,编码653个氨基酸,相对分子量为71.09 k Da,具有3段Hsp70家族的签名序列,Gen Bank登录号KF739434。同源性分析表明,氨基酸序列与其他真核生物的Hsp70序列具有很高的相似性。该Hsp70与其他物种中的Hsp70进行系统进化分析,结果显示,Hsp70的系统发育树不能体现物种间的亲缘关系,推测其反映的是不同物种间Hsp70生物学功能的相似性程度。构建了一个原核表达载体p EASY-E1-Me Hsp70,当IPTG终浓度为0.4~1.0 mmol/L时,能诱导表达融合蛋白。Me Hsp70基因的克隆和表达,将为象耳豆根结线虫的生态适应性机理研究提供依据。     

胡椒炭疽病病原菌生物学特性研究初报及杀菌剂室内毒力测定

室内对胡椒炭疽病病原菌生物学特性进行了试验研究。结果表明,其病原菌在4~38℃均能生长,最适温度为25℃;在光照黑暗各12 h的交替处理中菌丝生长最快;最适pH为6;最适氮源和碳源分别为可溶性淀粉和酵母浸膏。杀菌剂室内毒力测定结果表明,50%咪鲜胺锰盐可湿性粉剂对胡椒炭疽病病原菌菌丝的抑制效果最佳,EC_(50)仅为0.079 6 mg/kg;其次为25%吡唑醚菌酯乳油和43%戊唑醇悬浮剂,其EC_(50)分别为4.501 6 mg/L和8.542 5 mg/L。     

海南岛胡椒病原根结线虫种类鉴定

对海南岛12个县市胡椒产区的27个胡椒病原根结线虫种群进行了纯化培养,运用形态学、同工酶技术及mtDNA扩增技术进行了种类鉴定,结果发现27个纯培养种群中有26个是南方根结线虫,1个是花生根结线虫,南方根结线虫占了96.3％。     

八种杀菌剂对香蕉黑斑病的防治效果比较

比较250 g/L丙环唑乳油等八种常用杀菌剂对香蕉黑斑病的防治效果。结果表明，250 g/L丙环唑乳油750倍液的防效最好，施药3次后10天防效达83.68%，其次为125 g/L氟环唑悬浮剂900倍液和30%苯醚甲环唑悬浮剂3000倍液，防效分别为76.03%和74.58%。3种药剂在本试验浓度范围内未发现对香蕉产生药害，可推广使用。     

棉隆对番茄根结线虫病的防治效果

设98%棉隆MG 3个不同剂量、10%噻唑膦GR及空白对照共5个处理,进行防治露地番茄根结线虫病的田间药效试验,并从土壤2龄幼虫(J2)减退率和根结防效两方面进行防治效果评价。结果表明,移栽后30 d和60 d,98%MG 450 kg·hm-2处理区的J2减退率分别为91.74%和82.80%,375 kg·hm-2处理区60 d后的减退率达73.81%,表明其不仅对J2数量具有较好的控制作用,同时也具有一定的持效期。收获末期,其3个剂量处理的根结防效均在75%以上,最高达86.14%,对番茄根结形成表现出良好的控制作用,建议使用剂量为375~450 kg·hm-2。基于使用方法和环境因素,应根据实际情况有选择地应用。     

外来入侵生物相似穿孔线虫的风险分析

相似穿孔线虫（Radopholus similis）是一种危险性外来入侵生物,使发生的国家造成极大的损失。相似穿孔线虫具有很强的适应性,地理分布达到59个国家和地区,寄主达到360多种,且具有一定的检验难度,其入侵会造成农业生产上巨大的经济损失;结合国内寄主植物分布和种植情况,确定了其在中国具有传入、定殖和扩散的可能性。依据国际植物检疫措施标准（ISPM）规定的有害生物风险分析程序（PRAS）,采用多指标综合评估方法,对各指标进行赋值运算,获得总指标值R为2.6,符合高风险的检疫性有害生物标准。因此将相似穿孔线虫列入香蕉、花卉等经济植物的一类检疫性有害生物名单,实施外来入侵物种的风险管理。     

相似穿孔线虫伴生细菌群落多样性研究

[目的]揭示相似穿孔线虫伴生细菌群落物种丰度及其细菌多样性。[方法]通过构建细菌16S rDNA克隆文库,对阳性克隆进行ARDRA分析和构建系统发育树。[结果]依据97%序列相似性划分OTU,构建的细菌16S rDNA文库包含13个OTU,分别属于Alpha-proteobacteria、Betaproteobacteria和Gammaproteobacteria,其中优势菌群为Betaproteobacteria,特别是Burkholderia为优势细菌。[结论]相似穿孔线虫的伴生细菌多样性较高,这些细菌可能对相似穿孔线虫具有一定的生态意义。     

宏基因组学:热带冬季瓜菜病害生物防治新策略

微生物及其活性产物在植物病害防治中的作用日益凸显,加快了人们对其的研究和开发利用。然而,传统纯培养技术获得的微生物不足环境总量的1%,99%以上的微生物尚不能培养,阻碍了人们对其结构和功能多样性的研究。近年,随着宏基因组技术的发展,大量非培养来源的活性物质被挖掘并应用于病害防治,为微生物基因资源及其活性产物的研究和应用开辟了新的途径。本文就宏基因组学研究过程:宏基因组DNA提取、文库构建和筛选、高通量测序和序列分析等进行了回顾,探讨了宏基因组学在生物防治中的重要作用,并对宏基因组学这门新型的学科在热带冬季瓜菜病害生物防治中的应用前景进行了展望。