兽用中药安全性评价（二）——兽用中药毒性来源及分析

有些中药本身具有一定毒性 许多中药都有一定的毒性作用．这是导致畜禽中毒的常见原因之一。如夹竹桃是一种受人喜爱的庭院观赏植物．但如误饲或动物误食后会导致胃肠道异常病变．严重时出现心动过缓或过速．治疗不及时则会导致死亡：苦楝是一种落叶乔木．广泛分布于我国中部及西南部．还有川楝均生长于温暖地带村边、宅旁．当其成熟后果肉和树叶散落在地．畜禽误食后．会引起神经．消化和血液循环系统病变．严重时会因循环衰竭而死亡。另外．如木贼科植物木贼、萱草属植物萱草、乌头属植物乌头．藜芦属植物藜芦等均是易引起畜禽中毒的常见毒性中药。     

亚中毒剂量“喹胺醇”对大鼠组织形态学和饲料消耗盟影响

喹胺醇（Kuianchun）是一种新型药物饲料添加剂，其母体结构为喹噁啉-1，4-二氧化物，和喹烯酮、喹赛多等一样均属结构创新类药物，由中国农业科学院兰州畜牧与兽医研究所研制而成。前期研究结果表明，其抗菌促生长作用优于喹乙醇等，且毒性作用较小，合理使用后其在畜产品中的残留量很小。     

重金属镉离子免疫抗原初步制备与鉴定

选用螫合剂Isothiocyanobenzyl-EDTA（IEDTA）分别桥接载体蛋白KLH和BSA。络合重金属镉离子，初步制备免疫抗原和检测抗原，免疫Balb／C小鼠并制备抗血清；利用紫外分光光度法、三硝基苯磺酸法（TNBs）和测定抗体效价初步鉴定抗原。建立了重金属镉离子ELISA快速检测技术及单克隆抗体高效特异的免疫与检测抗原。抗原紫外吸收峰与载体蛋白紫外吸收峰有明显差异，2种抗原游离氨基酸含量在33％～40％之间，抗原蛋白含量均高于70％，血清效价在1：81920以上。结果提示，免疫抗原特异性较好。可用于单克隆抗体制备。     

Ⅰa型牛源无乳链球菌LZQ07006分离株BibA基因片段的分子特征分析

试验旨在对Ⅰa型牛源无乳链球菌BibA基因及其编码的蛋白进行分子特征分析,为进一步研究BibA蛋白的表达及免疫原性提供理论依据。采用PCR技术扩增牛源无乳链球菌LZQ07006分离株BibA基因片段,并将其克隆入pMD20-T载体后测序,采用生物学软件对BibA基因及其推导的蛋白进行生物信息学分析。结果显示,LZQ07006菌株BibA基因片段长度为1185 bp,未出现基因缺失,编码395个氨基酸,与GenBank中已发表的不同血清型的无乳链球菌核苷酸同源性和推导的氨基酸同源性分别为45.0%～99.8%和12.3%～99.5%;BibA基因片段是一个稳定的分泌性外膜蛋白,亲水性较好,存在1-32位氨基酸的信号肽,剪切位点在第32-33位氨基酸之间的蛋白片段上。因此,牛源无乳链球菌BibA蛋白可作为奶牛乳房炎诊断和预防的应用性候选蛋白,但需深入研究。     

种子液传代次数对益生菌FGM株发酵黄芪转化多糖的影响

益生菌FGM株发酵黄芪后,产物粗多糖得率显著提高。为进一步提高FGM株发酵黄芪转化多糖的稳定性,本试验将连续传代的FGM株种子液接种黄芪进行液体发酵,采用细菌平板计数法和苯酚-硫酸法分别测定发酵前、后的细菌总数和发酵后黄芪多糖的含量,并对结果进行了统计学分析。结果表明菌种在多次连续传代后会产生菌种退化现象,发酵产物中多糖含量与种子液细菌总数呈极显著相关（P=0.007）,其中第4代种子液发酵黄芪转化多糖的性能最高。     

主成分分析法与聚类分析法在胎衣不下奶牛血液生化研究中的应用

通过分析胎衣不下奶牛血液生化指标的变化特征,为奶牛胎衣不下早期诊断方法的建立提供依据。产犊后立即无菌采集47头奶牛血液,其中25头为胎衣正常排出奶牛,22头为胎衣不下奶牛;血液生化分析仪检测血清生化指标,主成分分析法与聚类分析法分析检测结果。结果表明,16项血清生化指标被聚类成3个主成分,主成分聚类分析的结果与临床采集样品的分类结果一致;与胎衣正常排出奶牛相比,胎衣不下奶牛的血清中乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷氨酰胺转移酶、肌酸激酶水平显著升高。表明,主成分分析和聚类分析可以有效地区别胎衣不下奶牛血清和胎衣正常排出奶牛血清,因此可以通过此方法对奶牛产后胎衣不下的发生进行提前诊断;还表明奶牛胎衣不下的发生不仅与蛋白质代谢、离子代谢和肌肉代谢紊乱有关,而且肝脏和肾脏的机能损伤也可能导致胎衣不下。     

益生菌发酵提高黄芪根、茎、叶活性成分含量的研究

黄芪药物资源的利用往往仅限于黄芪的根部,而黄芪茎、叶却被大量废弃,造成了药物资源的严重浪费。试验旨在采用益生菌发酵黄芪,研究黄芪根、茎、叶中黄酮类、皂苷类及黄芪多糖等有效成分含量的变化,以期高效利用黄芪。采用从鸡肠道分离保存的一株益生菌（FGM）,用于发酵黄芪的根、茎、叶。结果显示,经FGM发酵后,黄芪根、一年生茎、两年生茎、一年生叶、两年生叶中粗多糖含量分别提高177.46%、227.27%、207.11%、170.61%、182.28%;总黄酮含量分别提高55.67%、33.68%、30.04%、-8.17%、-6.57%;总皂苷含量分别提高68.50%、55.91%、55.71%、40.93%、46.13%。以上结果表明,利用益生菌发酵可使黄芪各部位中主要活性成分含量提高,这对高效利用黄芪、进一步开发传统中药资源有非常重要的意义。     

抗生素后效应及其应用研究

近年来国内外的研究发现，抗菌药物大都具有抗生素后效应（PAE），可以利用PAE在设守、给药方案时适当延长给药间隔时间，减少给药次数，合理联用以及作为评价兽药药效的一个新的参数。本文就PAE的产生机制、抗菌药物的PAE及其在兽医兽药上的研究与应用作如下综述。     

益生菌FGM葡萄糖激酶基因（glcK）在黄芪发酵中的表达

旨在分析益生菌FGM在黄芪发酵过程中的生长动态,为阐述其作用机理奠定基础。采用平板计数法对益生菌FGM在黄芪发酵中的生长动态进行检测,同源克隆法克隆糖酵解途径中的限速酶葡萄糖激酶glcK基因序列,并运用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术分析其在黄芪发酵不同阶段的表达水平。结果表明：成功克隆得到glcK基因一段382 bp的片段（GenBank登录号JX976291）,其序列一致性为83%～85%。实时荧光定量PCR结果显示,在FGM发酵6 h内,glcK基因表达上调且呈逐渐上升趋势,至对数期后期6 h表达水平达到最高（4.63倍）;稳定期初期8 h时表达水平显著下降（P<0.05）,10 h至发酵结束基因表达下调。可见：在黄芪发酵6 h内FGM处于对数生长期,葡萄糖经糖酵解途径代谢产生ATP供细菌生长代谢利用,10 h后开始进入稳定期并进行次级代谢。