鸡源志贺菌16SrRNA基因克隆、测序及同源性分析

目的:建立鸡源志贺菌的16SrDNA序列分析方法从而进一步从基因水平鉴定鸡源鲍氏志贺菌。方法:用PCR扩增出鸡源鲍氏志贺菌16SrRNA的部分基因(16SrDNA)并测序,将所获得的序列与GenBank中人志贺菌序列相比较,计算种间相似性,并构建志贺菌的系统发育树,对分离株进行分类与鉴定。结果:首次研究发现鸡源志贺菌的16SrDNA序列与已知的人鲍氏志贺菌同源关系最近,同源性达99·7%,与人福氏志贺菌的同源性为96·0%。结论:16SrDNA序列分析鉴定志贺菌是一种快速、可靠的方法。     

猪圆环病毒2型灭活疫苗种毒株的筛选

为筛选满足猪圆环病毒2型灭活疫苗制苗要求的毒株,选择河南省8个地区的8株猪圆环病毒2型分离株进行抗原性分析,将各分离株培养后用不同滴度的病毒原液和其分别稀释至同一滴度(4.233×10⁴拷贝/μL)的病毒液分别制成油佐剂灭活疫苗,免疫小鼠后采血测定其抗体动态水平,以进行免疫效力评价。结果显示,8株圆环病毒2型分离株中8#和12#分离株原液制备的疫苗免疫后诱导产生的抗体水平较高,二免后1周抗体水平即高于1∶800,达到猪圆环病毒2型灭活疫苗的国家质量标准要求,3周时达到高峰,比对照商品疫苗诱导产生的抗体水平更高;其分别稀释130倍和463倍后制备的疫苗诱导产生的抗体水平在二免后3周也能达到1∶800。提示,猪圆环病毒2型8#和12#分离株毒价高,免疫效力良好,是理想的疫苗候选株。本研究丰富了猪圆环病毒2型灭活疫苗毒株的种毒资源,为研制高质量的猪圆环病毒2型疫苗奠定了基础。     

雏鸡肠组织β1基因的鉴定及时空表达特性

设计1对引物,建立RT—PCR方法对β1基因mRNA进行鉴定;以GAPDH基因为内参,建立检测鸡β1基因表达水平的sYBRGreenI实时荧光定量PCR方法,并用此方法测定1～20日龄雏鸡不同肠段组织81基因表达水平。结果显示,从鸡肠组织成功鉴定出β1基因mRNA;检测内参基因GAPDH和目的基因β1的实时荧光定量PCR方法扩增效率一致（扩增曲线斜率差〈0．1）,满足使用比较Ct值法对B1基因mRNA进行相对定量分析的前提;扩增曲线、熔解曲线及凝胶电泳结果提示该方法特异性好。实时荧光定量PCR检测结果表明,1日龄雏鸡十二指肠和盲肠、10日龄雏鸡空肠和直肠、5日龄雏鸡回肠组织中β1基因相对表达量最高。结果表明,鸡肠组织中存在β1基因表达,并在不同日龄不同肠段表达水平存在差异。     

关于土地流转及适度规模经营

规范土地流转,促进农业适度规模经营,不仅对农村经济发展及农民增收有重要作用,也是社会主义新农村建设的客观要求,必须重点关注。本文主要从当前李埝乡土地流转及适度规模经营情况出发,对如何加快农村土地流转,促进土地适度规模经营进行探讨。     

微波辅助酸水解褐藻糖胶的研究

[目的]研究微波辅助酸解在低分子量海带褐藻糖胶制备中的可行性。[方法]采用酸提取法制备海带褐藻糖胶，测定在不同HCl浓度(0、1、2 mol/L)、不同降解时间(40、50、60 min)、不同降解温度(70、80、90℃)条件下微波辅助酸解得到的褐藻糖胶的分子量，分析不同降解条件对褐藻糖胶分子量的影响，并与水浴辅助酸解的结果进行对比分析。[结果]随着HCl浓度、降解时间、降解温度的升高，酸解产物的分子量降低，且温度对降解产物分子量的影响最大。与水浴加热相比，微波辅助酸解降解产物的分子量更低。在80℃,HCl浓度为1 mol/L,降解40 min以上，比较容易制备低分子量褐藻糖胶。微波比水浴加热更容易对褐藻糖胶的硫酸基造成破坏。在2 mol/L HCl条件下，微波和水浴辅助酸解60 min,分别在70和90℃观察到明显的硫酸基脱除现象。[结论]采用微波辅助酸解法制备低分子量褐藻糖胶时，要注意硫酸基脱除的问题。     

乙醇-硫酸铵双水相体系萃取虾壳中虾青素研究

采用乙醇-硫酸铵双水相制备虾壳中的虾青素，探索虾壳中虾青素提取的条件。结果表明：采用乙醇溶液，料液比1∶15,每次提取3 h,提取2次，提取效果较好。采用乙醇-硫酸铵双水相萃取虾青素，虾青素主要集中在上下两相之间，最佳条件：20%硫酸铵∶虾青素乙醇提取液(v/v)=2.5∶2.0,沉淀率为89.09%。经薄层色谱法和高效液相色谱法检测，双水相萃取可使虾青素提取液中的各类型虾青素都沉淀。     

仔兔大肠杆菌和志贺氏菌混合感染性肺炎病例

<正>1发病情况2021年9月13日，河南省荥阳市某农家乐主带死亡的比利时杂交兔到河南农业大学动物医学院就诊。该农户共养殖杂交兔约800只，其中种兔200多只。种兔免疫过兔瘟疫苗、多杀巴氏杆菌病疫苗和魏氏梭菌灭活苗。7月20日前，兔群基本正常。“郑州7.20”洪水冲塌兔舍，直接冲走100多只兔。洪水过后，兔舍潮湿，约8月初开始发生杂交兔死亡，死亡兔多为1～2月龄。种兔(成年兔) 2～3 d死亡1只，种兔3～12 d产仔一批。阴雨天持续一月余，期间杂交兔持续死亡，平均每天死亡5～8只。受新冠疫情影响未及时就诊。在兔发病初期，畜主曾给予抗生素、黄芪多糖等药物进行治疗，发现及时治疗的杂交兔，药物治疗有效。截至就诊时，种兔共死亡50多只，仔兔共死亡300多只。畜主每天仅早上喂一次兔全价料，其余时间全部喂草。种兔圈养，幼兔散养，水灾后饲养方式均改为笼养。农家乐养有鸵鸟，但鸟舍与兔舍中间有2 m隔离墙。