A fast,low‐cost and efficient method for the diagnosis of sperm DNA fragmentation in several species

Sperm DNA fragmentation is a condition that interferes directly in the reproductive efficiency. Currently, there are several methods for assessing the sperm DNA integrity, such as Alkaline Comet, TUNEL and Sperm Chromatin Structure Assay. However, many of these techniques are laborious and require high‐precision equipment. Thus, the development of new techniques can optimize the evaluation of sperm DNA damage. Therefore, the aim of this study was to standardize the toluidine blue (TB) stain technique for the analysis of DNA fragmentation of dog, cat, bull, stallion and ram spermatozoa. For this purpose, we used six animals of each specie (n = 30), in reproductive age. Sperm was collected by different methods according to the particularities of each species, and such samples were divided into two aliquots: a sperm sample was kept at 5°C (considered as intact sperm DNA), and the remaining samples were submitted to the induction of DNA fragmentation by exposure to ultraviolet light for 4 hr. Samples were then mixed with the intact sample to obtain known and progressive proportions of sperm with fragmented DNA (0%, 25%, 50%, 75% and 100%). Semen smears were performed and subjected to staining with TB. Blue‐stained spermatozoa were considered to have DNA fragmentation. We observed high linear regression coefficients between the expected proportion of damaged DNA and the results of TB for dog, cat, ram, bull and stallion samples. In conclusion, TB stain was considered a fast and effective technique for the study of spermatozoa DNA in several species.     

亚龙湾海域生态旅游及环境保护

从地理位置、水质及沉积物、红树林、珊瑚礁海岸等方面介绍亚龙湾生态自然环境特点，分析其生态旅游发展现状、形式及成效，提出对亚龙湾生态环境保护的建议。     

椰子组培研究四十年

组织培养对于椰子快速繁殖以及全球椰子产业发展具有重要意义。本文就40年来国内外在椰子组培快繁技术,包括椰子组培技术的重要性,不同外植体如胚芽、花序、子房等在组织培养中的应用与优劣,不同培养基和培育环境对组培效果的影响等要素,进行了详细的总结和讨论。同时总结了椰子组培快繁技术的进展,分析了目前限制椰子组培快繁技术发展的因素,提出了应对策略与具体建议。本文对椰子快繁技术及椰子种质资源保存具有参考价值。     

不同固定条件对几种植物样品超微结构的影响

为比较几种固定条件对不同植物材料样品电镜超微结构图像清晰度的影响。以3个不同科属4种植物[油棕(Elaeis gineansis Jacq.)、拟南芥(Arabidopsis thaliana.)、花生(Arachis hypogaea Linn.)、柱花草(Stylosanthes guianensias Sw.)]为研究主体代表,探讨了2.5%戊二醛与4%戊二醛固定过夜、锇酸固定2 h及过夜的制备方法对其叶片超微结构的影响,并成功观察了柱花草接种胶苞炭疽野生型菌株CH008后的病菌侵入过程。结果表明:油棕、拟南芥、花生及柱花草叶片经4%戊二醛与1%锇酸固定液固定过夜,其组织成像的效果均较为理想,各种细胞器整体信息丰富、结构组织完好、线条清晰。表明,此制备方法能够较好的保存植物叶片和细胞组织,提高制样的成功率及观察分辨率。     

我国管理科学研究热点及代表人物的可视化分析

进入新世纪以来，管理科学在我国取得了蓬勃的发展，逐渐形成了庞杂的学科知识体系，与此同时，管理学也涌现了一大批管理科学专家，并在各自的领域中作出了卓越的贡献。利用中国期刊全文数据库（CNKI）2000~2009年的20种管理科学重要期刊文献为数据，从文献计量的角度对我国管理科学十年来的发展进行分析，通过可视化分析工具CiteSpace展示了企业与事业单位管理、管理基础与方法、宏观管理与政策研究三个主要的学科领域的代表人物和研究热点。     

干热河谷印楝树干液流密度动态变化特征研究

采用TDP技术对金沙江干热河谷元谋段主要造林树种印楝的树干液流密度动态变化进行了观测,得到3点主要结论:①无论干热季节或湿润季节,印楝树干液流密度昼夜变化的规律性较强,呈明显的单峰曲线;②由干热季节转向湿润季节时,印楝树干液流密度呈下降趋势,5年生印楝在5月、7月及10月的典型晴天里的树干液流密度日变化平均值分别为12.11、7.48及6.90cm3·cm-2·h-1;③在干热季节里印楝蒸腾耗水具有相当的被动性,而在湿润季节时其蒸腾耗水则表现出主动性和平氨性,反映了印楝在不同季节里的耗水机制差异.     

暖地泥炭藓(Sphagnum junhuhnianum)孢子形态及发育过程探讨

描述了暖地泥炭藓(Sphagnum junhuhnianum)孢蒴从翠绿色透明状球体历经黄绿色、淡褐色、褐色、具光泽的深咖啡色球体到最后喇叭状过程中孢子的形态特征.成熟孢蒴中孢子的数量(71 631±12 751)个.成熟孢子四面体结构清晰,极面观呈圆三角形,赤道面观呈近扇形,直径(23.27±1.05)μm,均出现三裂隙结构,唇状,稍细,长为极半径的2/3,裂隙表面布满疣状颗粒物,近极端三面凹陷无褶皱,分布少量疣状颗粒物,远端面不平整,布满疣状颗粒物.     

表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的重组乳酸菌的构建及蛋白免疫原性分析

试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌（Lactococcus lactis），为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序，根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化，再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中，并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞，构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000，经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后，对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛，在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清，用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示，PCR扩增到了1 149 bp的目的片段，乳酸菌密码子偏嗜性优化后，GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符，在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带，与预期蛋白大小一致，且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明，表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应，该重组菌具有较好的免疫原性。     

“互联网+农业”模式下食用菌的营销策略

在"互联网+农业"融合发展背景下,食用菌企业需要借助互联网,构建市场主导、数字驱动的全新营销战略,助力产品营销。以"互联网+农业"模式为研究视角,分析食用菌产品营销现状,提出发挥技术优势、挖掘用户需求和建设优质平台等营销建议,以助力食用菌产品市场营销与效益转化。     

TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠成纤维样滑膜细胞中PGE2分泌的影响

[目的] 进一步探讨牛磺鹅去氧胆酸（taurochenodeoxycholic acid,TCDCA）在抗炎免疫方面的潜在调节作用。[方法] 以AA大鼠成纤维样滑膜细胞作为研究对象,采用ELISA方法检测TCDCA和IL-1β作用下AA大鼠成纤维样滑膜细胞上清液中PGE₂的含量,分析TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠成纤维样滑膜细胞中PGE₂分泌情况的影响。[结果] TCDCA能够对IL-1β刺激下AA大鼠纤维样滑膜细胞PGE₂的分泌产生下调作用（P<0.05）。[结论] TCDCA对IL-1β刺激下AA大鼠成纤维样滑膜细胞中PGE₂的分泌具有抑制作用,为TCDCA在兽医临床应用提供依据。