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11.
兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
用兔出血症病毒(RHDV)单克隆抗体包被酶标板,以兔多克隆抗体作为夹心抗体,建立RHDV抗原捕获ELISA检测方法,优化反应条件并对该方法的敏感性、特异性、重复性、稳定性等指标进行了测试和评价。结果表明,单抗最佳包被质量浓度为1mg/L,兔多抗血清最佳质量浓度为4mg/L。本方法可特异性地检测出兔肝脏病料中的RHDV,纯化病毒的最低检出量为26μg/L。对已知阳性样品的检测显示,捕获ELISA检测的病毒滴度是HA试验的3~13倍。对67份可疑病料,捕获ELISA阳性检出率为62.7%,HA试验阳性检出率为55.2%。用不同批次包被的酶标板重复检测已知样品显示出良好的重复性。本方法敏感性、特异性、稳定性良好,可应用于RHDV的快速、批量、特异检测。 相似文献
12.
13.
14.
荒川库蠓人工繁殖的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
实验室人工模拟条件下成功地进行荒川库蠓的饲养和繁殖。荒川库蠓吸鸡血的饱血时间为10min,饱血率为88.46%,饱血库蠓饲养3d后产卵,产卵率为69.56%。产卵后第2天开始孵化,一般在24h内孵化结束,孵化率为76.75%。幼虫先后蜕皮3次,共分4龄幼虫,1-4龄幼虫的体长分别为:0.3-1.12mm,1.12-3.02mm,3.02-4.55mm和4.55-5.90mm,其幼虫期分别为7、4、4和5d。4龄幼虫化蛹2-3d后即羽化为成蠓,羽化为81.82%,不同温度条件对卵到成蠓的发育影响较大,26℃是荒川库蠓发育相对适宜的温度条件。 相似文献
15.
利用RAPD技术对不同地区及不同季节发生危害的柞蚕寄生蝇进行了遗传多态性研究。选取11个随机引物对14份供试材料的基因组DNA进行扩增,共扩增出140条稳定条带,其中128(91.43%)条为多态性条带,表明柞蚕饰腹寄蝇(Blepharipa tibialis)、秋柞蚕寄生蝇(未命名)及栗蚕寄生蝇(未命名)间具有丰富的多态性。各材料间的遗传距离在0.0214~0.5143之间,利用UPGMA法进行聚类分析,14份供试材料可聚为两大类:栗蚕(Dic-tyoplocajaponica)寄生蝇与寄生柞蚕的寄生蝇各聚为一类,其中来自河南省的柞蚕饰腹寄蝇自成一类,来自东北地区的柞蚕饰腹寄蝇与秋柞蚕寄生蝇又各自聚为一类。 相似文献
16.
鸡白介素8(cIL8)是9E3/CEF4基因编码的一种诱导型趋化因子。用RT-PCR方法,从鸡胚胚体总RNA模板中扩增cIL8的cDNA序列,测序后,将cIL8基因分别克隆入pGEX-6p-1载体和pFastBacI载体进行表达。利用SDS电泳分离原核表达的cIL8融合蛋白,制备鼠抗cIL8血清,并与昆虫细胞表达的cIL8进行免疫荧光(IFA)反应,同时对雏鸡外周血单个核细胞(PBMC)进行生物趋化试验。结果成功扩增了cIL8基因的cDNA序列,在大肠杆菌和昆虫细胞中均能表达,制备的鼠抗cIL8血清能与昆虫细胞表达的cIL8反应。重组cIL8在一定浓度范围内,可使PBMC发生趋化作用,最高趋化指数为4.38±0.49,且是典型剂量依赖的钟形趋化性反应曲线。本研究结果为cIL8的功能研究和探讨马立克氏病病毒类白介素8(vIL8)的生物学作用奠定了基础。 相似文献
17.
高效液相色谱法检测泰乐菌素在肉鸡组织中的残留 总被引:4,自引:0,他引:4
将肉鸡的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪组织制成匀浆,用乙腈、石油醚和二氯甲烷萃取、净化后,用乙腈定容。以乙腈- 甲醇- 0.005 m ol/ L磷酸二氢铵溶液(60∶30∶10)为流动相,用高效液相色谱检测。本法对溶解于乙腈中的泰乐菌素的最低检测限为 0.05 m g/ L,在肉鸡各种组织中的最低检测限为 0.10 m g/ L。标准曲线的线性范围为 0.10~6.40 m g/ L。泰乐菌素质量浓度为 0.10、0.80、6.40 m g/ L 时的批间变异系数分别为(2.3±0.2)% 、(1.9±1.3)% 、(2.6±0.9)% 。0.20、0.40、0.80 m g/ L 的泰乐菌素在以上 4 种组织的回收率均符合残留检测的要求。结果表明,本法是一种灵敏、精密、可靠的检测肉鸡组织中泰乐菌素残留的分析方法。 相似文献
18.
试验旨在分离鉴定犬副流感病毒(canine parainfluenza virus,CPIV),并对其生物学特性进行研究。用Vero细胞接种感染CPIV阳性犬肺脏组织,盲传4代,收集72 h病毒液进行RT-PCR鉴定、电镜观察、血凝试验、热敏性试验、紫外照射试验及病毒一步生长曲线的测定,同时扩增N基因进行序列分析,并构建系统进化树。结果显示,试验成功从出现咳嗽、流鼻涕等呼吸系统疾病症状的病犬肺脏中分离出1株CPIV,命名为CPIV-BJ01;RT-PCR扩增结果发现,在534 bp处有特异性目的条带。病毒电镜观察发现,其超微结构呈圆形、有囊膜、直径在80~200 nm之间;血凝试验显示,病毒在4和37℃均能凝集1%猪红细胞,与报道的CPIV血凝特性一致;病毒对热敏感,长时间高温下病毒毒价会随之下降;紫外照射可使病毒在短时间内对细胞的感染性急剧下降。病毒一步生长曲线测定结果显示,在12~48 h病毒高速增殖,细胞培养液中病毒滴度急剧上升,之后趋于稳定。CPIV N基因序列与19株有代表性的副流感病毒N基因相比,其核苷酸序列同源性为97.1%~99.8%。遗传进化分析表明,CPIV-BJ01与PIV5 1168-1(登录号:KC237064.1)和PIV5 ZJQ 221(登录号:KX100034.1)位于同一分支上,亲缘关系较近。 相似文献
19.
牛孕激素受体SNP分析及其与精液品质的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
孕激素受体(PR)对于正常雌性动物生殖功能的实现具有重要调节作用,该基因在雄性动物中生物学作用尚不十分清楚。本研究通过PCR-SSCP方法对种公牛群体的PR基因所有外显子及5′UTR多态性进行检测。结果表明:PR基因外显子4、外显子8及5′UTR均检测到了多态性位点,其他外显子没有发现遗传多态性;测序表明外显子4发生了A20G突变,没有导致氨基酸的改变,外显子8发生G86T和A207T突变,其中G86T突变导致所编码的G(甘氨酸)变成V(缬氨酸),A207T突变导致所编码的Q(谷氨酰胺)变成H(组氨酸),5′UTR处存在G-1809A和C-1808G碱基突变。最后用最小二乘分析方法对其基因型和生产性状进行了相关性分析,第4及第8外显子的遗传多态性与部分精液品质性状呈显著相关。 相似文献
20.
在草甸盐土上种植鲁梅克斯Rumex patientia×R.tianschanicus cv.Rumex K-1,脱盐改土效果十分明显.种植鲁梅克斯3~4年,鲜草产量达100.51 t/hm2,pH值由8.43降为7.99,耕作层土壤总孔隙度增加5.29%~7.06%,土壤容重降低0.14~0.21 g/cm3,水稳性团粒结构增加23.14%~32.34%,自然含水量增加72.12~89.44 g/kg,土壤有机质、速效氮、磷、钾亦随之增加. 相似文献